国际科技合作与交流专项项目(2011DFA30760-2-1)
- 作品数:6 被引量:21H指数:2
- 相关作者:张贵学田亚光于娜林旭李玉龙更多>>
- 相关机构:东北农业大学更多>>
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- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 犊牛睾丸支持细胞的培养及不同浓度pEGFP-N3载体瞬时转染被引量:1
- 2014年
- 为了研究支持细胞的分离、纯化、鉴定、传代培养及pEGFP-N3载体转染,试验以新生牛睾丸组织为材料,以脂质体介导转染支持细胞。结果表明:支持细胞的纯度达95%,可传至20代;细胞密度为2.5×105个/孔时,3.0μL的脂质体、2.4μg的pEGFP-N3质粒为最佳组合,转染72 h后效率可达36.03%。
- 时宇于娜刘欣AHMED KHALID林旭李玉龙张贵学
- 关键词:支持细胞转染睾丸
- β-防御素相关基因在输卵管和子宫内的表达研究
- 引言/目的β-防御素是雌性动物的输卵管和子宫内重要的抗微生物活性肽,是抵抗微生物入侵的天然屏障,对于调节卵子的成熟、受精、胚胎发育、着床和妊娠都具有重要的作用。本研究分别检测卵泡期和黄体期输卵管、子宫的β-防御素相关基因...
- 田亚光曾跃林旭郑鹏黄贺张贵学
- 母牛卵泡期和黄体期子宫颈6种β-防御素的变化
- 2017年
- 为了解母牛生殖道β-防御素的表达及与发情周期的关系,实验采用荧光定量PCR检测卵泡期和黄体期母牛子宫颈6种β-防御素的变化。实验发现,在子宫颈中卵泡期和黄体期BNBD-4、BNBD-5的表达量无差异(P>0.05),而卵泡期TAP、LAP1、BNBD-1、BNBD-10的表达量高于黄体期(P<0.05)。母牛子宫颈中6种β-防御素均有表达,其中TAP、LAP1、BNBD-1、BNBD-10的表达量呈周期变化,可能与发情周期中子宫颈口开张程度有关。
- 王皓王雪王晨张贵学
- 关键词:母牛子宫颈Β-防御素
- 新生牛睾丸支持细胞的体外培养及鉴定分析被引量:16
- 2013年
- 为探究支持细胞的体外培养特性,以新生牛睾丸组织为试验材料,利用组合酶消化法将其解离成单细胞悬液,并采用差速贴壁法纯化支持细胞后进行体外培养与鉴定。结果表明:支持细胞体外培养能够传至第20代,并且随着传代次数的增加,支持细胞的增殖速度越来越慢;添加2%血清浓度的DMEM/F-12的培养基即可用于支持细胞的体外培养;免疫组化染色显示,所培养的细胞内波形蛋白呈阳性;RT-PCR检测结果可见支持细胞标志基因SCF和GDNF的表达;第15代的支持细胞内含有正常的二倍体核型。
- 于磊郑鹏荣恩光于娜田亚光张贵学
- 关键词:睾丸支持细胞体外培养
- 新生牛雄性生殖干细胞的分离纯化与培养被引量:4
- 2012年
- 为建立新生牛雄性生殖干细胞的体外增殖与分化体系,将新生牛睾丸消化成单细胞悬液,分别进行差速贴壁、不连续密度梯度Percoll分选雄性生殖干细胞和支持细胞,对分选生殖干细胞进行体外培养。结果表明,差速贴壁法能有效分选雄性生殖干细胞与支持细胞,2%血清浓度的培养液即可用于雄性生殖干细胞的体外培养,添加100 ng·mL-1的GDNF能显著促进雄性生殖干细胞的增殖,增殖形成的雄性生殖干细胞集落具有一定多能性。
- 郑鹏于磊田亚光黄贺张贵学
- 关键词:分离纯化体外培养
- 牛输卵管上皮细胞系的建立被引量:1
- 2015年
- 分离牛输卵管上皮细胞、培养、鉴定、核型分析和冷冻保存。第1代分离的上皮细胞(7±1)d时开始贴壁生长,(14.0±0.9)d后铺满培养瓶底部,第2代以后贴壁时间缩短为(1.0~1.5)d,体外培养至7代后逐渐衰老。第2代以后细胞贴壁性质发生了变化。解冻后细胞活率〉78%,输卵管上皮细胞呈角蛋白阳性,第5代细胞具有正常的二倍体核型,转染p EGFP-N3载体的效率较低。
- 刘欣于娜时宇林旭李玉龙张贵学
- 关键词:输卵管上皮细胞体外培养
- 发情周期母牛子宫中P53、CDC25A及Fas的变化
- 2015年
- 为了研究母牛子宫中周期蛋白因子、凋亡因子的变化与发情周期的关系,试验以母牛子宫角、子宫体为材料,运用荧光定量PCR技术检测P53、CDC25A、Fas的表达量。结果表明:P53、CDC25A、Fas在母牛子宫中均有表达。在子宫角中,卵泡期P53、CDC25A表达量高于黄体期,Fas表达量低于黄体期;在子宫体中,卵泡期P53、CDC25A、Fas表达量均高于黄体期。
- 林旭李玉龙赵洵武曾跃田亚光张贵学
- 关键词:发情周期子宫P53CDC25AFAS
- 睾酮对支持细胞增殖、成熟及凋亡几种相关基因的影响
- 引言/目的牛睾丸间质细胞分泌的睾酮,进入曲细精管,与支持细胞分泌的睾酮结合蛋白结合调节精子发生。在曲细精管内,支持细胞形成的血液睾丸屏障是维持精子发生的重要内环境,支持细胞的生长、发育和生理状态是影响精子生成的重要因素。...
- 郑鹏李玉龙赵洵武黄贺田亚光张贵学