广西壮族自治区自然科学基金(05112001-4C)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 相关作者：王秋雁何敏蓝秀万徐伯赢更多>>
- 相关机构：广西医科大学湖州师范学院更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- α1,3-岩藻糖基转移酶Ⅶ转染对全反式维甲酸诱导的人肝癌细胞凋亡的影响被引量：1
- 2009年
- 为了解α1,3-岩藻糖基转移酶Ⅶ(α1,3FucT-Ⅶ)转染对全反式维甲酸诱导的人肝癌7721细胞凋亡的影响及其分子机理,本研究通过质粒转染把α1,3FucT-Ⅶ导入人肝癌7721细胞,建立了稳定表达不同量α1,3FucT-Ⅶ的H7721细胞株。采用流式细胞术测定细胞表面SLex的表达及细胞凋亡、Westernblot方法检测Caspase-3、免疫荧光染色法观测细胞骨架蛋白---肌动蛋白F-actin的变化、caspase-3抑制剂DEVD-CHO抑制caspase-3的活化。研究结果表明,用全反式维甲酸诱导细胞凋亡,α1,3FucT-Ⅶ的过量表达使凋亡细胞数量明显增多,caspase-3的活性和细胞骨架F-actin的破坏均增高,抑制剂DEVD-CHO可明显抑制细胞凋亡,但F-actin的破坏程度并未得到改善。通过caspase-3通路转染α1,3FucT-Ⅶ增加了肝癌细胞对全反式维甲酸诱导的凋亡的敏感性,从而为肝癌的防治提供了实验依据。
- 佘尚扬王秋雁何敏蓝秀万
- nm23-H1对全反式维甲酸诱导的人肝癌细胞凋亡及其相关信号转导通路的影响被引量：1
- 2010年
- 为了解nm23-H1转染对全反式维甲酸诱导的人肝癌H7721细胞凋亡的影响,本研究通过质粒转染把nm23-H1导入人肝癌7721细胞,建立了nm23-H1过表达稳转细胞株。首先采用MTT法测定细胞生长曲线,再通过流式细胞术和丫啶橙染色法观察细胞凋亡,最后采用Western blot检测凋亡相关的信号通路分子bcl-2、PKB、PKB-Ser473、PKB-Thr308和p53的表达情况。研究发现,nm23-H1转染对人肝癌7721细胞的生长没有影响;但nm23-H1转染能明显促进全反式维甲酸诱导的细胞凋亡,nm23-H1转染细胞凋亡率为18.2%,而对照细胞凋亡率仅为1.0%;nm23-H1和对照细胞的过量表达对bcl-2的表达没有明显影响,但PKB的Ser473和Thr308位的磷酸化显著下调,抑癌基因p53的表达量上调。研究结果表明,nm23-H1的过量表达增加了人肝癌细胞对全反式维甲酸诱导的凋亡的敏感性,因此推测nm23-H1可作为肝癌治疗的有效靶点。
- 佘尚扬蓝秀万徐伯赢何敏王秋雁
- 关键词：NM23-H1细胞凋亡
- RNA干扰沉默α1,3岩藻糖转移酶-Ⅶ基因对人肝癌细胞增殖的影响被引量：2
- 2010年
- 目的研究RNA干扰沉默α1,3岩藻糖转移酶-Ⅶ(α1,3FucT-Ⅶ)基因对人肝癌细胞增殖的影响。方法设计合成α1,3FucT-Ⅶ特异性RNA干扰质粒,并用脂质体转染导入人肝癌H7721细胞。RT-PCR检测细胞中α1,3FucT-ⅦmRNA的表达。流式细胞术测定细胞表面唾液酸化的LewisX抗原(SLex)的表达及细胞周期。细胞生长曲线通过MTT测定。p27Kip1的表达检测采用Westernblot。结果成功构建了α1,3FucT-Ⅶ特异的shRNA真核表达质粒载体。RNA干扰下调α1,3FucT-Ⅶ表达能抑制H7721细胞生长,表现为细胞生长速度明显较对照组细胞慢,S期细胞百分数明显降低,p27Kip1的表达增加。结论α1,3FucT-Ⅶ可能通过调节p27Kip1的降解影响H7721细胞增殖。
- 佘尚扬蓝秀万何敏王秋雁
- 关键词：RNA干扰细胞增殖P27KIP1
