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sBLyS突变体酵母表达载体的构建: 2006年; 目的构建人BLyS胞外区(soluble BLyS)突变体毕赤酵母分泌型表达载体,为深入探讨BLyS的功能和机制创造条件。方法以构建的人pUC19/sBLyS及其突变体重组质粒为模板,利用PCR扩增出6×his/sBLyS及其突变体的cDNA,克隆入酵母表达载体pPIC9K;行序列测定后电转化入毕赤酵母GS115,并进行表型筛选和G418抗性筛选;对高拷贝整合的重组酵母表达菌株进行PCR鉴定。结果构建得到酵母融合重组表达载体pPIC9K/6×his/sBLyS及其突变体;经G418浓度梯度筛选及PCR鉴定得到高拷贝整合的重组酵母表达菌株。结论成功构建了人sBLyS及其突变体的真核表达载体,为获得人sBLyS及其突变体蛋白,进一步研究BLyS的生物学功能奠定了基础。; 黄刚何凤田连继勤李蓉芬胡颖; 关键词：毕赤酵母突变体

Tumor targeting of Vincristine by mBAFF-modified PEG liposomesin B lymphoma cells: Malignant hematologic diseases are highly malignant and refractory to conventional therapies. Ligand-mediated ...; Li Zhang Huiguang Gao Linfeng Chen Bo Wu Yingru Zheng Rongxia Liao Yu Jiang Fengtian He* (Department of Biochemistry and Molecular Biology,Third Military Medical University,Chongqing 400038,P.R.China); 关键词：LIPOSOME VINCRISTINE

重组人BAFF_(134～285)的克隆及在大肠杆菌中的高效表达: 2005年; 目的克隆人TNF家族的B细胞激活因子(BcellactivatingfactortotheTNFfamily,BAFF)胞外区cDNA,并进行高效表达和纯化。方法提取人新鲜扁桃体组织总RNA,经RTPCR扩增编码人BAFF胞外区134～285氨基酸残基cDNA,经序列测定后,克隆至pQE80L载体中,并转化大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导表达及Ni2+NTA柱层析纯化目的蛋白,最后经SDSPAGE和Westernblot检测。结果RTPCR扩增得到了459bp的cDNA片段,序列分析与GenBank中报道的编码人BAFF134～285的cDNA序列一致,SDSPAGE及Westernblot证实表达蛋白确实为6×HisBAFF134～285融合蛋白,并存在于包涵体中。结论利用大肠杆菌可高效表达rhBAFF134285,为进一步研究其生物学活性奠定了基础。; 陈麟凤何凤田李蓉芬钟小林; 关键词：大肠杆菌 GENBANK CDNA片段 CDNA序列 IPTG

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国家自然科学基金(30370319)