广西大学科研基金(20090046) 作品数:4 被引量:4 H指数:1 相关作者: 黄时海 李湘萍 汪晟 夏小斌 李灿明 更多>> 相关机构: 广西大学 更多>> 发文基金: 广西大学科研基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 轻工技术与工程 理学 更多>>
荧光定量PCR分析水牛胚胎致密化相关基因表达方法的建立 2010年 胚胎致密化是哺乳动物早期胚胎发育过程中一个非常重要的环节,有研究发现致密化相关基因的表达水平与体外发育胚胎的质量之间存在着相互关联作用。为了分析水牛胚胎早期发育中致密化相关基因在mRNA水平上的表达并确定其定量分析方法,本研究根据黄牛有关基因序列设计了Cx43、Cx31、E-cad以及组蛋白基因(Histone H2A)引物序列,分析了黄牛和水牛致密化基因的同源性,并确定各目的基因在水牛胚胎的SYBR Green I实时定量PCR反应条件。 黄时海 薛林涛 黄华 石德顺 李湘萍关键词:荧光定量PCR 水牛胚胎 HPLC—ELSD法测定麦角固醇和光化学异构体 被引量:1 2009年 为测定麦角固醇和维生素D2及其他光化学异构体,研究确定了HPLC—ELSD测定的色谱分离条件:KromasilC18柱(4.6×250mm,5μm),流动相为体积比95:5甲醇-水溶液,流速1.3ml/min,蒸发光散射检测器漂移管温度为75℃,气体流量1.6L/min。在此条件下,各组分得到有效地分离,麦角固醇和维生素D2色谱峰面积的自然对数与浓度的自然对数呈良好的线性关系(r〉0.997),精密度RSD为1.89%~2.75%,最低检测限为0.05--0.1μg,回收率测定值为101.4%~102.8%。 黄时海 夏小斌 汪晟 李灿明 吴孔阳 陈桂光 梁智群 李湘萍关键词:蒸发光散射检测器 麦角固醇 维生素D2 HPLC—ELSD法测定维生素D_3和光转化异构体 被引量:2 2010年 为测定维生素D3及其它光转化异构体,研究确定了HPLC-ELSD测定的色谱分离条件:KromasilC18柱(4.6×250mm,5μm),流动相为体积比90∶10甲醇一水溶液,流速1.2mL/min,蒸发光散射检测器漂移管温度为80℃,气体流量1.8L/min。在此条件下,各组分得到有效地分离,色谱峰面积的自然对数与浓度的自然对数呈良好的线性关系(r〉0.997),精密度RSD为1.25%-2.01%,最低检测限为0.05-0.3μg,回收率测定值为98.3%-101.8%。 黄时海 汪晟 康超 夏小斌 何鑫平 李灿明 李湘萍关键词:蒸发光散射检测器 维生素D3 水牛体外培养早期胚胎中致密化相关基因mRNA的表达分析 被引量:1 2010年 为了研究致密化相关基因在水牛体外培养早期胚胎中的mRNA表达情况,采用Taqman探针法和SYBR GreenⅠ染料法分别分析了缝隙连结蛋白43和31(Cx43、Cx31)、上皮钙调素蛋白(E-cad)3个基因在水牛体外成熟卵母细胞及培养的早期胚胎中的mRNA表达。结果发现,Cx43基因在水牛成熟卵母细胞中表达量最高,显著高于后3个发育阶段(P<0.05);Cx31基因mRNA表达趋势与Cx43相反,成熟卵母细胞中表达量最低,囊胚期最高,随体外胚胎发育Cx31mRNA表达量逐渐增高;E-cad基因在体外培养的各阶段胚胎中mRNA表达无显著差异(P>0.05)。以上结果表明,3个致密化相关基因在水牛体外培养早期胚胎中均有表达,但是具有明显不同的mRNA表达方式。 黄时海 孙洪亮 康超 陆凤花 石德顺 李湘萍关键词:荧光定量PCR 水牛 水牛体外受精早期胚胎致密化基因mRNA表达水平分析 胚胎致密化是哺乳动物早期胚胎发育过程中一个非常重要的环节,有研究发现致密化相关基因的表达水平与体外发育胚胎的质量之间存在着相互关联作用。为了研究致密化相关基因在水牛体外培养早期胚胎中的mRNA表达情况,首先根据黄牛有关基... 黄时海 孙洪亮 康超 陆凤花 石德顺 李湘萍文献传递