国家民委科研基金(05XB06)
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
- 相关作者：李倬石真真平玲马省强陈文芳更多>>
- 相关机构：西北民族大学江苏农牧科技职业学院兰州市妇幼保健院更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- LPS增强牛病毒性腹泻病毒抗原免疫效果的实验研究被引量：2
- 2011年
- 目的:探讨细菌脂多糖(LPS)作为佐剂对牛病毒性腹泻病毒抗原(BVDV)免疫效果的影响.方法:将健康家兔20只随机分5组,分别给予LPS+BVDV、BVDV、福氏佐剂+BVDV、LPS+福氏佐剂+BVDV,以生理盐水作对照,经皮下等免疫2次,ELISA法检测血清抗-BVDV抗体滴度,分别比较各组产生抗-BVDV抗体的差异,并观察各组抗-BVDV抗体的动态变化.结果:LPS+BVDV组、福氏佐剂+BVDV组、LPS+福氏佐剂+BVDV组,其抗-BVDV总抗体滴度都较单独注射BVDV明显增高(P<0.05);LPS+BVDV组与福氏佐剂+BVDV组的抗-BVDV滴度无明显差别,但LPS+福氏佐剂+BVDV组其抗-BVDV抗体滴度要明显高于LPS+BVDV组与福氏佐剂+BVDV组(P<0.05).各实验组抗-BVDVIgG滴度在免疫后第7周左右达到高峰,在观测期内LPS+福氏佐剂+BVDV组IgG抗体滴度在IgG抗体高峰时段均明显高于LPS+BVDV组与福氏佐剂+BVDV组(P
- 李倬石真真曹成香
- 关键词：细菌脂多糖牛病毒性腹泻病毒佐剂
- 牛病毒性腹泻病毒夹心ELISA快速检测方法的建立与初步应用被引量：3
- 2012年
- 用增殖与浓缩后的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)分别免疫健康牛犊和家兔,制备牛抗BVDV和兔抗BVDV超免疫血清,并用层析法纯化牛抗BVDV IgG和兔抗BVDV IgG,建立了检测BVDV的双抗体夹心ELISA快速检测方法.结果表明:该检测方法的最佳反应条件为:牛抗BVDV IgG包被浓度为100μg/mL,兔抗BVDV IgG最佳工作浓度为50μg/mL,样品反应时间为90min,酶标抗体工作浓度为1∶8 000,以D490nm≥0.177作为阳性判定标准.该ELISA检测方法的重复性CV小于10%,最低检测限为1.87μg/mL,与牛轮状病毒、牛冠状病毒、猪瘟病毒、犊牛大肠杆菌和沙门菌等病原无交叉反应,该ELISA试剂在室温下至少可保存6个月.用该ELISA方法和IDEXX公司抗原检测试剂盒对甘肃省不同地区牛场156份临床粪便样品进行了检测,阳性检出率分别为17.3%和16.7%.表明本试验建立的ELISA方法特异性强、敏感性高且重复性好,可用于BVDV的快速检测.
- 李倬马省强陈文芳石真真平玲
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒双抗体夹心ELISA特异性
- 牛病毒性腹泻病毒反转录PCR快速检测方法的建立与初步应用
- 2012年
- 根据GenBank中登录的牛病毒性腹泻病毒（BVDV）5＇非编码区基因序列,设计合成了1对特异性引物,建立了检测BVDV的反转录PCR快速检测方法.通过对该方法的特异性、敏感性和重复性进行试验,结果显示,该方法从BVDV标准毒株Oregon C24V中扩增出267 bp的特异性片段,该方法重复性好,反应批内检测结果相同.与牛轮状病毒、牛冠状病毒、猪瘟病毒和F4新生牛肾传代正常细胞无交叉反应,具有高度的特异性,而且敏感性高,最低检出限为10~1.84 TCID50/mL.利用该方法对42份临床腹泻病牛疑似粪便样品进行了检测,结果检出7份阳性,而同时利用IDEXX公司抗原检测试剂盒检出阳性只有6份.表明,建立的该方法具有快速、敏感、特异等优点,是牛病毒性腹泻病毒病的临床诊断和流行病学调查的有力工具.
- 李倬田镔李明生平玲
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒反转录聚合酶链反应
