河南省自然科学基金(0111021400)
- 作品数：6 被引量：17H指数：2
- 相关作者：吴逸明吴拥军陈萍萍张朝武巴月更多>>
- 相关机构：郑州大学四川大学中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：河南省自然科学基金河南省高校杰出科研人才创新工程基金河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 黑素瘤抗原-a基因在煤焦沥青烟气诱发小鼠肺癌组织中的表达及其意义被引量：4
- 2002年
- 目的 :探讨煤焦沥青 (CTP)烟气诱发小鼠肺癌组织中黑素瘤抗原 - a(mage- a)基因 m RNA的表达及其意义。 方法 :CTP烟气诱发小鼠肺癌 ,提取癌组织中 RNA ,用逆转录 -巢式聚合酶链反应 (RT- PCR)方法对癌组织和相应癌旁组织 mage- am RNA表达情况进行研究 ;p UC18质粒克隆 ,大肠杆菌 DH5α转化 ;PE- 377DNA测序仪对 2个阳性克隆中的目的基因片段进行 DNA序列测定。结果 :实验组 2 9只小鼠中 8只诱发出肺癌 (8/ 2 9) ;8只小鼠肺癌中 ,有 5只癌组织 mage- a m RNA表达阳性(5 / 8) ;相应的癌旁组织均未表达。 DNA序列测定证明扩增产物中目的基因片段均为 m age- a c DNA序列。结论 :小鼠肺癌组织中 m age- a m RNA呈高比例表达 ,CTP烟气诱发小鼠肺癌可能是 MAGE- A抗原肺癌免疫治疗的理想模型。
- 巴月吴逸明周小山
- 关键词：肺肿瘤
- 人谷胱甘肽硫转移酶M1基因的克隆及在大肠杆菌的温控表达被引量：1
- 2003年
- 人谷胱甘肽硫转移酶M1基因的克隆及在大肠杆菌的温控高效表达 ,采用RT PCR技术从人肝脏组织总RNA中扩增谷胱甘肽硫转移酶M1基因的cDNA序列 ,将其插入到原核温控表达载体pBV2 2 0多克隆位点中 ,构建重组表达质粒 ,并用PCR扩增、酶切分析及序列测定等方法对重组质粒进行鉴定 ,并进行了温控表达 ,表达量约达到 2 8 3 %。人谷胱甘肽硫转移酶M1基因克隆到原核表达载体pBV2 2 0中 ,测序结果同Genbank中的人谷胱甘肽硫转移酶M基因序列比较 ,在 619位点C→A ,氨基酸由Pro→Thr,在 5 2 8位点C→T ,编码氨基酸仍为Asp。通过温控诱导 ,在 2 8kDa的表达量约达到 2 8 3 %。人谷胱甘肽硫转移酶M1原核温控表达载体pBV2 2 0的构建 ,为毒理学。
- 陈萍萍吴逸明张朝武吴拥军
- 关键词：基因克隆大肠杆菌RT-PCR技术
- 人谷胱甘肽硫转移酶A1真核表达系统的构建及序列分析被引量：1
- 2003年
- 目的构建人谷胱甘肽硫转移酶A1真核表达系统,为毒理学、遗传药理学的研究等提供材料。方法用RT-PCR技术从人肝脏组织总RNA中分离扩增人谷胱甘肽硫转移酶A1基因的cDNA序列,将其插入到真核表达载体pcDNA3多克隆位点中,构建重组表达质粒,并用PCR扩增、酶切分析及序列测定等方法对重组质粒进行鉴定。结果人谷胱甘肽硫转移酶A1被正确地克隆到真核表达载体pcDNA3中,测序结果同Genbank序列比较,在152位点T→C,氨基酸由Met→Thr。结论经酶切鉴定和PCR扩增,证实人谷胱甘肽硫转移酶A1真核表达系统构建成功。
- 陈萍萍吴逸明张朝武吴拥军
- 关键词：RT-PCR基因克隆
- 人GSTM1TV2基因的克隆及温控表达
- 2003年
- 目的 克隆人GSTM 1TV2基因并在大肠杆菌的温控高效表达。方法 用RT -PCR技术从人肺组织总RNA中分离扩增人GSTM1TV2基因的cDNA序列 ,将其插入到原核温控表达载体pBV2 2 0多克隆位点中 ,构建重组表达质粒 ,并用PCR扩增、酶切分析及序列测定等方法对重组质粒进行鉴定 ,并进行了温控表达。结果 人GSTM1TV2克隆到原核表达载体 pBV2 2 0中 ,测序结果同Genbank序列比较 ,完全一致。通过温控诱导 ,在 2 6kDa的表达量约达到 33 %。结论 pBV2 2 0 -GSTM 1TV2原核温控表达载体的构建 ,为毒理学、遗传药理学的研究提供应用基础。
- 陈萍萍吴逸明张朝武吴拥军
- 肺癌患者MAGE-A3抗原表达及HLA-I类基因分布的初步研究被引量：2
- 2004年
- 目的 检测MAGE -A3抗原在肺癌组织中的表达情况以及HLA -I类基因在肺癌患者中的分布水平 ,以预测能够应用以MAGE -A3抗原蛋白为基础的肿瘤疫苗进行肿瘤免疫治疗的肺癌患者的比例。方法 用SDS -PAGE和Westernblot方法检测 6 3例肺癌及其癌旁组织MAGE -A3抗原的表达情况 ;用PCR -SSP方法检测 70例肺癌及癌旁组织HLA -A1、A2、A2 4的分布频率。结果 6 3例肺癌患者中有 31例为MAGE -A3抗原表达阳性 ,其中 5例癌旁组织MAGE -A3抗原也为阳性。 70例肺癌患者中HLA -A1、A2、A2 4三个等位基因的分布频率分别为 4 .2 8%、5 4 .2 8%、5 0 .0 % ;70例癌旁组织中HLA -A1、A2和A2 4的阳性率分别为 4 .2 8%、6 0 .0 %和 5 2 .86 %。三等位基因中任一基因在肺癌组织出现的频率为 80 %。结论 肺癌患者中大约有 39%的个体能应用基于MAGE -A3抗原蛋白的肿瘤疫苗进行有效的肿瘤免疫治疗。
- 庄东刚吴逸明巴月
- GSTM1、GSTT1基因缺失与肺癌易感性的关系被引量：9
- 2006年
- 目的探讨谷胱苷肽S转移酶M1（GSTM1）、谷胱苷肽S转移酶T1（GSTT1）基因缺失与肺癌发病之间的关系及其与P16表达降低的相关性在肺癌发生中的作用。方法采用PCR技术检测77例肺癌患者和107例健康对照人群中GSTM1、GSTT1基因缺失的频率，以十二烷基磺酸钠（SDS）-聚丙烯酰胺凝胶电泳及蛋白印迹（WeStern—blot）技术测定P16蛋白在正常组织中的表达。结果病例组GSTM1基因缺失频率为58．4％，显著高于对照组缺失频率为42．1％（X^2=4．811，P=0．028），危险度分析OR=1．938，95％CI=1．070～3．509；病例组GSTT1基因缺失频率为57．1％，接近对照组50．5％缺失频率的水平（X^2=0．802，P=0．371）。联合分析表明，2种基因在肺癌发生中具有协同作用。GSTM1空白基因型与GSTM1非空白基因型个体相比、GSTM1／GSTT1联合空白基因型与其他联合多态基因型相比P16表达水平降低，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论GSTM1基因缺失或GSTM1、GSTT1基因联合缺失在肺癌患者中发生频率增高，可增加个体患肺癌的易感性；GSTM1基因缺失及GSTM1／GSTT1联合缺失可能与抑癌基因p16的蛋白表达减低有关。
- 姚武王娜吴拥军吴逸明
- 关键词：肺癌遗传易感性P16蛋白
