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青藏高原冻土微生物降胆固醇作用的初步研究: 2010年; 为了筛选具有胆固醇降解作用的微生物,采用蛋黄培养基发酵法,对青藏高原冻土微生物的降胆固醇作用进行初步研究。从青藏高原海拔2 300~4 800 m的地区采集12个表层冻土样品,分离纯化得到164株细菌,并筛选出6株对蛋黄胆固醇具有降解效果的细菌,其胆固醇降解率分别为9.46%、9.42%、10.18%、7.79%、9.55%和9.96%。对这6株菌进行鉴定,根据其菌体、菌落形态以及生理生化特征,初步认为其中的DR-209属于爱得华氏菌（Edwardsiella）,其余5株均为沙雷氏菌（Serratia）。; 张明黄海洪王高学李晶; 关键词：青藏高原冻土微生物

海洋放线菌FA-F-5对水产病原菌的抑制作用被引量：2: 2008年; 【目的】为了筛选可用于水生动物疾病防治的生防菌。【方法】以从福建琅琦岛海泥中分离得到的1株对多种水产病原菌具有较强抑制作用的菌株FA-F-5为研究对象,通过形态观察、生理生化测定、16SrDNA序列测定对其进行鉴定,并对其发酵条件和产生活性物质的理化性质进行了研究。【结果】初步判定菌株FA-F-5为弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae);FA-F-5产生的抑菌活性物质的最佳发酵条件为:发酵培养基配方为麦芽糖15 g/L、黄豆粉25 g/L、CaCO31 g/L、K2HPO40.5 g/L,MgSO4.7H2O 0.5 g/L,海盐10 g/L,发酵培养基初始pH=8,培养温度25℃,种子液菌龄48 h,接种量100 mL/L,装液量100 mL/L,发酵时间7 d;该抑菌活性物质具有较好的热稳定性和pH稳定性;纸电泳试验证实该抑菌活性物质呈弱碱性。【结论】放线菌FA-F-5能够产生抑制多种水产病原菌的抑菌活性物质,有望开发成为新一代生物渔药的生防菌。; 原居林王高学王建福梁朝军顾忠旗崔婧袁明; 关键词：海洋放线菌发酵条件理化性质

嗜麦芽寡养单胞菌(DR-929)纤溶酶的发酵条件优化及其分离纯化被引量：8: 2007年; 研究了嗜麦芽寡养单胞菌（DR-929）纤溶酶的液体发酵条件及其分离纯化。最佳发酵条件为：可溶性淀粉2．0％，黄豆粉1．0％，酵母膏0．5％，NaCI1．0％，CaCl20．02％，MgS040．05％，种龄36h，发酵时间4d，初始pH8．0或9．0，温度25℃，装样量30ml，接种量5％或6％。采用发酵液离心除菌，25％-70％饱和度的硫酸铵沉淀，Phenyl FF（highsub）疏水层析，Q—SepharoseFF离子交换层析，Superdex 75凝胶过滤层析对活性成分分离纯化。用SDS—PAGE电泳对纯化效果进行检验，结果表明在SDS—PAGE中得到单一条带，分子量28．3kDa。最终纯化倍数和酶活回收率分别为271．5和24．5％。; 王高学梁朝军黄海洪王建福原居林; 关键词：嗜麦芽寡养单胞菌纤溶酶发酵条件分离纯化

新型纤溶酶FA-Ⅰ抗血栓形成和溶栓作用研究被引量：4: 2009年; 目的研究新型纤溶酶FA-Ⅰ在动物体内的抗凝血、抑制血栓形成和溶栓作用。方法建立小鼠抗凝血模型、大鼠静脉血栓形成模型和兔颈动脉血栓模型,分析三种模型中动物给予FA-Ⅰ后的凝血时间(CT)、凝血酶原时间(PT)、活化的部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、优球蛋白溶解时间(ELT)和纤维蛋白原(FIG)含量,并分析其血液流变学指标。结果在三种模型中,FA-Ⅰ明显延长CT、PT、APTT和TT(P<0.05或P<0.01),显著降低ELT和FIG含量(P<0.01),并且能改善兔血液流变状态。结论FA-Ⅰ无论经静脉注射还是口服均能达到抗栓、溶栓之功效,其不但有望开发成实用的静脉注射溶栓药物,而且可以开发成安全的口服溶栓药物或保健品。; 王高学梁朝军姚嘉赟原居林王建福

蕈状芽孢杆菌代谢产物增强小鼠免疫力活性物质的分离、鉴定被引量：6: 2009年; 本文的目的是对蕈状芽孢杆菌代谢产物中增强小鼠免疫力的物质进行分离、鉴定和免疫增强作用测定。在生物活性追踪的指导下,本文通过大孔吸附树脂吸附、硅胶柱分离和葡聚糖凝胶柱纯化,对蕈状芽孢杆菌代谢产物中增强小鼠免疫力的活性成分进行了分离,得到了具有较强免疫增强作用的化合物(标记为M),并对化合物M进行了波谱测定,确定化合物M为环(脯氨酸-甘氨酸)二肽(C7H10O2N2)。以生理盐水为对照,通过腹腔注射,对小鼠进行了SOD活性、白细胞吞噬活性、白细胞杀菌活性3个指标测定。结果显示,在第14天时,SOD活性和白细胞吞噬活性达到了最高值,且同对照组相比有显著提高;在第21天时,白细胞杀菌活性达到了最高值,且同对照组相比有显著提高。以上结果表明,蕈状芽孢杆菌代谢产物中的环(脯氨酸-甘氨酸)二肽能够显著增强小鼠免疫力。; 王高学高鸿涛付维法崔婧袁明; 关键词：免疫增强剂

一株青藏高原冻土溶栓菌的筛选及鉴定被引量：7: 2010年; 【目的】心脑血管疾病是一种世界性疾病,严重危害人类健康,溶栓酶是治疗该病的有效药物之一。而极端环境中的溶栓微生物因其特殊的生存方式,可能分泌高效、安全的新型溶栓酶。因此,为了获得这种具有特殊功能的溶栓酶,我们从青藏高原高海拔冻土中进行了溶栓菌的筛选。【方法】首先,本文通过血粉-琼脂平板初步筛选具有血粉水解功能的菌株,然后对其进行体外溶栓试验以检验其人工血栓溶解功能,并用纤维蛋白平板法测定其纤溶活性,最后通过生理生化试验和16S rRNA基因序列分析方法对该菌进行分类鉴定。【结果】本文从青海省玉树藏族自治州海拔4300 m的冻土样品中筛选获得了菌株DR-536,不仅具有水解血粉的功能,还具有体外溶栓功能,且能够水解纤维蛋白,纤溶活性为51.80 IU/mL(以尿激酶为标准)。最后,分类鉴定结果显示菌株DR-536是一株金黄节杆菌(Arthrobacter aurescens)。【结论】本文首次从青藏高原高海拔土壤中进行了溶栓菌的筛选,并获得了一株新型溶栓菌,为进一步研究和开发高效、安全的新型溶栓酶提供了菌源。; 王高学黄海洪张明; 关键词：青藏高原冻土 RRNA基因

金黄节杆菌DR-536分泌新型溶栓酶FA-Ⅰ发酵条件的优化被引量：1: 2010年; 【目的】对金黄节杆菌DR-536(Arthrobacter aurescens strain DR-536)分泌产生新型溶栓酶FA-Ⅰ的发酵条件进行优化。【方法】通过纤维蛋白平板法,测定不同氮源、碳源、复配氮源、金属离子、NaCl、初始pH、接种量、装液量、发酵时间和培养温度条件下菌株DR-536分泌的溶栓酶产量。【结果】菌株DR-536(A.aurescens strain DR-536)分泌产生溶栓酶FA-Ⅰ的最佳发酵培养基配方为:黄豆粉1.0%,酵母膏1.0%,NaCl2.0%,FeSO40.05%,pH6.0。最佳发酵条件为:接种量4%,装液量20mL/150mL,发酵时间72h,发酵温度30℃。【结论】金黄节杆菌DR-536(A.aurescens strain DR-536)在普通培养条件下能够大量分泌溶栓酶FA-Ⅰ,适于大规模发酵,便于该酶的开发利用。; 张明黄海洪王高学; 关键词：发酵条件

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陕西省科技攻关计划(2006K02-G14-03)