国家自然科学基金(30571010) 作品数:13 被引量:46 H指数:4 相关作者: 张飞云 梁越 田兆丰 于银霞 李晶晶 更多>> 相关机构: 首都师范大学 北京市农林科学院植物保护环境保护研究所 东京农业大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 北京市教委科技发展计划 教育部科学技术研究重点项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
病毒末端结合蛋白VPg的功能研究进展 被引量:4 2009年 病毒的末端结合蛋白VPg(Viral Protein Genome-linked)是一种多功能蛋白,存在于多种病毒中,与病毒基因组RNA5′-末端共价连接,在病毒的生命周期中以不同的剪切形式存在并行使不同的功能,参与病毒的复制、翻译等基本的生命活动。主要对目前关于VPg如何参与病毒的复制和翻译过程,以及在病毒蛋白质成熟和病毒移动过程中如何发挥作用的研究结果进行了综述。 梁越 张飞云关键词:VPG 多花黑麦草斑驳病毒外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达 根据已报道的多花黑麦草斑驳病毒(RMotV)外壳蛋白(CP)基因的核苷酸序列合成引物,用RT-PCR的方法获得外壳蛋白基因后,再将其克隆至pGEX-4T-1中,SDS-PAGE和斑点杂交(Dot-blotting)表明:... 张海龙 田兆丰 董志 张晏如 张飞云关键词:外壳蛋白 原核表达 包涵体 文献传递 RNAi技术及在植物抗病毒研究中的应用 2006年 RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术是一项基因沉默新技术,在抗病毒研究中,人为地将与病毒或宿主基因(宿主基因编码的蛋白质对病毒很重要而对宿主本身作用很小或不起作用)同源的双链RNA(double strand RNA,dsRNA)导入生物体内,引起与其同源的基因发生沉默,从而抑制病毒复制,达到抗病毒的目的。因此RNAi技术在抗病毒研究中倍受关注,并取得了显著成绩。主要对RNAi技术的相关知识以及在植物抗病毒中的应用进展作一综述。 张金方 张飞云关键词:RNAI技术 DSRNA SIRNA 植物病毒 微生物源抗植物病毒物质及其抗病毒机理的研究进展 被引量:11 2009年 微生物代谢产生的有抗病毒作用的活性物质,具有内吸活性强、安全高效的优点。目前从微生物资源中筛选并获得抗植物病毒物质已经成为研究的热点,对微生物抗病毒物质的分离提取和抗病机理方面的研究已经取得了一定的进展。对来源于不同种类微生物的抗病毒活性物质,以及抗病机理作了论述,并对微生物源抗植物病毒物质研究进行了展望。 于银霞 张飞云 田兆丰 刘伟成关键词:植物病毒 抗病机理 多花黑麦草斑驳病毒基因组克隆与序列分析 被引量:1 2006年 多花黑麦草斑驳病毒(Ryeg rass mottle virus,RGM oV)属南方菜豆花叶病毒属,是牧草病毒病的重要病原。利用反转录技术合成和扩增了RGM oV RNA的cDNA。将cDNA克隆在载体pUC18上,对RGM oV的基因组RNA作序列分析。RGM oV RNA是一个正义单链RNA分子,全长4 210个核苷酸,包含4个开放阅读框架5′非翻译区包含99个核苷酸,3′非翻译区有198个核苷酸。RGM oV ORF的结构和南方菜豆花叶病毒以及水稻黄斑病毒的结构一样。ORF1编码1个14.6 kD的蛋白质,这个蛋白质的功能还不清楚;ORF2的产物由947个氨基酸组成,分子量为103.6 kD;ORF3编码1个19.8 kD的蛋白质;ORF4编码1个25.6 kD的蛋白质,通过N末端氨基酸分析,确认ORF4为病毒外壳蛋白。RGM oV RNA的全序列以及染色体结构已被GenBank登录,登录号分别为AB040446和NC_003747。 张飞云 鸟山重光鸭茅斑驳病毒CP基因克隆、序列分析及原核表达 被引量:1 2007年 通过RT-PCR技术从鸭茅斑驳病毒(CfMV)总RNA中获得了外被蛋白(CP)基因,并将其连接到含有编码GST基因的表达载体pGEX-4T-1后,得到重组质粒pGEXCfMV-JANCP,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLys后,用IPTG诱导其基因表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blot分析后证明:CP基因在大肠杆菌中获得了高效表达,获得的融合蛋白分子质量约为56.0 ku. 董志 张海龙 张飞云关键词:原核表达 WESTERN印迹 侵染万寿菊的黄瓜花叶病毒外壳蛋白基因的克隆与序列分析 被引量:4 2007年 应用ELISA的方法检测到感染了黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)的万寿菊。根据已报道的CMV外壳蛋白(CP)基因的保守序列设计并合成引物,提取万寿菊叶片总RNA为模板,进行cDNA合成和PCR扩增,得到约875bp的片断,与预期片断大小相符。序列分析显示:该分离物CMV-WSJ CP基因全长657bp,编码218个氨基酸,其核苷酸和氨基酸序列与CMV亚组Ⅱ的分离物有很高的同源率,分别达到98.33%~99.24%和98.63%~100%;与CMV亚组I分离物的同源率分别仅为74.43%~76.26%和77.17%~78.99%。因此,从万寿菊叶片上检测出的黄瓜花叶病毒分离物CMV-WSJ应归属于亚组Ⅱ。 李晶晶 邓召花 曾静 张金方 张飞云关键词:万寿菊 黄瓜花叶病毒 外壳蛋白 四种广普性植物病毒高效mPCR检测方法的建立 被引量:5 2007年 本研究建立了能同时检测出烟草花叶病毒(TMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)、马铃薯X病毒(PVX)和马铃薯Y病毒(PVY)的多重RT-PCR体系。TMV、CMV、PVX、PVY是四种广普性植物病毒,寄主范围广泛,并且常常发生复合侵染。本研究以上述四种病毒的CP基因部分序列设计引物,以反转录的cDNA为模板,建立多重RT-PCR反应体系,分别扩增出211~417bp的不同长度的基因片断,并通过序列测定来确认扩增序列的特异性。将反转录合成的cDNA进行浓度稀释,来对多重RT-PCR与单重RT-PCR的灵敏度进行比较,结果证明,多重RT-PCR体系能够同时快速检测这四种病毒,并且有很高的灵敏度。 曾静 张飞云 李晶晶 于银霞 王法军关键词:多重RT-PCR 烟草花叶病毒 黄瓜花叶病毒 马铃薯X病毒 水稻条纹病毒研究进展 被引量:2 2006年 水稻条纹病毒引起的水稻条纹叶枯病在水稻种植区造成巨大的经济损失,有关病毒本身及抗病基因一直是近年研究的热点。根据近年的研究成果,综述在病毒的核酸、蛋白质、抗病基因及应用基因工程控制病害等方面的研究进展,并对利用抗病基因工程策略控制病害的应用前景进行了展望。 邓召花 张飞云关键词:水稻条纹病毒 抗病毒基因 抗病毒蛋白 水稻条纹叶枯病 薄荷根内生及根际细菌多样性探究 被引量:7 2010年 采用传统的培养方法和基于分子生物学技术的非培养方法对我国常用中药之一的薄荷植物的根内生及根际细菌进行研究,从而了解其中细菌群落的多样性。对分离得到的细菌菌株进行16S rDNA扩增和系统发育分析,结果表明,利用培养方法与非培养方法分离得到薄荷根内生细菌及根际细菌一些共有的细菌种类,但前者优势种群为g-变形杆菌,后者优势种群为芽孢杆菌,说明土壤细菌,特别是根际细菌是植物内生细菌的重要来源,但植物对其内生细菌具有选择压。首次报道了薄荷根内和根际具有丰富的微生物群落多样性,为进一步探索植物根系微生态环境中微生物群落的形成和生态功能提供了基础信息。在今后探讨植物与微生物相互作用关系时,有必要考虑土壤环境,特别是根际对其的影响的同时,更加重视植物与其相关联的细菌种类的选择作用。 梁越 刘洋 田兆丰 邹媛媛 左山 刘琳 冯雪 张静 张飞云关键词:薄荷 根际细菌 群落多样性