江苏省“333”工程基金项目(BRA2012103)
- 作品数：2 被引量：6H指数：1
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- 发文基金：镇江市科技支撑计划(社会发展)项目江苏省“333”工程基金项目国家自然科学基金更多>>
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- RNA干扰下调叉头转录因子M1基因对人肿瘤细胞生长、克隆和侵袭的影响被引量：6
- 2014年
- 目的 观察RNA干扰下调叉头转录因子M1（FoxM1）基因对肿瘤细胞生长、克隆形成和侵袭的影响。方法 培养8株人卵巢癌细胞,采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）方法检查FoxM1基因mRNA水平。设计并用化学方法合成FoxM1基因小干扰RNA（siRNA）,转染处理SKOV-3细胞,选择下调效果最好的siRNA。SKOV-3和HO-8910PM细胞均分为3组：空白对照组（Con-A）、空载质粒对照组（Con-B）和siRNA组（siRNA）,其中,siRNA组以FoxM1 siRNA转染处理。分别应用FQ-PCR和Western blot方法检测各组癌细胞FoxM1基因mRNA和蛋白水平。以细胞计数试剂盒（CCK-8）方法检测生长,以平板克隆方法检测癌细胞克隆形成能力,以Transwell方法检测癌细胞侵袭能力。结果 8株卵巢癌细胞株中,SKOV-3和HO-8910PM细胞FoxM1基因mRNA表达水平最高。FoxM1基因siRNA转染SKOV-3细胞后,72 h Con-A、Con-B和siRNA组吸光度（A）值分别为2.455±0.033、2.442±0.025和1.312±0.028（P〈0.05）,平板克隆结果显示,Con-A、Con-B和siRNA克隆形成数分别为（100±5）、（93±8）和（51±3）个（P〈0.05）,Transwell结果显示,Con-A、Con-B和siRNA组穿膜细胞数分别为（93±4）、（86±3）和（36±1）个（P〈0.05）。FoxM1基因siRNA转染HO-8910PM细胞后,72 h,Con-A、Con-B和siRNA组A值分别为2.691±0.039、2.560±0.033和1.455±0.027（P〈0.05）,平板克隆结果显示,Con-A、Con-B和siRNA克隆形成数分别为（146±7）、（145±8）和（85±2）个（P〈0.05）,Transwell结果显示,Con-A、Con-B和siRNA组穿膜细胞数分别为（449±15）、（445±11）和（151±9）个（P〈0.05）。结论 FoxM1基因在人卵巢癌细胞生长、增殖和侵袭起重要作用。
- 范钰徐娟周永静陈琳赵松兰
- 关键词：卵巢肿瘤RNA干扰
- RNA干扰假基因Cripto-3表达对大肠癌细胞增殖和侵袭的影响
- 2013年
- 目的:探讨RNA干扰下调假基因Cripto-3(Cr-3)对人大肠癌细胞SW480增殖和侵袭的影响。方法:将大肠癌细胞随机分为5组:空白对照组,空载对照组,siRNA转染组(5 nmol/L组、10 nmol/L和20 nmol/L组)。将Cr-3小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染人大肠癌SW480细胞后,采用实时荧光定量PCR检测Cr-3表达水平;分别采用平板克隆形成实验和Transwell法检测大肠癌细胞的增殖和侵袭能力。结果:与空白对照组和空载对照组比较,siRNA转染组Cr-3表达水平均明显下降,且呈浓度依赖性(P<0.05),癌细胞克隆形成和穿过滤膜的细胞均明显减少,且与浓度相关(P<0.05)。结论:假基因Cr-3在大肠癌细胞增殖侵袭中起着重要的作用,可能是大肠癌诊疗中的一个重要靶点。
- 朱灵蒋鹏程满昌峰彭辉勇徐娟范钰
- 关键词：大肠癌小干扰RNA
