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广东省科技计划工业攻关项目(2003C31211)

作品数：1 被引量：1H指数：1
相关作者：陈盛强刘启才严小玲李敏雄陈德基更多>>
相关机构：广州医学院第二附属医院广州医学院更多>>
发文基金：广东省科技计划工业攻关项目更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇重组腺病毒
  • 1篇腺病
  • 1篇腺病毒
  • 1篇基因
  • 1篇共表达
  • 1篇NK4基因
  • 1篇B7
  • 1篇HGF

机构

  • 1篇广州医学院
  • 1篇广州医学院第...

作者

  • 1篇石慧
  • 1篇陈德基
  • 1篇李敏雄
  • 1篇严小玲
  • 1篇刘启才
  • 1篇陈盛强

传媒

  • 1篇现代临床医学...

年份

  • 1篇2007
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
共表达人B7—1和HGF／NK4基因的重组腺病毒的制备及初步鉴定被引量：1
2007年
目的构建能同时表达B7—1和HGF／NK4基因的重组腺病毒载体，同时制备相应的复制缺陷型重组腺病毒，检测其在喉癌细胞中的表达。方法构建以串联方式携带人B7-1和HGF／NK4基因的重组穿梭载体pAdtrack-NK4-B7-1。Pme I线性化后与腺病毒载体pAdEasy-1共转化大肠杆菌BJ5183，通过同源重组得到重组腺病毒载体pAd—NK4-B7—1。将重组腺病毒载体转染HEK293包装细胞制备重组腺病毒，应用病毒悬液感染人喉癌细胞株。用RT-PCR检测感染细胞中B7-1和NK4基因mRNA表达。结果酶切鉴定证实阳性pAdTrack—NK4-B7—1重组穿梭载体含有目的基因B7-1和HGF／NK4，同源重组后制备的病毒载体DNA经酶切鉴定获得了阳性重组腺病毒载体，该载体能有效转染HEK293细胞并在细胞内成功包装，转染3d后可以观察到绿色荧光蛋白（GFP）表达并逐渐增多、增强。制备的Ad—NK4-B7在体外能有效感染Hep-2细胞，感染后可维持6d高水平的B7—1和NK4基因的表达，整体表达可持续2周。结论成功构建了同时表达B7．1和NK4基因的重组腺病毒载体并制备出重组腺病毒颗粒，该病毒能有效地感染喉癌细胞并表达高水平的NK4和B7-1基因，为进一步研究B7—1和NK4基因的功能及应用B7—1和NK4进行喉癌的联合基因治疗提供了依据和素材。
李敏雄刘启才石慧陈盛强严小玲陈德基
关键词：腺病毒NK4基因
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