湖北省卫生厅科研基金(2008Z-Y13)
- 作品数：5 被引量：2H指数：1
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- 相关机构：武汉市第一医院武汉市中西医结合医院华中科技大学更多>>
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- 葱白中蛋白质的凝胶电泳分析被引量：2
- 2013年
- 目的分析葱白中提取的蛋白质溶液,为葱白中蛋白质的研究提供依据。方法用Bradford检测法测定蛋白质的浓度;采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离葱白提取液中的蛋白质,并测定其相对分子质量。结果提取物的蛋白质主要分布在相对分子质量(40～55)×103之间,且浓度较高,另外在相对分子质量(35～40)×103和(75～100)×103两个区段之间也有少量蛋白质存在。透析前后样品的蛋白质电泳结果显示,透析能提高蛋白质浓度,而对其组成没有影响。结论葱白中提取蛋白质的方法中透析前后蛋白质成分无明显差异。
- 胡松程璐张耕
- 关键词：葱白蛋白质凝胶电泳
- 生鲜葱白自身酶解条件的研究
- 2011年
- 目的:通过对生鲜葱白自身酶解条件进行初步研究,为进一步研究葱白中的酶活性提供依据。方法:利用丙酮酸与2,4-二硝基苯肼-氢氧化钠系统发生显色反应原理,采用分光光度法测定丙酮酸的生成量来推算酶活力,同时根据丙酮酸的生成量间接反映含硫化合物的生成量,考察不同温度、pH、金属离子、时间以及不同灭活方式对酶解的影响。结果:温度在25～55℃之间酶活性较高,超过65℃后急剧下降;pH在6～8之间时,酶活性受到的影响比较小;Fe^(3+)、Cu^(2+)这两种金属离子对鲜葱白中酶活性有一定抑制作用,而Ca^(2+)、Zn^(2+)对葱白中酶的活性影响不是很大;酶促反应进行迅速,30min内完成;对比三种灭活方式的影响是微波>有机溶剂>高温。结论:葱白中酶有着其最适宜的反应温度、pH以及离子活性中心。
- 程璐刘静幽张耕
- 关键词：酶解分光光度法
- 纤维素酶酶解-溶剂联合提取葱白中甾体化合物
- 2014年
- 目的研究酶解-溶剂联合提取葱白中甾体化合物的最佳工艺条件。方法以测定甾体化合物量为考察指标,通过单因素实验及正交实验确定最佳提取工艺。结果酶解-溶剂联合提取含硫化合物的最佳工艺条件:酶解pH为5.0,酶解浓度为0.5 mg·mL-1,酶解温度为50℃,酶解时间为2 h,影响葱白甾体化合物提取的各因素主次顺序是:酶解pH>酶解时间>酶浓度>酶解温度。结论采用酶解-溶剂联合提取葱白中的甾体化合物,工艺简单,能提高提取效率,减少能耗。
- 程璐张耕
- 关键词：葱白甾体化合物纤维素酶酶解
- 葱白中粗酶的性质考察
- 2013年
- 目的:对葱白中粗酶的性质进行研究。方法:采用丙酮酸法测定葱白中粗酶的活力,考察不同温度、pH值和金属离子以及不同灭活方式等条件对粗酶活力的影响。结果:葱白中粗酶酶促反应在4 min内基本完成,反应最适温度为35℃;最适pH值为6.2;Ca2+对粗酶有较强的激活作用,而Fe3+,Cu2+和Zn2+则对粗酶的活力表现出明显的抑制作用;葱白中粗酶溶液经过微波处理和高温处理以及直接用甲醇溶解处理后,基本被灭活。结论:葱白中粗酶的活力需要有最适的反应温度、pH值以及离子活性中心,且与大蒜中蒜氨酸酶的性质存在差异。
- 胡松张耕程璐
- 关键词：葱白蒜氨酸酶酶活力
- 生鲜葱白中粗酶的提取研究
- 2011年
- 目的:研究从生鲜葱白中提取粗酶的方法,为下一步分离纯化和临床应用提供依据。方法:采用葱白中提取的混合底物,用丙酮酸法测定葱白中酶的活力,采用磷酸盐缓冲液提取粗酶,以小牛血清白蛋白为标准,用考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质的浓度。结果:pH6.5的Na-K磷酸盐缓冲液+10%甘油+0.2%EDTA,预冷12 h,临用前加5’-磷酸吡哆醛为浸提液所提取粗酶的相对比活度较高,故定该组分为葱白中粗酶提取的浸提液;PEG用量为15%时上清中酶活急剧减小,随后趋于平缓趋势,该浓度下的上清液中的酶的比活度相对最小,故选择该浓度为沉淀蛋白时PEG8000的浓度;随着透析时间的延长,蛋白质溶液中蛋白质含量及酶活性均在下降,透析6 h和24 h的蛋白质溶液中酶活性和蛋白质含量均相差不大,可以说明当透析6 h后,透析基本已经达到平衡。结论:该方法操作简便可以用于生鲜葱白中粗酶的提取。
- 张耕程璐刘静幽
