广东省自然科学基金(7301061)
- 作品数：3 被引量：17H指数：1
- 相关作者：李贵涛罗狄鑫唐晓军金勋杰何骁更多>>
- 相关机构：广东省第二人民医院南方医科大学附属中山博爱医院南华大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 菲立磁-多聚赖氨酸复合物体外标记兔骨髓基质细胞被引量：1
- 2009年
- 背景:为明确细胞移植后症状改善是否由移植所致,既往多采用侵袭性方法,但是这种方法不适用于动态追踪及人体研究。如果能够在合适示踪剂的帮助下,采用无创伤性影像学技术在活体识别、跟踪移植后细胞的存活状态,将显著提高细胞移植疗法的学术价值。目的:初步探讨菲立磁-多聚赖氨酸复合物体外磁性标记兔骨髓基质细胞的可行性。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-03/08在珠江医院神经外科实验室完成。材料:2月龄新西兰大白兔8只,由广州中医药大学实验动物中心提供。菲立磁为AdvancedMagnetic公司产品,多聚赖氨酸为sigma公司产品。方法:无菌条件下穿刺抽取兔股骨骨髓,梯度密度离心法分离获取骨髓基质细胞,收集第2代细胞,加入含白血病抑制因子、碱性成纤维细胞生长因子及胎牛血清的神经干细胞培养基诱导5d。将50mg/L菲立磁和1.5mg/L多聚赖氨酸混合,振荡30min后,将复合物加入到细胞培养基中进行标记,孵育细胞24h。主要观察指标:骨髓基质细胞向神经干细胞诱导分化情况,细胞内铁的鉴定,菲立磁-多聚赖氨酸复合物标记对细胞增殖或分化的影响。结果:骨髓基质细胞诱导后可见少量细胞的胞体变圆变大,突起缩短,随时间延长,圆形细胞逐渐增多,部分聚集成簇、成球,FITC荧光染色示巢蛋白呈阳性表达。普鲁士蓝染色结果显示99%以上骨髓基质细胞的胞质内出现细小的蓝色铁颗粒。在含菲立磁-多聚赖氨酸复合物的培养基中,骨髓基质细胞可继续增殖和分化,但增殖分裂后细胞质内铁颗粒数量较增殖前有所减少,经鉴定部分为神经元特异性烯醇化酶阳性细胞。结论:菲立磁-多聚赖氨酸复合物可在体外高效标记骨髓基质细胞,且标记后细胞的活性、增殖和分化能力不受影响。
- 何骁李贵涛唐晓军金勋杰罗狄鑫齐勇
- 关键词：骨髓基质细胞神经干细胞菲立磁多聚赖氨酸体外标记
- 菲立磁细胞内标记兔骨髓基质细胞的初步观察被引量：1
- 2008年
- 目的:探讨利用菲立磁(Feridex)和转染试剂体外标记兔骨髓基质细胞的可行性,为临床上应用磁共振成像(MRI)追踪标记细胞奠定基础。方法:9只2月龄新西兰大白兔无菌条件下行股骨穿刺取骨髓,梯度密度离心法分离获取兔骨髓基质细胞,用菲立磁-多聚赖氨酸复合物(FE-PLL)标记骨髓基质细胞,采用普鲁士蓝染色和台盼蓝拒染实验等方法鉴定FE-PLL标记兔骨髓基质细胞的效率和细胞的活力,并在增殖条件下用改良SABC法进行抗单克隆神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫组织化学染色(DAB-H2O2棕色法呈色)和普鲁士蓝(Prussian blue)染色,对FE-PLL标记骨髓基质细胞的增殖和分化能力进行评估。结果:菲立磁可以高效率地标记兔骨髓基质细胞,标记效率在99%左右。普鲁士蓝染色显示FE-PLL标记骨髓基质细胞胞质内出现细小的蓝色铁颗粒。标记的骨髓基质细胞与正常未标记细胞相比较,细胞的活力、增殖和分化等能力没有明显的差异。结论:菲立磁可以用来体外标记骨髓基质细胞,标记后对骨髓基质细胞活力、增殖和分化能力无明显影响。
- 李贵涛何骁唐晓军金勋杰罗狄鑫陈为坚齐勇徐汪洋
- 关键词：骨髓基质细胞神经干细胞菲立磁多聚赖氨酸超顺磁性氧化铁
- 富血小板血浆联合骨髓间充质干细胞治疗家兔股骨头缺血坏死的研究被引量：15
- 2014年
- 目的评价比较富血小板血浆(PRP)联合骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植修复家兔激素性股骨头缺血坏死与单纯BMSCs移植效果。方法选取2只家兔自股骨骨髓离心提取BMSCs。选取40只家兔制作股骨头缺血坏死模型后,根据股骨头坏死临床诊断标准选取处于股骨头坏死Ⅰ、Ⅱ期阶段的30只家兔随机分为3组,每组10只。第一组10只患肢行钻孔减压后接受PRP联合BMSCs治疗(PRP联合BMSCs治疗组);第二组10只患肢行钻孔减压后只接受单纯BMSCs治疗(单纯BMSCs治疗组);第三组10只作为空白对照组,患肢行钻孔减压后接受注射用0.9%氯化钠溶液治疗。实验结果观察包括:治疗1周后利用聚合酶链反应检测各组转录生长因子(TGF-β)以及血管内皮生长因子(VEGF)含量;治疗5周后行切片分析以及BMSCs生长周期测定。结果聚合酶链反应结果显示,PRP联合BMSCs治疗组分别与单纯BMSCs治疗组以及空白对照组比较,TGF-β的表达量存在差异,并具有统计学意义(3组间TGF-β含量分别为:1.5±0.46、1.2±0.36、0.4±0.12,P<0.01),VEGF的表达量存在差异,并具有统计学意义(3组间VEGF含量分别为:1.5±0.72、1.1±0.43、0.8±0.21,P<0.01);细胞周期测定显示PRP联合BMSCs治疗组与单纯BMSCs治疗组以及空白对照组相比,处于G1期数目较少,具有统计学意义(3组经治疗后处于G1期BMSCs的比例分别为:40%、60%、70%,P<0.05)。结论实验证明,PRP可以促进TGF-β以及VEGF的分泌,并且可以通过促进TGF-β以及VEGF的分泌对BMSCs的增殖有促进作用。与单纯BMSCs治疗相比,PRP联合BMSCs治疗股骨头缺血坏死可能是一种更有效的治疗方法。
- 胡钟旭李东卿李贵涛杜恒胜
- 关键词：富血小板血浆骨髓间质干细胞股骨头坏死
