国家自然科学基金(30140005)
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
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- NTE酯酶活力域真核表达载体的构建及其表达
- 2005年
- 目的构建人神经病变靶标酯酶(NTE)酯酶活力域(NESP)真核表达载体,并在细胞中表达。方法利用含有特定酶切位点的引物,通过PCR扩增出其酯酶活力域,经T载体克隆测序正确后,双酶切回收cDNA片段定向插入到pcDNA3·1(+)中,通过酶切鉴定其真核表达载体的构建。然后将其转染到真核细胞中,通过NTE活力测定,检测其表达效果。结果经PCR获得了NTE的1·6kb酯酶活力域的cDNA片段,T载体克隆后测序证实完全正确,然后克隆到真核表达载体中获得了NTE酯酶活力域真核表达载体pcDNA-NEST。瞬时转染到COS7和SH-SY5Y细胞中,NTE的活力与对照细胞相比显著提高。结论成功构建了NEST真核表达载体,并在哺乳动物细胞中表达。
- 常平安陈瑞李薇伍一军
- 关键词：哺乳动物细胞
- 神经病靶标酯酶与Gβ2蛋白的相互作用
- ＜正＞目的神经病靶标酯酶（NTE）被认为是有机磷引发迟发性神经毒性（OPIDN）的主要作用靶标,但NTE 的生理功能并不清楚,妨碍了对OPIDN发生机制的阐明。本研究从信号转导角度出发,以期阐释NTE的生理功能,为揭示O...
- 陈瑞刘承芸杨琳常平安李薇伍一军
- 关键词：PMA蛋白激酶C
- 文献传递
- 神经病靶标酯酶的特性被引量：5
- 2004年
- 神经病靶标酯酶 (NTE)是在研究有机磷引起的迟发性神经病的过程中被发现的。研究表明 ,NTE是一种主要存在于神经元内质网上的跨膜蛋白 ,其本质是具有磷脂酶B催化功能的磷脂酶 ,在细胞内调节磷脂酰胆碱的代谢。NTE是哺乳动物胚胎发育所必需的蛋白质 ,脑特异性缺失NTE会导致神经退行性症状的出现。NTE作为有机磷的作用位点 ,在不同的生物中可能通过不同的机制引发不同的毒性症状。
- 常平安伍一军
- 关键词：有机磷迟发性神经病
- 神经病靶标酯酶与Gβ2蛋白的相互作用
- 2005年
- 陈瑞刘承芸杨琳常平安李薇伍一军
- 关键词：PMA蛋白激酶C
