天津市自然科学基金(11JCYBJC12100)
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
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- Vpr对人结肠癌细胞的抑制作用及其机制被引量：2
- 2012年
- 目的 探讨人类免疫缺陷病毒1型（ HIV-1）病毒蛋白r（Vpr）对人结肠癌细胞HCT-8的抑制作用及其机制.方法 将细胞分为空白对照组、空载体转染组和Vpr转染组.空白对照组：细胞不予干预；空载体转染组：对数生长期的细胞加入不同感染复数（MOI）的空载体腺病毒；Vpr转染组：加入不同MOI的含有HIV1-Vpr基因的重组腺病毒（Adv-Vpr）.应用MTT比色法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡及线粒体膜电位,Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白的表达.多组间均数比较采用单因素方差分析,两两比较采用q检验；或采用双因素方差分析,组内比较采用t检验.结果 Vpr显著抑制人结肠癌细胞HCT-8增殖,Adv-Vpr转染72 h后（MOI=200）,Vpr转染组细胞MTT值为1.03±0.04,与空载体转染组（2.46 ＋0.15）及空白对照组（2.51±0.14）比较,差异有统计学意义（F=144.6,P＜0.05）；Adv-Vpr转染48 h后（MOI=200）,Vpr转染组处于G2/M期的细胞比例及线粒体膜电位下降的细胞比例增加,分别为37.31％±5.90％和32.07％±5.64％,与空载体转染组（18.30％±6.04％、3.32％±0.79％）及空白对照组916.66％±3.51％、2.76％±1.43％）比较,差异有统计学意义（F=10.08,64.45,P＜0.05）.Adv-Vpr转染72 h后（MOI=200）,Vpr转染组细胞凋亡率为37.62％±6.48％,与空载体转染组（3.44％±1.11％）及空白对照组（2.93％±1.07％）比较,差异有统计学意义（F=122.4,P＜0.05）.Adv-Vpr处理48 h后（MOI=200）,Westem blot检测发现Vpr导致了Caspase-9、Caspase-3剪切为活性片段,p-Chk1-S345磷酸化增加,而Fas、Fas-L、ERK1及ERK2表达未见上调.结论 Vpr在体外能够有效抑制结肠癌细胞株HCT-8增殖,并诱导其细胞周期G2期阻滞及凋亡,其机制分别与DNA损伤信号通路激活及线粒体凋亡通路启动有关.Vpr在结肠癌的治疗中具有潜在的应用前景.
- 马波张汉超徐新女张飚王金环
- 关键词：结肠肿瘤人类免疫缺陷病毒1型细胞凋亡
