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浙江省自然科学基金(LY12H05002)

作品数：6 被引量：7H指数：1
相关作者：严泽军蒋军辉谢国海程跃周成更多>>
相关机构：宁波大学上海市第一人民医院上海交通大学更多>>
发文基金：浙江省自然科学基金中国博士后科学基金浙江省医药卫生科学研究基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 6篇中文期刊文章

领域

  • 6篇医药卫生

主题

  • 6篇膀胱
  • 6篇膀胱癌
  • 5篇细胞
  • 4篇顺铂
  • 4篇肿瘤
  • 4篇基因
  • 3篇凋亡
  • 3篇膀胱肿瘤
  • 2篇顺铂敏感性
  • 2篇人膀胱癌
  • 2篇细胞凋亡
  • 2篇敏感性
  • 2篇耐药
  • 2篇基因过表达
  • 2篇过表达
  • 2篇T24
  • 2篇CDDP
  • 2篇LRIG1基...
  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白类

机构

  • 6篇宁波大学
  • 3篇上海市第一人...
  • 1篇上海交通大学

作者

  • 6篇程跃
  • 6篇谢国海
  • 6篇蒋军辉
  • 6篇严泽军
  • 5篇蒋照辉
  • 5篇钱君海
  • 5篇周成
  • 4篇夏术阶
  • 1篇陆琴琴
  • 1篇马建伟
  • 1篇杨树伟
  • 1篇郭传敏

传媒

  • 2篇中华实验外科...
  • 2篇中国医师杂志
  • 1篇中华泌尿外科...
  • 1篇现代泌尿生殖...

年份

  • 5篇2015
  • 1篇2013
共 6 条 记 录，以下是 1-6
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排序方式：
重组人程序化细胞死亡5蛋白对顺铂诱导膀胱癌细胞凋亡的影响被引量：4
2015年
目的 观察重组人程序化细胞死亡5（rhPDCD5）蛋白对顺铂（DDP）诱导人膀胱癌BIU87细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法 采用细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测不同浓度的rhPDCD5蛋白和/或DDP对膀胱癌BIU87细胞抑制率的影响;Hoechst 33342染色观察细胞的形态变化;流式细胞术（FCW）检测细胞凋亡率;采用Western blot法检测细胞中含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3（Caspase-3）和B细胞淋巴瘤/白血病-2（bcl-2）蛋白的表达.结果 CCK-8检测结果显示,rhPDCD5蛋白与DDP能有效抑制BIU87细胞的增殖.Hoechst 33342染色检测显示,rhPDCD5＋DDP联合用药组阳性细胞百分比为（31.62±2.33）％,显著高于单用rhPDCD5蛋白组的（9.61±0.42）％和单用DDP组的（14.12±0.24）％,差异有统计学意义（F=221.42,P＜0.01）.FCM检测结果显示,rhPDCD5＋ DDP联合用药组凋亡率为（58.74±3.48）％,与rhPDCD5组的（18.84±1.23）％和DDP组的（21.25±2.27）％比较,细胞凋亡率明显提高（F=228.93,P＜0.01）.Western blot结果显示,联合用药组较单用药组细胞凋亡相关蛋白Caspase-3表达明显增强（F=12.60,P＜0.01）,bcl-2表达显著减少（F=12.20,P＜0.01）.结论 rhPDCD5蛋白可直接作用于BIU87细胞使细胞凋亡,并对DDP诱导的BIU87细胞凋亡有明显促进作用.
严泽军夏术阶蒋军辉谢国海钱君海蒋照辉周成程跃
关键词：顺铂膀胱肿瘤细胞凋亡
富含亮氨酸重复和免疫球蛋白样结构域1基因过表达对人膀胱癌顺铂耐药细胞株T24/CDDP耐药性的影响
2015年
肿瘤细胞在化疗过程中产生的获得性耐药抵抗与顺铂（CDDP）能激活表皮生长因子受体（EGFR）通路有关[1].富含亮氨酸重复和免疫球蛋白样结构域1（LRIG1）基因能负性调节EGFR信号通路而发挥抑癌作用[2].我们将LRIG1基因转染入膀胱癌顺铂耐药细胞株T24/CDDP中使其过表达,观察其对耐药细胞顺铂敏感性的影响,探讨其作用机制.
蒋军辉严泽军谢国海钱君海蒋照辉周成夏术阶程跃
关键词：顺铂敏感性基因过表达人膀胱癌耐药性
富含亮氨酸重复和免疫球蛋白样结构域1基因过表达增强膀胱癌T24细胞对顺铂敏感性的实验研究被引量：1
2015年
目的 探讨富含亮氨酸重复和免疫球蛋白样结构域1 （leucine-rich repeats and immunoglobulin-like domains-1,LRIG1）基因过表达对膀胱癌T24细胞顺铂（cis-diaminodichloroplatinum,CDDP）敏感性的影响及其机制.方法 2012年12月至2014年2月选取膀胱癌T24细胞株,将建立并鉴定的过表达LRIG1基因的T24细胞分为3组：实验组,转染Ad-Surp-LRIGl;对照组,转染Adeno-SP-EGFP;空白组,未转染.将3组细胞分别加入CDDP,构建为CDDP/Ad-Surp-LRIG1组、CDDP/Adeno-SP-EGFP组、CDDP组,与未加入CDDP的空白组共4组进行诱导凋亡实验.采用RT-PCR和蛋白质印迹法检测转染前后T24细胞中LRIG1和表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）的表达水平.蛋白质印迹法检测CDDP对T24细胞的总EGFR和核磷酸化EGFR表达的影响.采用CCK-8法检测各组细胞对CDDP的敏感性.流式细胞学检测各组细胞的凋亡率.结果 实验组、对照组和空白组的LRIG1 mRNA和EGFR mRNA的表达量分别为2.79±0.15和0.65±0.05、0.76±0.09和1.98±0.07、0.66±0.05和2.05±0.04,LRIG1蛋白和EGFR蛋白分别为1.98±0.12和0.92±0.05、0.88 ±0.07和2.51 ±0.07、1.00 ±0.08和2.42±0.09,实验组与对照组和空白组比较差异均有统计学意义（P＜0.05）,对照组与空白组比较差异无统计学意义（P＞0.05）.CDDP组、CDDP/Adeno-SP-EGFP组和CDDP/Ad-Surp-LRIGl组的半数抑制浓度IC50值分别为（30.96±0.57）、（31.55 ±0.48）和（14.09±0.31） μg/ml,CDDP组与CDDP/Adeno-SP-EGFP组和CDDP/Ad-Surp-LRIGl组比较差异均有统计学意义（P＜0.05）,CDDP/Adeno-SP-EGFP组和CDDP/Ad-Surp-LRIGl组比较差异无统计学意义（P＞0.05）.CDDP/Ad-Surp-LRIGl组的细胞凋亡率[（69.77±2.14）％]高于CDDP/Adeno-SP-EGFP组[（48.15±1.53）％]、CDDP组[（46.82±1.23）％]、空白组[（3.17±0.21）％],差异均有统计学意义（P＜0.05）,CDDP组和CDDP/Adeno-SP-EGFP组比较差异无统计学意义（P＞0.05）.空白组、CDDP组、CDDP/Adeno-SP-EGFP
严泽军夏术阶蒋军辉谢国海钱君海蒋照辉周成程跃
关键词：顺铂膀胱肿瘤细胞凋亡
Survivin启动子驱动LRIG1基因表达的重组腺病毒对人膀胱癌细胞T24侵袭能力的影响被引量：1
2013年
目的以Survivin启动子驱动LRIG1基因表达的重组腺病毒Ad-Surp-LRIG1转染人膀胱癌细胞系T24细胞,观察其对T24细胞侵袭能力的影响。方法 Ad-Surp-LRIG1转染T24细胞,用RT-PCR和Westernblot检测细胞中LRIG1的表达水平,并采用Transwell小室测定转染后细胞侵袭能力的变化。结果 Ad-Surp-LRIG1转染人膀胱癌T24细胞后,与对照组和空白对照组相比,体外侵袭实验显示实验组细胞的侵袭能力明显下降。LRIG1的mRNA和蛋白表达水平明显升高,而EGFR的mRNA和蛋白表达水平则显著降低(P<0.01)。结论 Survivin启动子驱动LRIG1基因表达的重组腺病毒Ad-Surp-LRIG1能够在T24细胞中有效表达,并显著抑制T24细胞的侵袭能力。
蒋军辉严泽军程跃蒋照辉谢国海
关键词：LRIG1基因肿瘤侵袭腺病毒载体
人膀胱癌顺铂耐药细胞株T24／CDDP的建立和鉴定及耐药机制研究被引量：1
2015年
目的 建立人膀胱癌顺铂（CDDP）耐药细胞株T24/CDDP,鉴定其生物学特性,并探讨其对CDDP耐药的机制.方法 采用CDDP浓度逐步递增联合大剂量CDDP冲击方法,在体外连续诱导、培养膀胱癌细胞株124细胞,建立对CDDP耐药的细胞株T24/CDDP.CCK-8法测定T24/CD-DP细胞对CDDP的耐药指数;绘制细胞生长曲线,计算细胞群体倍增时间;流式细胞术检测T24细胞和124/CDDP细胞的细胞周期比例;Western blot测定细胞中蛋白激酶Cα（PKCα）和P-糖蛋白（P-gp）蛋白的表达.结果 124细胞在体外采用CDDP浓度逐步递增联合大剂量CDDP冲击方法连续诱导、培养,历时11个月,成功建立了对CDDP耐药的细胞株T24/CDDP,其耐药指数为4.17.T24细胞和T24/CDDP细胞的群体倍增时间分别为（33.61±0.41）h和（39.94 ±0.63）h,两者比较差异有统计学意义（t=14.59,P=0.00）.与124细胞相比,T24/CDDP细胞的S期细胞比例减少[（30.63±2.74）％ vs （35.38±3.31）％],但差异无统计学意义（P＞0.05）.G0/G1期细胞比例增加[（60.42±3.25）％ vs （47.25±4.17）％],G2/M期细胞比例减少[（8.95±2.81）％ vs （17.37±3.46）％],差异均有统计学意义（t=4.31,P=0.006;t=3.27,P=0.015）.T24细胞和124/CD-DP细胞中均有PKCα和P-gp蛋白的表达.与T24细胞相比较,124/CDDP细胞中PKCα和P-gp蛋白表达水平均显著升高[（3.12±0.11）vs （1.37±0.06）,t=24.19,P=0.00;（1.98±0.08） vs（0.47±0.03）,t=30.61,P=0.00].结论 T24/CDDP细胞具有耐药表型及耐药细胞的生物学特性,其耐药机制可能与细胞中PKCα和P-gp蛋白的过度表达有关.
周成蒋军辉谢国海钱君海程跃陆琴琴夏术阶严泽军
LRIG1基因表达下调对膀胱癌T24细胞增殖和凋亡的影响
2015年
目的 探讨富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1（LRIG1）基因表达下调后对膀胱癌T24细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制.方法 利用LRIG1 siRNA转染人膀胱癌T24细胞,并应用RT-PCR和Western blot技术检测转染LRIG1 siRNA后膀胱癌T24细胞中LRIG1的表达.利用CCK 8试剂盒和流式细胞术分别检测下调LRIG1基因的表达对T24细胞增殖和凋亡的影响,进一步应用RT-PCR和Western blot检测与增殖和凋亡相关的Bax和Bcl-2基因的表达.结果 转染LRIG1 siRNA后,LRIG1基因在膀胱癌124细胞中的表达明显下调（P＜0.05）.与未处理组和对照组相比,实验组在转染24、48、72、96 h后T24细胞的增殖率均显著高于未处理组和对照组（96h：2.621 ±0.059 vs 2.145 ±0.066,2.201 ±0.064;F=51.049,P=0.000）.转染48 h后,实验组细胞早期凋亡率为（5.713 ±0.761）％,显著低于未处理组和对照组的早期凋亡率[（8.412 ±0.848）％,（8.631 ±0.715）％;F=13.137,P=0.006].此外,LRIG1表达的下调能引起Bax基因表达的降低（P＜0.05）,Bcl-2基因表达的升高（P＜0.05）.结论 LRIG1基因可能在膀胱癌T24细胞的增殖和凋亡中发挥重要作用.
蒋军辉谢国海钱君海蒋照辉马建伟郭传敏杨树伟周成程跃严泽军
关键词：细胞增殖
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