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苦马豆素的来源及其生物合成研究进展被引量：3: 2012年; 苦马豆素是苦马豆属、棘豆属、黄芪属、番薯属、黄花稔属等某些有毒植物的主要毒性成分,动物采食该类植物会发生以神经系统功能紊乱为特征的中毒病,搞清苦马豆素的来源对防治该类植物引起的动物中毒病具有重要意义.苦马豆素具有良好的抗肿瘤和免疫调节作用,但价格昂贵,不易从植物中提取.豆类丝核菌、金龟子绿僵菌、疯草内生真菌等能够产生苦马豆素,利用该类真菌生物合成苦马豆素可为苦马豆素的批量生产开辟新途径.本文主要对苦马豆素的来源和生物合成研究概况进行综述,旨在为苦马豆素引起的动物中毒病的防治和医学应用研究提供思路和认识.; 赵清梅余永涛何生虎王建华; 关键词：苦马豆素生物合成

产苦马豆素疯草内生真菌实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：3: 2021年; 根据疯草内生真菌苦马豆素合成基因簇中swnK基因KS区域设计引物,构建SYGR Green I实时荧光定量PCR检测方法,初步分析黄花棘豆植物样品中内生真菌生物量与苦马豆素含量的关系。结果表明,基于swnK基因KS区域构建的实时荧光定量PCR法特异性较好,灵敏性较高,当真菌起始DNA浓度在0.009~90ng/μL范围时,内生真菌起始DNA浓度的对数值与Ct值呈负相关,内生真菌DNA的最低检出限为0.009ng/μL。在此基础上对黄花棘豆内生真菌生物量的分析表明,苦马豆素含量与内生真菌生物量呈正比。用于疯草内生真菌生物量检测时,基于swnK基因KS区域构建的实时荧光定量PCR方法特异性要高于基于ITS序列构建的方法,其灵敏度、检测限与后者相当,可用于疯草中产苦马豆素内生真菌的定量分析。; 毛彦妮余永涛赵清梅郭仕辉田新岳张浩东李金荣李金荣; 关键词：实时荧光定量PCR 苦马豆素

SSH技术在丝状真菌功能基因筛选中的应用被引量：1: 2014年; 抑制性消减杂交(SSH)技术是基于抑制性PCR和消减杂交技术发展起来的一种高效分离差异表达基因的方法。因其具有特异性高、假阳性率低、背景低、快速高效等特点,已广泛应用于丝状内生真菌功能基因筛选中。主要对抑制性消减杂交技术的原理、技术流程、特点及其在丝状真菌生长发育、代谢活性物质及致病基因等方面的应用作简要综述。; 张蕾蕾余永涛何生虎葛松; 关键词：差异基因丝状真菌

披针叶黄华中2株蠕形分生孢子内生真菌的鉴定被引量：1: 2015年; 对披针叶黄华(Thermopsis lanceolata)中分离的编号为SP01、RM02的2株蠕形分生孢子内生真菌进行种属分类鉴定。观察真菌的形态,提取真菌DNA,扩增并测定其ITS、GAPDH序列,构建系统发育树,结合形态特征和遗传进化分析结果,并对其进行种属分类。结果表明,SP01菌株的形态特征与凸脐孢属(Exserohilum)中的E.rostratum最为相似,与E.rostratum的遗传进化关系最为密切;RM02菌株的形态特征与弯孢属(Curvularia)中C.spicifera、C.australiensis最为相似,与C.spicifera的遗传进化关系最为密切。确定披针叶黄华中分离的SP01、RM02分别为E.rostratum和C.spicifera。; 孙大林赵清梅余永涛罗永红朱海吴勇郭浩满吴秀枝李明月; 关键词：内生真菌

宁夏黄花棘豆中产苦马豆素内生真菌的分离及鉴定被引量：6: 2013年; 对宁夏黄花棘豆中产苦马豆素内生真菌进行分离和鉴定,为进一步研究疯草内生真菌合成苦马豆素的分子调控机理提供菌种和奠定基础。分离并纯化黄花棘豆植物组织中的真菌,采用气相色谱质谱联用法对各菌株菌丝中的苦马豆素进行分析,筛选能产生苦马豆素的内生真菌;紫外线照射和黑暗交替培养诱导内生真菌产孢;提取真菌DNA,扩增和测定真菌甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GPD)、内部转录间隔区(internal transcribed space,ITS)和线粒体核糖体小亚基(mitochondrial small subunit,mt SSU)基因序列,进行同源性比对和遗传进化分析,对其进行种属分类和命名。本研究从宁夏黄花棘豆中共分离到5株真菌,其中菌株NX-FEL001菌丝中含有苦马豆素,经诱导培养,该菌株能产生分生孢子及分生孢子梗等结构;序列同源性和系统发育分析结果表明,该菌株与Undifilum真菌的亲缘关系最近,根据形态结构和分子进化分析结果将菌株NX-FEL001鉴定为Undifilum oxytropis。; 张蕾蕾何生虎余永涛赵清梅; 关键词：黄花棘豆内生真菌苦马豆素 OXYTROPIS

宁夏苦豆子中产苦参碱内生真菌的分离与鉴定被引量：10: 2013年; 【目的】从宁夏野生苦豆子中分离内生真菌,筛选能够产生苦参碱、氧化苦参碱、氧化槐果碱或槐定碱4种喹诺里西啶类生物碱的内生真菌。【方法】应用光学显微镜和扫描电子显微镜对分离菌株显微形态进行观察,根据形态对各菌株进行初步分类;应用薄层色谱法、气相色谱-质谱联用法和酸性染料比色法检测各分离菌株的生物碱成分。对能够产生生物碱的真菌ITS和SSU rDNA序列进行扩增和测序,根据序列信息进行同源性比较和系统发育树构建;结合形态特征,对其进行种属分类。【结果】从苦豆子中共分离到27株真菌,其中23株分属于青霉属、曲霉属、链格孢属、镰刀菌属、Simplicillium属真菌,4株为不产孢菌;筛选出E1、E3和E5这3株能够产生苦参碱的内生真菌,均属于Simplicillium属真菌,其菌丝中苦参碱的含量分别为20.4、17.4和37.6μg.g-1。【结论】根据真菌形态特征、同源性比较和遗传进化分析结果,确定该3株产苦参碱内生真菌均为Simplicillium lanosoniveum。; 余永涛何生虎赵清梅; 关键词：苦豆子苦参碱内生真菌

疯草内生真菌苦马豆素合成相关基因及其研究方法的进展被引量：5: 2019年; 豆科棘豆属(Oxytropis)和黄芪属(Astragalus)有毒植物统称为疯草。疯草的营养价值丰富,是潜在的优良牧草。但家畜长期或过量采食后,可发生以神经机能紊乱为特征的慢性中毒病,称之为疯草中毒病[1]。中毒家畜表现为共济失调、瘫痪、流产、不孕、出生缺陷和死亡等。; 毛彦妮余永涛赵清梅何生虎何生虎; 关键词：疯草内生真菌苦马豆素功能基因研究方法

不同因素对疯草内生真菌合成苦马豆素的影响被引量：13: 2015年; 研究不同因素对疯草内生真菌——Undifilum oxytropis合成苦马豆素的影响,筛选出显著影响U.oxytropis苦马豆素合成的因素。将U.oxytropis分别接种到不同pH或不同浓度聚乙二醇(PEG)、L-哌可酸、L-赖氨酸、α-酮戊二酸的培养基中培养,测定菌丝及其发酵液中苦马豆素,分析各条件下真菌苦马豆素产率的变化。结果表明:当pH在4.5~6.5时,随pH增加,真菌SW产率显著增加(P<0.05);当PEG质量浓度在0~32g·L-1时,随PEG增加,真菌苦马豆素产率显著降低(P<0.01);当在培养基中添加相同量(10-3 mol·L-1)的L-哌可酸、L-赖氨酸、ɑ-酮戊二酸时,L-哌可酸添加组的苦马豆素产率显著降低(P<0.05),L-赖氨酸添加组苦马豆素产率显著增加(P<0.05);当L-哌可酸的初始浓度为10-3和10-2 mol·L-1时,真菌的苦马豆素产率显著下降(P<0.05),当其浓度为10-4 mol·L-1时,苦马豆素产率显著增加(P<0.01);当L-赖氨酸的初始浓度为10-1、10-2或10-4mol·L-1时,真菌苦马豆素产率显著降低(P<0.05)。当ɑ-酮戊二酸的初始浓度分别为10-1、10-2、10-3 mol·L-1时,真菌的苦马豆素产率显著降低(P<0.05)。由试验可知,低pH或添加PEG可抑制U.oxytropis中苦马豆素的合成,L-哌可酸、L-赖氨酸、α-酮戊二酸均对U.oxytropis的苦马豆素合成产生显著影响,但对苦马豆素合成的影响与各物质在培养基中的浓度密切相关。; 张蕾蕾余永涛何生虎赵清梅葛松; 关键词：疯草内生真菌苦马豆素生物合成

宁夏黄花棘豆种子萌发特性研究被引量：5: 2012年; 比较浓硫酸酸蚀、热水浸种、预冷和砂纸摩擦等4种硬实破除方法及不同培养温度和光照强度对宁夏黄花棘豆种子萌发的影响,以筛选种子萌发的适宜条件.结果表明:浓硫酸酸蚀和砂纸摩擦处理种子的萌发率均显著高于对照组,其中10min酸蚀处理的种子萌发率最高,为86.67%,砂纸摩擦处理种子的萌发率为75%;热水浸种和预冷处理种子的萌发率与对照组差异不显著.当培养温度为10～25℃时,种子萌发率显著高于对照组,25℃时最高,为85%,当温度超过25℃时,种子萌发率显著降低;当光照强度为40%～80%时,种子萌发率显著高于对照组,光照强度为80%时最高,为82.22%.; 赵清梅余永涛赵明生李静; 关键词：黄花棘豆种子萌发

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国家自然科学基金(31201962)

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