国家自然科学基金(30972191)
- 作品数：67 被引量：141H指数：6
- 相关作者：李月红张培军卢玉婷焦雪张林波更多>>
- 相关机构：吉林农业大学吉林省卫生监测检验中心吉林省水产科学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金引进国际先进农业科技计划吉林省教育厅“十二五”科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 鲤鱼春季病毒出血症病毒G基因在昆虫细胞中的表达与鉴定
- 2012年
- 采用RT-PCR方法扩增鲤鱼春季病毒出血症病毒(SVCV)的糖蛋白(G)基因,将PCR产物插入到杆状病毒转移载体pFastBac 1中,获得重组转移载体pFastBac 1-G,将其转化入含有Bacmid的DH10Bac感受态细胞中,经3种抗性和蓝白斑筛选,获得含有G基因的重组穿梭质粒rBacmid-G。在脂质体转染试剂的介导下,将rBacmid-G转染sf9细胞,获得重组杆状病毒。提取重组杆状病毒基因组,用M13引物PCR鉴定。对重组杆状病毒感染的sf9细胞,通过电镜观察、SDS-PAGE、Western blotting进行检测,结果表明,重组蛋白在sf9细胞中获得正确表达,相对分子质量约58 000,与鼠抗SVCV阳性血清具有良好的反应原性。本试验为研究鲤鱼春季病毒出血症病毒G蛋白的生物学活性和亚单位疫苗的研制奠定了基础。
- 李月红付云红陈奇王永志扈荣良
- 关键词：G基因杆状病毒表达
- 枯草芽孢杆菌对铅暴露鲫鱼肠道的影响被引量：2
- 2019年
- 为了研究枯草芽孢杆菌(WB600)对铅暴露鲫鱼肠道的影响,试验选取健康的鲫鱼192尾,随机分为8组,分别为对照Ⅰ组,枯草芽孢杆菌阳性对照Ⅱ组(1×109cfu/g),铅暴露Ⅲ组、Ⅴ组、Ⅶ组(0. 05,0. 5,1 mg/L),益生菌治疗Ⅳ组、Ⅵ组、Ⅷ组(0. 05 mg/L Pb+WB600、0. 5 mg/L Pb+WB600、1 mg/L Pb+WB600)。60 d后取肠道组织,通过常规方法制作石蜡切片,测量肠道绒毛高度、宽度及肌层厚度,从而评价该菌株对铅暴露鲫鱼肠道组织的影响。结果表明:与Ⅰ组相比,Ⅱ组近端肠和远端肠的绒毛高度、宽度、肌层厚度均显著增加(P <0. 05);与铅暴露组相比,益生菌治疗组近端肠及远端肠的绒毛高度、宽度、肌层厚度均不同水平增加;与Ⅲ组相比,Ⅳ组远端肠绒毛宽度显著增加(P<0. 05),其他均无显著差异(P>0. 05);与Ⅴ组相比,Ⅵ组近端肠绒毛宽度和远端肠绒毛高度、肌层厚度显著增加(P<0. 05),其他均无显著差异(P>0. 05);与Ⅶ组相比,Ⅷ组近端肠绒毛宽度和远端肠肌层厚度显著增加(P<0. 05),其他均无显著差异(P>0. 05)。说明枯草芽孢杆菌对不同铅浓度环境中鲫鱼的肠道结构有积极影响,对缓解铅导致的肠道损伤有一定的作用。
- 秦悦王云翔尹玉伟郭曦尧王楠程义李月红
- 关键词：枯草芽孢杆菌鲫鱼铅暴露肠道组织石蜡切片
- 1株感染洛氏鱥呼肠孤病毒的分离与培养被引量：1
- 2018年
- 利用细胞培养技术从养殖发病洛氏鲅中分离出1株病毒，经人工感染试验、电镜观察、核酸基因组SDS-PAGE电泳、RT—PCR检测确认为呼肠孤病毒。人工感染发病的症状与自然发病症状相同；病毒感染可使鲤鱼上皮瘤细胞（EPC）产生典型细胞病变效应，收集细胞上清，负染后电镜下可观察到大小均一，直径约70nm，近球形，无囊膜结构的病毒粒子，初步判断为呼肠孤病毒；病毒基因组SDS-PAGE结果表明，病毒基因组由11个分段的RNA核酸片段组成，为典型的水生呼肠孤病毒核酸带型。病毒基因纽$10节段RT-PCR结果表明，有特异性条带，其与GenBank中登录的呼肠孤病毒S10节段（JN206665．1）序列同源性为91％，该分离株应为呼肠孤病毒，本研究首次在洛氏缄鱼内分离到呼肠孤病毒。
- 巴翠玉张培军赵福广张林波焦雪李月红
- 关键词：呼肠孤病毒
- CODEHOP设计简并引物克隆花羔红点鲑肌钙蛋白及其生物信息分析
- 2017年
- 本实验通过无性生殖的方法得到了花羔红点鲑肌钙蛋白(Tnc)基因,并在使用生物信息学资源和生物软件的条件下,通过CODEHOP的方法对特定的氨基酸序列设计简并引物,并对得出的结果进行同源性分析同时构建其相对系统进化树。结果表明:通过CODEHOP的方法所设计出的引物简并度较其他方法得到的引物简并度低,DNA熔解温度(Tm值)修改较方便,产物具有较强的特异性;肌钙蛋白具有高度的保守性,将肌钙蛋白基因片断做结果比对,其编码的氨基酸序列与斑马鱼同源性可达96%,与大西洋鲑Salmo salar同源性为92%,白斑狗鱼Esoxlucius同源性为92%,虹鳟Oncorhynchus mykiss同源性为91%,斜带石斑鱼Epinepheluscoioides同源性为91%,斑点叉尾鮰Ictalurus punctatus同源性为85%。
- 茆安婷焦雪巴翠玉李月红
- 关键词：花羔红点鲑CODEHOP
- L-肉碱对胖头鱥肌肉细胞和草鱼性腺细胞抗氧化功能的调节作用
- 2018年
- 为研究L-肉碱对胖头鱥Pimephales promelas肌肉细胞(FHM)和草鱼Ctenopharyngodon idellus性腺细胞(GCO)抗氧化酶功能的调节作用,以两种鲤科鱼细胞FHM和GCO为研究对象,在培养基中添加不同浓度的L-肉碱(0、0. 001、0. 01、0. 1、0. 5、1、5 mmol/L)分别孵育FHM细胞6 h、GCO细胞12 h,采用生物化学法和荧光定量PCR法检测L-肉碱对细胞抗氧化酶活性和基因相对表达量的影响。结果表明:0. 01～5 mmol/L L-肉碱组FHM细胞SOD、CAT活性显著高于对照组(P<0. 05),仅5 mmol/L L-肉碱组GCO细胞SOD、CAT、GPX、γ-GCS活性显著高于对照组(P<0. 05);与对照组相比,L-肉碱组FHM细胞Cu Zn-SOD mRNA相对表达水平无显著变化(P>0. 05),0. 5、1、5 mmol/L L-肉碱组GCO细胞Cu ZnSOD mRNA相对表达水平显著上调(P<0. 05); 0. 01～5 mmol/L L-肉碱组FHM细胞CAT mRNA相对表达水平显著上调(P<0. 05),所有L-肉碱组GCO细胞CAT mRNA的相对表达水平显著上调(P<0. 05); 0. 5mmol/L L-肉碱组GCO细胞GPX mRNA相对表达水平显著上调(P <0. 05);仅0. 1 mmol/L L-肉碱处理FHM细胞GCLC mRNA相对表达量水平显著上调(P<0. 05),L-肉碱添加范围为0. 5～5 mmol/L时,GCO细胞GCLC mRNA的相对表达水平均显著上调(P<0. 05)。研究表明,在培养基中添加L-肉碱能明显上调FHM和GCO细胞的抗氧化酶活性及其相关基因的相对表达水平,在本试验条件下,细胞培养基中推荐L-肉碱的适宜添加浓度为0. 1～1 mmol/L。
- 郑男王秋举马悦于婷陈玉珂刘洪键张东鸣
- 关键词：草鱼L-肉碱
- 苏打盐碱地瓦氏雅罗鱼成鱼养殖技术被引量：3
- 2019年
- 本文介绍了苏打盐碱地瓦氏雅罗鱼成鱼养殖技术,主要包括池塘选择及处理、成鱼养殖技术和日常管理等3个方面内容,以期为瓦氏雅罗鱼的养殖提供参考。
- 刚成海尚信池李月红
- 关键词：瓦氏雅罗鱼盐碱地成鱼养殖技术
- 丰年虫发光弧菌药敏筛选及应用
- 2019年
- 丰年虫又称盐水卤虫,是一种普遍应用于水产苗种培育的饵料生物。依据我国水产养殖标准GB/T 30890-2014《凡纳滨对虾育苗技术规范》,丰年虫无节幼体应用于南美白对虾糠虾与仔虾阶段。我国对虾发光病主要发生于福建、浙江、广东等沿海地区,主要危害凡纳滨对虾和斑节对虾。目前的研究表明,引起对虾发光病的病原菌有霍乱弧菌(V.cholerae)、灿烂弧菌(V.splendidus)、火神弧菌(V.logei)、哈维氏弧菌(V.harveyi)和费氏弧菌(V.fischeri)5种.
- 蒋德源张一琳李月红
- 关键词：丰年虫实验组无节幼体凡纳滨对虾
- 鲤春病毒血症病毒核蛋白的原核表达及初步鉴定
- 2012年
- 为原核表达鲤春病毒血症病毒(SVCV)核(N)蛋白,本研究采用RT-PCR方法扩增SVCV N蛋白基因(SVCV-N),克隆于原核表达载体pET-28a(+)中,并转化到大肠杆菌Rosetta中进行表达。SDS-PAGE分析表明,SVCV-N基因在大肠杆菌中获得高效表达,表达产物约47 ku,与预期相符。Western blot检测表明,该重组蛋白可以被SVCV阳性血清所识别。
- 李月红付云红王永志苗富春扈荣良陈萍
- 关键词：鲤春病毒血症病毒原核表达
- 传染性造血器官坏死病病毒G基因全长cDNA克隆及重组表达研究
- 2017年
- 本研究旨在克隆G基因全长并与其他传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)株进行分析,为IHNV的预防检测提供依据。通过提取IHNV-G蛋白RNA并进行扩增,将其克隆到p MD-18T并与p Chlamy-4载体相连,重组到莱茵衣藻中并提取总蛋白,结果可得:扩增片段长度为1 500 bp,经SDS-PAGE电泳得到一条大约为58 k Da的蛋白条带,Westen Blot分析结果显示,重组莱茵衣藻所表达的蛋白可以与6×HIS标签抗体特异性结合;并且以重组表达的G蛋白为抗原,鼠抗IHNV血清为一抗,辣根过氧化物酶标记的驴抗鼠IgG为二抗,再次进行Westen Blot检验,其结果显示,经诱导后的G蛋白能与鼠抗IHNV血清反应,并在58 k Da处出现了一条明显的特异性条带,具有良好的反应原性。表明重组莱茵衣藻表达系统构建成功。
- 焦雪卢玉婷安俊花张翔宇张培军李月红
- 关键词：糖蛋白WESTERNBLOT
- 食物中L-肉碱含量及其测定方法的研究进展被引量：1
- 2021年
- L-肉碱即左旋肉碱,是促进脂肪转化为能量的必需营养素,它具有调节脂代谢、提高抗氧化和免疫能力等功能,对于人类的健康和疾病预防具有重要的作用。本文在概述L-肉碱生理功能的基础上,对食物中L-肉碱含量及L-肉碱测定方法进行系统综述,为正确认识L-肉碱、科学合理地利用食物中L-肉碱资源提供基础理论依据,为获得一种简单、快速、准确、特异性强的L-肉碱测定方法并应用于实践提供参考数据。
- 王新王秋举刘洪健王宁徐永平马悦张东鸣
- 关键词：食物L-肉碱
