上海市高校选拔培养优秀青年教师科研专项基金(07-05)
- 作品数:4 被引量:16H指数:2
- 相关作者:姜有声程顺峰王世表战文斌杨倩更多>>
- 相关机构:上海海洋大学中国海洋大学复旦大学上海医学院更多>>
- 发文基金:上海市高校选拔培养优秀青年教师科研专项基金博士科研启动基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 对虾白斑综合征病毒囊膜蛋白VP19的单克隆抗体制备及其定位被引量:9
- 2009年
- 为了更好地研究对虾白斑综合征病毒(WSSV)蛋白VP19在WSSV感染过程中的作用,利用VP19的单克隆抗体直接对VP19进行了定位。从患白斑综合征的中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)鳃丝中提取WSSV,将提纯的WSSV经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离,然后洗脱提纯其病毒蛋白VP19并免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞融合,用间接免疫荧光技术(IFAT)和Western-Blot技术筛选出1株阳性杂交瘤细胞,将检测出的阳性杂交瘤细胞经有限稀释法克隆,研制出抗VP19的单抗,再利用免疫胶体金技术对病毒蛋白VP19进行定位,结果显示,胶体金粒子位于WSSV病毒的囊膜上,说明病毒蛋白VP19位于WSSV囊膜上。
- 姜有声战文斌程顺峰王世表
- 关键词:对虾白斑综合征病毒单克隆抗体
- 一种改进的对虾白斑综合征病毒提纯方法被引量:5
- 2009年
- 对虾白斑综合征病毒(WSSV)的囊膜蛋白在提纯的过程中易脱落,用传统的密度梯度离心方法不易获得完整的病毒粒子,对传统的蔗糖密度梯度离心方法加以改进后,可以获得大量完整的病毒粒子。用患白斑综合征病毒病的中国对虾鳃制备WSSV粗提液,感染螯虾(Cambarus proclarkii),选取25%的蔗糖溶液用作病虾鳃的匀浆液,然后经蔗糖密度梯度离心,分取各带负染后电镜观察,大量完整的病毒位于46%-52%蔗糖梯度之间,病毒粒子末端带有很长的尾;而病毒裸露的核衣壳位于40%~46%蔗糖梯度之间;在57%~62%之间观察到较多完整病毒粒子和少量细菌。实验结果表明改进的病毒提纯方法较好,可得到大量完整的带囊膜的病毒颗粒。
- 姜有声战文斌程顺峰王世表
- 关键词:白斑综合征病毒病毒提纯完整病毒
- 西伯利亚鲟嗜水气单胞菌与其它3株气单胞菌间的免疫交叉反应
- 2012年
- 采用间接免疫荧光技术分析了西伯利亚鲟细菌性败血症致病菌嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophlia)X1菌株、豚鼠气单胞菌(Aeromonas caviae)XL2-T菌株、致病性温和气单胞菌(Aeromonas sobria)W1菌株与无致病性嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophlia)M3菌株等水产养殖主要病原菌与抗血清之间的免疫交叉反应。结果显示具有致病性的同属菌株X1菌株、XL2-T菌株、W1菌株交叉反应程度较大,说明这3株菌表面存在较多相同抗原决定簇。而无致病性菌株M3与其他3株致病性菌株免疫交叉反应程度较小。
- 姜有声杨倩杨先乐吕利群邱军强
- 关键词:嗜水气单胞菌豚鼠气单胞菌温和气单胞菌抗血清
- 西伯利亚鲟致病性嗜水气单胞菌外膜蛋白及其抗原性分析被引量:2
- 2012年
- 采用十二烷基肌氨酸钠(Sarkosyl)法提取西伯利亚鲟嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)外膜蛋白,电泳显示所提取的主要外膜蛋白分子量为26~120 kDa;为比较该菌株与气单胞菌菌属其他细菌外膜蛋白组分及抗原性异同,以致病性豚鼠气单胞菌(A.caviae)、温和气单胞菌(A.sobria)和无致病力的嗜水气单胞菌为对照,电泳图谱显示4种气单胞菌外膜蛋白的分子量主要集中在26~120 kDa之间;利用抗西伯利亚鲟嗜水气单胞菌血清的免疫印迹试验表明该菌株外膜蛋白中分子量为75 kDa、52 kDa、43 kDa、40 kDa、34 kDa、28 kDa的蛋白条带呈现阳性反应,其他3种气单胞菌外膜蛋白中均有与该抗血清反应的条带,且分子量为28 kDa、34 kDa的反应条带为4株菌共有;43 kDa与75 kDa反应条带为部分菌株共有。为进一步筛选和研究致病性气单胞菌的共同保护抗原提供参考。
- 姜有声杨倩李圆圆杨先乐吕利群邱军强
- 关键词:外膜蛋白抗原性