北京市属高等学校人才强教计划资助项目(PHR201107134)
- 作品数：10 被引量：35H指数：3
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- 相关机构：北京农学院天津市宁河原种猪场更多>>
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- 犬SLAM受体mRNA荧光定量PCR检测方法的建立和初步应用
- 2013年
- 目的建立荧光定量PCR方法,检测犬不同组织中SLAM受体mRNA的表达水平。方法以犬GAPDH为内参基因采用△△Ct法,分析SLAM受体mRNA在犬体内不同组织中的表达。结果此方法有较高的重复性,变异系数在0.89%～2.35%。以SLAM受体在心脏的表达为1倍值,结果显示受体mRNA在脾脏中表达最高,为38.49倍;肺门淋巴结、肠系膜淋巴结、腹股沟淋巴结中表达次之,分别为9.13、8.58、6.24倍;膀胱中表达最低。结论成功建立了检测SLAM受体mRNA在不同组织中表达水平的荧光定量PCR检测方法。
- 夏菁李佳姜代勋陈武
- 犀角地黄汤对脂多糖复制大鼠发热模型下丘脑IL-1β和PGE_2的影响被引量：3
- 2013年
- 本研究旨在探讨犀角地黄汤对脂多糖引起大鼠发热的退热效果及其机制。120只SD大鼠,随机分为4组,对照组、脂多糖组、阿司匹林组和犀角地黄汤组,每组30只。脂多糖组、阿司匹林组和犀角地黄汤组腹腔注射100μg·kg-1脂多糖复制大鼠发热模型,2h后,阿司匹林组和犀角地黄汤组分别灌服阿司匹林(0.04g·mL-1,按体重以10mL·kg-1给药)和犀角地黄汤(1.6g·mL-1,按体重以10μg·kg-1给药);对照组和脂多糖组灌服同体积的生理盐水。检测各组动物基础体温和攻毒给药后每小时肛温,并在2、3、5、8h分别从每组中随机选取6只大鼠断头处死,采取下丘脑组织,检测其IL-1β和PGE2的变化。结果表明,与脂多糖组比较,犀角地黄汤能显著缓解脂多糖引起的大鼠体温升高,且在用药后2h显著降低脂多糖引起的IL-1β(P<0.05)和PGE2(P<0.05)的升高,用药后3h显著降低IL-1β的升高(P<0.05)。说明犀角地黄汤能明显抑制脂多糖引起的大鼠发热,其初期的退热作用机制可能与抑制下丘脑IL-1β的生成,进而抑制发热介质PGE2释放有关。
- 董虹张涛胡格姜代勋王建舫李佳穆祥
- 关键词：犀角地黄汤脂多糖IL-1ΒPGE2
- 紫衫醇对小鼠不同组织巨噬细胞功能的影响被引量：1
- 2013年
- 为了探讨紫杉醇(Paclitaxel,PA)对小鼠不同组织巨噬细胞增殖和功能的影响。无菌操作制备小鼠腹腔、骨髓和脾脏巨噬细胞,在体外细胞培养体系中分别加入不同浓度40、80、160 ng/mL的PA和脂多糖(LPS)共培养,采用MTT法检测细胞增殖,ELISA和Griess法分别检测细胞分泌TNF-α和NO量,瑞氏-吉姆萨染色法测定腹腔巨噬细胞吞噬能力。结果表明:PA促进腹腔巨噬细胞和LPS诱导的腹腔和骨髓巨噬细胞增殖,但抑制脾脏和骨髓巨噬细胞以及LPS诱导的脾脏巨噬细胞增殖;PA抑制不同组织巨噬细胞分泌TNF-α,但促进腹腔和脾脏巨噬细胞分泌NO;PA提高了腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力。PA对小鼠不同组织巨噬细胞的免疫功能均有影响,这为进一步阐明PA的免疫调节机理提供了新的理论依据。
- 陈舒楠官佳懿谷崇高芦山沈红
- 关键词：紫杉醇小鼠巨噬细胞免疫功能
- 四种苏丹红染料对小鼠体内血液的影响被引量：4
- 2013年
- 目的探讨苏丹红对小白鼠血液和组织器官的影响。方法取小鼠连续12 d腹腔注射不同剂量苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ(0、40、80、160 mg/kg),末次给药24 h后采集血样,用血细胞分析仪检测血常规指标,毛细血管法测定凝血时间,剖腹取主要器官称重,计算脏器系数。结果苏丹红Ⅰ和Ⅱ组血液红细胞数明显减少,而苏丹红Ⅲ和Ⅳ组不明显,苏丹红不同剂量之间比较,低剂量苏丹红Ⅰ和高剂量苏丹红Ⅱ组比苏丹红Ⅲ和Ⅳ组血液红细胞数变化明显;苏丹红Ⅰ和Ⅱ组血液血红蛋白含量明显降低,而苏丹红Ⅲ和Ⅳ组血红蛋白含量变化不明显。四种不同剂量苏丹红组小鼠血液中血小板数量减少,随着剂量增加小鼠血液凝固时间延长。随着苏丹红剂量增加,苏丹红I和II组小鼠血液白细胞数比对照组明显增加,苏丹红Ⅲ和Ⅳ组白细胞数有增加趋势但差异不显著。与对照组比较,苏丹红组小鼠血液白细胞数明显增加、而淋巴细胞和单核细胞显著减少。随着苏丹红注射剂量增加,肾脏和脾脏脏器系数较对照组明显增大,肝脏脏器系数变化不明显。结论苏丹红对小鼠血液细胞、血红蛋白、血小板和凝血时间以及组织器官都有不同程度影响。
- 官佳懿沈红张永红付超颍高雪刘杰
- 关键词：小鼠血常规指标脏器系数
- 中药治疗呼吸道疾病临床发病猪肺组织中PDE4、IL-6和TNF-α的变化被引量：2
- 2014年
- 观察猪呼吸道疾病(PRDC)肺组织磷酸二酯酶4(PDE4)活性及PDE4各亚型表达和白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量的变化及自拟中药方对其的影响与疗效,为呼吸道炎症的病理机制与中药防治积累资料。选取呼吸道病猪随机分为患病组和治疗组,正常猪为对照组,治疗组灌服由芦根、黄芪、白芍、甘草组成的生药浓度1g·mL-1的中药,1.5mL·kg-1,每日2次,连续给药10d。停药后检测各组猪外周血白细胞数目,取肺组织HPLC检测PDE4活性,Real-time PCR法测定PDE4各亚型相对表达量,ELISA试剂盒测定肺组织匀浆IL-6、TNF-α的含量。结果如下:与对照组比,患病组PDE4活性、IL-6含量和白细胞数显著升高(P<0.05),PDE4各亚型表达量和TNF-α含量有所升高,无显著差异(P>0.05)。与患病组比,治疗组PDE4活性极显著降低(P<0.01),白细胞数目和IL-6含量显著降低(P<0.05);PDE4A、4C、4D的表达下调不显著(P>0.05),PDE4B表达下调极显著(P<0.01);TNF-α含量差异不显著(P>0.05)。PRDC存在肺组织PDE4活性、IL-6含量和外周血白细胞数目显著升高的异常炎症反应;自拟中药方可改善呼吸道病猪临床症状,其作用机制与降低白细胞数目,抑制肺组织PDE4活性、PDE4B表达和降低IL-6含量相关。
- 张美华张倩孟乐李佳周双海姜代勋陈武
- 关键词：猪呼吸道疾病肺组织PDE4IL-6TNF-Α
- 猪呼吸道疾病综合征中性粒细胞cAMP-PDE和血浆cAMP、IL-6、TNF-α的变化及中药疗效研究被引量：6
- 2014年
- 本试验通过观察呼吸道疾病综合征(PRDC)病猪中性粒细胞(PMN)环磷酸腺苷磷酸二酯酶(cAMP-PDE)活性和血浆cAMP、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量的变化及自拟中药汤剂对其的影响与疗效,以期为呼吸道炎症的病理机制与中药防制积累资料。将PRDC病猪随机分组,治疗组灌服由芦根、黄芪、白芍、甘草组成的1g生药/mL中药,1.5mL/kg,每天2次,连续给药10d。停药后取全血检测各组外周血白细胞数量;并分离PMN,HPLC法检测cAMP-PDE活性;ELISA试剂盒测定血浆中cAMP、IL-6、TNF-α的含量。与健康对照组相比,患病组白细胞数量显著升高(P<0.05),cAMP-PDE活性和血浆TNF-α、IL-6含量均极显著升高(P<0.01);治疗组TNF-α含量显著升高(P<0.05)。与患病组相比,治疗组的白细胞数量、cAMP-PDE活性和血浆TNF-α含量均显著降低(P<0.05),IL-6极显著降低(P<0.01)。结果表明PRDC病猪存在外周血白细胞数量、PMN cAMP-PDE活性和血浆IL-6、TNF-α含量升高的异常变化,自拟中药汤剂能改善呼吸道病猪的临床症状,其作用机制与降低白细胞数量,抑制PMN cAMP-PDE活性和降低血浆IL-6、TNF-α含量相关。
- 张美华李佳孟乐周双海姜代勋陈武
- 关键词：猪呼吸道疾病综合征中性粒细胞中药
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒感染猪肺脏组织环腺苷酸磷酸二酯酶的活性及其mRNA表达变化
- 2013年
- 试验旨在探究在猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)感染过程中环腺苷酸(cAMP)特异性磷酸二酯酶(PDE)的活性及其mRNA表达量的变化,以期为PDE抑制剂的应用提供相关依据。试验采集PRRSV感染猪肺脏组织,运用高效液相色谱(HPLC)法检测cAMP在PDE反应前后的变化,计算cAMP-PDE活性;通过Real-time PCR检测cAMP-PDE mRNA表达量的变化。结果显示,PRRSV感染猪肺脏组织中cAMP-PDE活性显著高于对照组(P<0.05),在检测的8个PDE亚型中,除PDE4A外,PDE4B、PDE4C、PDE4D、PDE7A、PDE7B、PDE8A、PDE8B mRNA的表达量均高于对照组。结果表明,cAMP-PDE在PRRSV感染引起的猪肺脏部的炎症反应过程中存在异常变化,提示cAMP-PDE特异性抑制剂有望减轻PRRSV感染引起的猪肺脏部炎症损伤。
- 张倩李佳孙胜永姜代勋陈武
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征环腺苷酸磷酸二酯酶
- 胡黄连与牛蒡子有效成分对猪磷酸二酯酶7A2活性的影响被引量：3
- 2014年
- 从牛蒡子、胡黄连中筛选对猪磷酸二酯酶(PDE)7A2具有抑制作用的中药单体成分,为PDE亚型抑制剂研究积累资料。使用高效液相色谱法(HPLC)测定绿原酸、牛蒡子苷、β-谷甾醇和胡黄连苷-Ⅱ对体外原核表达的猪PDE7A2的抑制作用。结果表明:在反应质量浓度为1,5,10,50,100μmol/L时,绿原酸对猪PDE7A2的活性抑制率分别为12.55%,46.29%,56.17%,68.52%,47.12%;牛蒡子苷抑制率分别为21.60%,41.35%,70.16%,88.27%,80.07%;β-谷甾醇抑制率分别为40.53%,54.52%,71.81%,96.50%,94.86%;胡黄连苷-Ⅱ抑制率分别为69.34%,94.03%,96.50%,103.09%,101.44%。绿原酸、牛蒡子苷、β-谷甾醇和胡黄连苷-Ⅱ对体外表达的猪PDE7A2均有抑制作用,其中胡黄连苷-Ⅱ对猪PDE7A2的抑制作用最强。
- 付源李佳孙胜永姜代勋陈武
- 关键词：胡黄连牛蒡子
- 猪磷酸二酯酶7A mRNA荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用
- 2012年
- 为研究磷酸二酯酶(PDE)7A基因在猪体内的分布,本试验通过构建含有目的基因片段标准质粒的方法,成功建立荧光定量PCR检测PDE7A基因的标准曲线,可检测到最低1×102copies/μL的初始模板量,重复试验变异系数为2.22%～3.71%,具有较高的灵敏度和可重复性。用该方法检测到PDE7AmRNA在试验用小型猪的心肌中表达量最高(比率为4.54×10-2),骨骼肌次之(1.44×10-2),其他内脏器官较少。
- 孙胜永李佳李格宾姜代勋陈武
- 关键词：荧光定量PCR环磷酸腺苷
- 绿原酸对小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖和分泌功能的影响被引量：16
- 2013年
- 为分析绿原酸(CHA)对小鼠脾脏淋巴细胞增殖、分泌功能的影响。无菌操作分离小鼠脾脏,制备脾脏淋巴细胞并用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养,在培养液中分别加入诱导剂刀豆蛋白(ConA)和脂多糖(LPS)以及0、40、80、160μg/mL不同浓度的CHA,经过不同时间培养后,采用MTT法检测T和B淋巴细胞的增殖,ELISA和Griess法分别检测淋巴细胞分泌TNF-α和NO的水平。结果表明:低浓度和中浓度CHA提高ConA/LPS诱导的T、B淋巴细胞增殖和存活,而高浓度CHA明显抑制其细胞增殖转化;CHA促进小鼠脾脏T、B淋巴细胞分泌NO;CHA对T淋巴细胞分泌TNF-α影响不大,中浓度CHA可显著促进脾脏B淋巴细胞分泌TNF-α,高浓度反而抑制其分泌;CHA促进环磷酰胺处理的小鼠脾脏T和B淋巴细胞体外增殖,但对其NO分泌量影响不明显。结果提示:CHA可能通过影响淋巴细胞增殖和细胞因子分泌而表现免疫调节作用。
- 官佳懿张永红崔德凤谷崇高李凯冉赵雪菲沈红
- 关键词：绿原酸T淋巴细胞B淋巴细胞分泌功能
