贵州省科学技术基金(J[2013]2312)
- 作品数：6 被引量：29H指数：3
- 相关作者：冯继红罗军敏徐林于伟娜袁建波更多>>
- 相关机构：遵义医学院遵义医学院附属医院安徽省肿瘤医院更多>>
- 发文基金：贵州省科学技术基金贵州省优秀科技教育人才省长资金项目贵州省科技厅社会发展攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- PRDX2基因沉默促进结直肠癌细胞上皮-间质转化增强侵袭转移能力被引量：7
- 2015年
- 目的探讨Peroxiredoxin 2(PRDX2)基因沉默在结直肠癌细胞上皮-间质转化(EMT)中的作用及其参与侵袭转移的可能机制。方法将带有抗性的对照shRNA(shRNA-Control)和PRDX2 shRNA(shRNA-PRDX2)慢病毒颗粒分别转染结直肠癌SW480细胞,转染后细胞分为PRDX2沉默组(shRNA-PRDX2)和空载对照组(shRNA-Control)。采用免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法分别检测两组细胞中PRDX2蛋白和mRNA表达;以5 ng/m L的TGF-β1作用两组细胞,在0、48、72 h观察两组细胞形态学变化;划痕实验和Transwell小室分别检测两组细胞体外迁移和侵袭能力;Western blot和qRT-PCR法检测E-cadherin、Vimentin、Snail、Twist1和MMP-9蛋白及mRNA表达。结果与对照组相比,PRDX2沉默组细胞PRDX2蛋白和mRNA的表达显著降低(P<0.05),成功建立PRDX2基因沉默稳定细胞株;经TGF-β1作用后,PRDX2沉默组细胞呈纺锤体样间质细胞表型,且迁移和侵袭能力明显增强;E-cadherin蛋白及mRNA水平表达显著下降,Vimentin、Snail、Twist1和MMP-9蛋白及mRNA表达水平均明显增加(P<0.05)。结论 PRDX2基因沉默可促进结直肠癌SW480细胞发生EMT,从而增强细胞的侵袭和转移能力,可能与其转录调节Snail、Twist1表达有关。
- 于伟娜冯继红丁陈波高绍莹徐林袁建波罗军敏
- 关键词：PEROXIREDOXIN基因沉默结直肠癌上皮-间质转化
- Gab2过表达对人结直肠癌SW480细胞株增殖和迁移的影响被引量：3
- 2015年
- 目的:探讨Gab2过表达对人结直肠癌细胞株SW480增殖和迁移能力的影响。方法:用携带Gab2基因的重组慢病毒颗粒(LV-Gab2-GFP)感染人结直肠癌SW480细胞株,作为实验组(LV-Gab2-GFP组);以对照慢病毒颗粒(LV-GFP)感染人结直肠癌SW480细胞株,作为阴性对照组(LV-GFP组);空白对照组常规培养,不作任何处理。用RT-PCR和Western blot法分别检测细胞中Gab2 mRNA和蛋白表达的水平;CCK-8法和平板克隆实验检测细胞增殖能力的变化;划痕愈合实验检测细胞迁移能力的变化。结果:RT-PCR和Western blot均显示LV-Gab2-GFP组Gab2的表达均较对照组显著增高;与对照组比较,Gab2过表达显著增强人结直肠癌SW480细胞的增殖和迁移能力。结论:Gab2过表达可以促进SW480细胞增殖和迁移能力。
- 丁陈波冯继红杨丽文李龙梅李姗姗陈超罗军敏
- 关键词：结直肠癌慢病毒增殖迁移
- Gab2在结直肠癌组织中的表达及其意义被引量：3
- 2015年
- 目的:探讨Gab2在结直肠癌组织中的表达及其意义。方法:应用免疫组化方法检测78例结直肠癌及46例癌旁正常组织中Gab2的表达水平,并结合临床病理学资料进行统计学分析,Western blot方法检测10对结直肠癌组织及相对应的癌旁正常组织中Gab2的表达状况。结果:免疫组化检测结果显示78例结直肠癌组织中Gab2蛋白表达阳性率为53.85%,而癌旁正常组织中Gab2蛋白多不表达或弱表达,两组结果比较差异有显著性(P<0.001);Gab2蛋白在结直肠癌中的表达与肿瘤TNM分期及有无淋巴结转移呈正相关(P<0.05),与肿瘤大小、分化程度无明显相关性(P>0.05);Western blot检测结果显示结直肠癌组织中Gab2蛋白表达显著高于相对应的癌旁正常组织(P<0.05)。结论:Gab2在结直肠癌组织中过表达,可能在结直肠癌的发生发展中起重要作用。
- 丁陈波冯继红于伟娜高绍莹徐林陈超罗军敏
- 关键词：结直肠癌免疫组织化学WESTERNBLOT
- 基因沉默PRDX1表达对人结直肠癌SW480细胞侵袭迁移的影响被引量：8
- 2017年
- 目的:探讨RNA干扰过氧化还原酶1(Peroxiredoxin 1,PRDX1)表达对人结直肠癌SW480细胞侵袭转移能力的影响。方法:筛选RNA干扰PRDX1的慢病毒质粒,与阴性对照慢病毒质粒分组转染结直肠癌SW480细胞,转染后的SW480细胞可分为PRDX1基因沉默组(si-PRDX1)和阴性对照组(Vector)。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和免疫印迹法(Western blot)分别检测两组细胞中PRDX1 mRNA和蛋白表达;采用Transwell侵袭和迁移实验检测基因沉默PRDX1表达对结直肠癌细胞侵袭及迁移能力的影响;通过Western blot检测两组细胞中基质金属蛋白酶(MMP)家族部分蛋白表达水平。结果:基因沉默PRDX1表达可有效抑制结直肠癌SW480细胞中PRDX1 mRNA和蛋白水平的表达,与阴性对照组相比(Vector),差异均具有统计学意义(P<0.01),说明基因沉默PRDX1的SW480细胞系构建成功;Transwell侵袭和迁移实验显示si-PRDX1组细胞的侵袭及迁移能力较对照组均明显降低(P<0.01);Western blot结果显示,与Vector组相比,si-PRDX1组细胞中组织基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)的表达明显增加,而MMP-2及MMP-9的表达显著下降,且差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:基因沉默人结直肠癌SW480细胞的PRDX1表达可有效抑制细胞的侵袭、迁移及转移能力,其机制可能会通过调控TIMP-2、MMP-2及MMP-9的表达介导。
- 冯继红张红李龙梅罗军敏臧春宝周航
- 关键词：结直肠癌基质金属蛋白酶SW480
- TGF-β1诱导结肠癌细胞SW480发生上皮-间质转化及对Twist1表达的影响被引量：8
- 2014年
- 目的探讨TGF-β1诱导结肠癌细胞SW480发生上皮-间质转化(EMT)及对Twist1表达的影响。方法采用10 ng/ml的TGF-β1作用结肠癌细胞SW480 72 h,倒置相差显微镜下观察细胞形态学变化;细胞划痕实验检测细胞体外迁移能力;细胞免疫荧光、Western blot和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测E-cadherin、Vimentin及Twist1的蛋白和mRNA表达。结果经TGF-β1诱导72 h后,SW480细胞呈典型间质型细胞形态,且细胞的迁移能力明显增强(P<0.05);E-cadherin蛋白及mRNA表达显著下降,Vimentin、Twist1蛋白及mRNA表达水平均明显增加(P<0.05)。结论 TGF-β1诱导结肠癌细胞SW480发生上皮间质转化时可促进Twist1的表达。
- 于伟娜罗军敏徐林秦欢丁陈波袁建波冯继红
- 关键词：转化生长因子Β1结肠癌上皮-间质转化TWIST1
- 支架蛋白Gab2与肿瘤关系的研究进展被引量：1
- 2015年
- Gab2是Gabs家族蛋白中一种至关重要的信号中介分子,该家族蛋白通过接受多种生长因子、细胞因子及抗原等胞外刺激,参与信号转导的放大及整合。Gab2蛋白被蛋白酪氨酸激酶磷酸化激活后,招募富含SH2结构域的信号效应蛋白如SHP2、PI3K的p85亚基、Crk和GC-GAP,主要介导SHP2/RAS/ERK和PI3K/AKT两条经典的信号通路,在多种生理学及病理学过程中发挥重要作用。近年研究发现,异常的Gab2及其信号与乳腺癌、白血病及黑色素瘤等其他人类肿瘤密切相关。本文就Gab2蛋白的结构、信号调控及在肿瘤中的研究进展进行综述。
- 丁陈波冯继红罗军敏
- 关键词：信号转导肿瘤
