天津市应用基础与前沿技术研究计划(08JC2DJC23900)
- 作品数：7 被引量：7H指数：2
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- 相关机构：天津医科大学总医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- “碘泵基因”转染胶质瘤细胞后摄碘能力的研究
- 2008年
- 目的:证明转染人类钠碘转运体(hNIS)基因入胶质瘤后,胶质瘤细胞可以摄取放射性碘。方法:使用脂质体转染法利用重组质粒将hNIS基因转染入人胶质瘤细胞系U251中,使胶质瘤细胞获得hNIS基因;经过新霉素抗生素筛选获得稳定表达hNIS的细胞系,然后进行体外摄125I实验及过氯酸盐抑制实验;体外125I反流实验,体外125I内流实验,并绘制时间-每分钟放射性计数曲线。结果:在使用质粒转染hNIS基因到U251细胞中后,成功地获得稳定表达hNIS基因的细胞系hNIS-U251。hNIS-U251细胞系可以摄取碘,而且这种摄碘的功能是由hNIS基因所介导的,转染后的细胞摄碘能力可以提高117倍左右。结论:在细胞系hNIS-U251中,放射性碘元素可以被胶质瘤细胞大量摄取。
- 李玮谭建董峰
- 关键词：胶质瘤转染基因治疗
- ^(131)I治疗Graves’病后近期甲状腺重量缩小率的相关因素分析
- 2008年
- 目的:针对影响放射性核素碘(131I)治疗Graves’病(GD)后近期甲状腺重量缩小率的相关影响因素进行综合性分析。方法:收集1 225例首次接受131I治疗的GD患者一般临床资料、相关的实验室检查资料以及甲状腺B超检查等资料,采用单因素方差分析、相关分析、多元线性回归等分析方法对其进行统计学分析。结果:(1)单因素方差分析结果显示:患者病情(F=9.665,P<0.001)、治疗前甲状腺重量(F=2.43,P=0.002<0.05)、服用131I剂量(F=1.66,P=0.042<0.05)等因素与治疗后近期甲状腺重量缩小程度有关。(2)计量资料的直线相关分析显示:治疗前甲状腺重量、有效半衰期、服用131I剂量等因素与治疗后近期甲状腺重量缩小率之间存在相关关系。(3)计量资料的多元线性回归分析显示:在131I治疗GD后近期甲状腺重量缩小率的相关影响因素中,治疗前甲状腺重量和有效半衰期是131I治疗后近期甲状腺重量缩小率的影响因素。结论:131I治疗GD后近期甲状腺重量缩小率受到多种因素的影响,在治疗前根据患者甲状腺重量和有效半衰期可以初步预测其治疗后甲状腺近期重量缩小程度。
- 龙雷贾春霞谭建
- 关键词：甲状腺功能亢进症有效半衰期
- hTPO和hNIS共转染胶质瘤细胞U251介导放射性碘摄取的研究被引量：1
- 2010年
- 目的 将人甲状腺过氧化物酶（hTPO）基因及人钠/碘同向转运体（hNIS）基因共转入胶质瘤细胞系U251后,研究其摄碘能力的变化.方法 克隆、重组、包装并扩增纯化得到重组腺病毒（AdTPO）,测定病毒滴度,Western-Blotting检测重组腺病毒的表达.使用脂质体转染法将hNIS基因转染入人胶质瘤细胞系U251中,经过G418硫酸盐筛选获得稳定表达hNIS的细胞系（hNIS-U251）,为hNIS-U251组;使用重组腺病毒将hTPO基因转导入hNIS-U251中,使胶质瘤细胞获得hTPO基因（AdTPO-hNIS-U251）,为AdTPO-hNIS-U251组;未转入hTPO和hNIS的细胞为对照组（U251）.然后进行3组稳定表达细胞系体外摄125I实验及体外125I外流实验.3组间两两比较用q检验（Newman-Keuls法）.结果 AdTPO-hNIS-U251细胞、hNIS-U251细胞和U251细胞所摄取125I分别为（74 647.53±3605.88）、（55 769.96±4353.26）和（507.67±57.69）计数/min,3组间差异有统计学意义（F=836.17,P＜0.01）.AdTPO-hNIS-U251组较对照组（U251）摄125I能力增高约147倍（q=55.64,P＜0.01）,hNIS-U251组较对照组（U251）摄碘能力增高约110倍（q=41.47,P＜0.01）.AdTPO-hNIS-U251组较hNIS-U251组高约1.3倍（q=14.17,P＜0.01）.在体外125I外流实验中证实AdTPO-hNIS-U251组125I外流减慢,其有效半衰期延长至13 min.结论 将hTPO和hNIS基因共转染至胶质瘤细胞系U251后,能有效提高U251的摄碘能力.
- 吴蓓谭建龙雷李玮
- 关键词：转染碘化物过氧化物酶碘放射性同位素
- 裸鼠模型的人钠/碘转运体基因转染人大细胞肺癌介导放射性核素显像被引量：3
- 2009年
- 目的在动物体内实验观察人钠/碘转运体(hNIS)基因转染人大细胞肺癌介导放射性核素显像是否可行。方法①利用重组质粒以脂质体转染法将hNIS基因转染入人大细胞肺癌H460细胞系中,获得稳定表达hNIS的细胞株(hNIS-H460)。②用hNIS-H460细胞株建立大细胞肺癌荷瘤裸鼠模型,进行放射性核素99mTcO4-显像和131I显像。结果①体外实验表明hNIS-H460细胞株可以摄取碘。②裸鼠大细胞肺癌(hNIS-H460)移植瘤的99mTcO4-和131I显像结果较清晰。结论转染后的hNIS-H460细胞具有一定的摄碘能力。裸鼠大细胞肺癌(hNIS-H460)移植瘤可以进行99mTcO4-和131I显像;99mTcO4-显像的质量优于131I显像。
- 郑薇谭建李玮李宁许静
- 关键词：转染放射性核素
- hTPO和hNIS共转染肺癌细胞系H460介导放射性碘摄取的研究被引量：1
- 2010年
- 背景与目的肺癌严重危害人类生命和健康,目前国内外肺癌的发病率和死亡率仍在不断上升。尤其是非小细胞肺癌(non-small cell lungcacer,NSCLC)治疗效果多年来一直没有显著提高。本研究旨在将人甲状腺过氧化物酶(hTPO)基因及人钠碘转运体(hNIS)基因共转入肺癌细胞系后研究其摄碘能力的变化。方法克隆,重组,包装并扩增纯化得到重组腺病毒(AdTPO),测定病毒滴度,Western blot检测重组腺病毒的表达。使用脂质体转染法将hNIS基因转染入人肺癌细胞系H460中,经G418抗生素筛选获得稳定表达hNIS的细胞系hNIS-H460,为hNIS-H460组;使用重组腺病毒将hTPO基因转导入hNIS-H460中,使肺癌细胞系获得hTPO基因,为AdTPO-hNIS-H460组;未转入hTPO和hNIS的细胞为对照组(H460)。然后进行三组稳定表达细胞系的体外摄125I实验。三组间两两比较用q检验(Newman-Keuls法)。结果AdTPO-hNIS-H460细胞、hNIS-H460细胞和H460细胞所摄取125I分别为(59637.67±1281.13)、(48622.17±2242.28.)和(1440.17±372.86)计数·min-1。三组间总体具有统计学差异(P<0.01)。AdTPO-hNIS-H460组较对照组(H460)摄125I能力增高约41倍(P<0.01),hNIS-H460组较对照组(H460)摄碘能力增高约34倍(P<0.01)。AdTPO-hNIS-H460组较hNIS-H460组高约1.2倍(P<0.01)。结论将hTPO和hNIS基因共转染至肺癌细胞系H460后,可有效提高H460的摄碘能力。
- 李玮谭建龙雷
- 关键词：甲状腺过氧化物酶放射性核素治疗
- 特异性hTERT启动子在肿瘤细胞中的启动效率研究
- 目的在成熟分化的人类组织细胞中hTERT基因的表达处于关闭状态,在肿瘤细胞中该基因在转录水平上被激活,同时瞬时转染实验证明hTERT基因在肿瘤细胞中能被明显激活。所以通过hTERT基因的启动子可以特异性的引导肿瘤治疗基因...
- 李玮谭建吴蓓李宁
- 文献传递
- 特异性hTERT启动子在肿瘤细胞中启动效率研究被引量：2
- 2010年
- 目的证明人端粒酶亚单位(hTERT)启动子可以引导目的基因在肿瘤细胞中表达。方法先使用RT-PCR检测各细胞系中hTERT mRNA的表达,再使用PCR方法扩增hTERT启动子基因的不同长度片段,并构建重组质粒,使用BglⅡ和HindⅢ双酶切鉴定重组质粒并测序。最后使用Dual-Glo Luciferase Assay System激发荧光检测各细胞系中重组质粒中hTERT启动子的启动效率。结果 pGL3-204、pGL3-378、pGL3-1375重组质粒中的hTERT启动子序列与预期一致,质粒构建成功。hTERT启动子引导荧光基因的重组质粒在H460中启动效率最强可以达到SV40启动子的80%,而在FRO、U251中启动效率可以达到SV40启动子的30%左右。hTERT全长启动子序列的启动效率在ARO细胞系中比pGL3-204、pGL3-378中的启动子片段启动效率强,而在FRO、H460和U251细胞系中pGL3-204中的启动子片段启动效率最强。结论 hTERT启动子引导荧光基因的重组质粒,可以实现只在肿瘤细胞系中表达,但在正常细胞中不表达的效果。
- 李玮谭建吴蓓李宁
- 关键词：肿瘤重组质粒
- hTPO和hNIS共转染提高人胶质瘤、肺癌及甲状腺癌细胞摄放射性碘能力
- 2010年
- 目的研究共转染人甲状腺过氧化物酶基因(hTPO)及人钠碘转运体基因(hNIS)后胶质瘤、肺癌及甲状腺癌细胞的摄碘能力变化。方法克隆、重组、包装并扩增纯化得到重组腺病毒(AdTPO),测定病毒滴度。使用脂质体转染法将hNIS基因转染入人胶质瘤、肺癌及甲状腺癌细胞系中,经过G418抗生素筛选获得稳定表达hNIS的细胞系,只转染hNIS基因的细胞系为对照组;应用重组腺病毒将hTPO基因传导入对照组中,共转染hNIS及hTPO基因的细胞系为实验组;未转入hTPO和hNIS基因的原始肿瘤细胞系为空白对照组。然后进行3组细胞系的体外摄125I率及各细胞系的125I外流实验。结果在各肿瘤细胞系中,实验组细胞的摄碘率和有效半衰期较对照组细胞及空白对照组细胞均有所提高,实验组细胞的摄碘率:H460组为59 628±1 281,U251组为7 968±1 261,ARO组为52 971±2 162,FRO组为49 638±1 281,3组间总体具有统计学差异(P<0.01)。结论将hTPO和hNIS基因共转染至肿瘤后能有效提高肿瘤的摄碘能力并延长细胞内碘滞留时间。
- 李玮谭建龙雷
- 关键词：甲状腺过氧化物酶放射性核素治疗
