国家科技攻关计划(2002BA514A-16-6)
- 作品数：3 被引量：36H指数：2
- 相关作者：邵国青刘茂军张映周勇岐孙佩元更多>>
- 相关机构：江苏省农业科学院山西农业大学金陵科技学院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家科技攻关计划江苏省农业三项工程项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪气喘病实验猪模型的建立被引量：22
- 2007年
- 目的研究建立猪气喘病人工发病模型。方法将分离得到的一株猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)Js株进行各种试验鉴定,证实其为Mhp强毒株。每头猪肺内接种Js株培养物2ml,15～25d后观察临床症状和病理变化,采集病变组织,经冻干制成攻毒用组织毒。安检合格,批号为20000324。给15头小梅山二元杂交猪分别气管内注射以KM_2培养基作10^(-2)、10^(-3)、10^(-4)和10^(-5)稀释的强毒,每头猪5ml,对照组注射培养基。攻毒后25d观察试验猪临诊症状,X线透视,记录病理变化。结果10^(-2)、10^(-3)、10^(-4)稀释的强毒试验组猪均出现了典型的猪气喘病临床症状和病理变化。结论人工发病试验测得Mhp Js株组织强毒接种气管内注射最小发病剂量为10^(-4)稀释5ml,正式试验人工发病可用100个最小发病剂量即强毒冻干物1:100稀释气管内注射5ml,可确保攻毒成功。
- 邵国青刘茂军孙佩元王继春杜改梅周勇岐刘冬霞
- 关键词：猪气喘病猪肺炎支原体
- 猪肺炎支原体黏附因子P97基因抗原区的克隆与表达
- 2006年
- 根据Genbank中猪肺炎支原体J株模式株(ATCC25934或NCTC10110),设计一对特异性引物,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增出猪肺炎支原体168株特异性蛋白P97基因序列的R1R2区序列,经测序确认后,克隆入原核表达载体pET-32a(+)的EcoRI和XhoI位点之间,转化宿主菌BL21,将筛选出的阳性克隆用IPTG诱导,通过SDS_PAGE电泳进行鉴定,结果表明,p97蛋白基因获得了表达,这为猪肺炎支原体免疫检测与诊断以及新型疫苗的研制提供了重要条件。
- 李颖平邵国青张映
- 关键词：猪肺炎支原体克隆
- 猪肺炎支原体P97基因抗原决定簇R1区的克隆与表达被引量：14
- 2005年
- 通过引物定点突变PCR法,扩增了猪肺炎支原体(Mhp)168株黏附因子P97基因抗原决定簇R1区基因片段,并将该基因片段插入表达载体pET-32 a(+)中构建重组质粒,再将该重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)。DNA序列分析结果表明所构建的重组质粒含有正确的目的基因。经0.1 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)37℃诱导4 h,重组质粒表达的目的蛋白量可达到总蛋白的23%。W estern b lotting和ELISA试验结果证明所表达的重组蛋白具有猪肺炎支原体抗原性。
- 刘茂军邵国青张映聂向庭
- 关键词：猪肺炎支原体克隆
