上海市自然科学基金(09ZR1421000)
- 作品数：6 被引量：10H指数：2
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- 铜绿假单胞菌lasI,rhlI基因功能缺陷株的构建和生物学功能验证
- 2012年
- 构建铜绿假单胞菌lasI,rhlI基因功能缺陷株,为进一步阐明氦氧饱和高气压暴露条件诱导lasI,rhlI基因介导铜绿假单胞菌毒力调节的分子机制研究奠定基础。用双亲株接合转移法删除lasI,rhlI基因ORF编码区,通过RT-PCR方法验证目标基因编码序列mRNA的缺失;通过对细菌生长增殖能力、弹性蛋白酶代谢活性和细菌绿脓菌素分泌能力等表型的测定,验证目标基因编码序列缺失后的基因调节功能的缺陷。结果表明成功构建铜绿假单胞菌lasI,rhlI基因功能缺陷株,可作为进一步研究的基因工程菌。
- 陈双红陈锐勇徐雄利陈海庭肖卫兵
- 关键词：铜绿假单胞菌LASI
- 铜绿假单胞菌群体感应效应系统细菌毒力调节的研究进展被引量：3
- 2016年
- 铜绿假单胞菌分布广,发病率、致死率高,是院内感染的第三大病原。铜绿假单胞菌有超过10%的基因组动态多变,随环境改变展示极强的种群遗传进化功能,以使其适应不同生长环境。其中,群体感应效应（quorum-sensing,QS）系统是其种内及种间相互交流、并完成生物学特性适应性表达的关键基因族群。
- 陈双红陈锐勇徐雄利肖卫兵
- 关键词：铜绿假单胞菌群体感应系统适应性
- 潜水人群铜绿假单胞菌基因多位点序列遗传分型被引量：2
- 2012年
- 目的研究海军潜水人群铜绿假单胞菌分离株的遗传基因型,明确海军潜水人群铜绿假单胞菌携带株的流行特征。方法用多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)技术、以铜绿假单胞菌7个管家基因acsA、aroE、guaA、mutL、nuoD、ppsA和trpE内部特定核酸片段作检测靶,对随机抽样海军潜水员携带的64株铜绿假单胞菌进行目的基因扩增和测序,应用Pseudomonas aeruginosa MLST数据库对测序结果进行分析,以获得检测靶基因的多位点序列信息;应用Bionumerics 4.0的LIAN,SplitsTree和eBURST分析程序对获得的MLST进行进一步的生物信息学分析,以获得流行株的遗传特征。结果 64株铜绿假单胞菌中53株可分为19个ST型,11株未能分型;其中ST274和ST260是优势克隆株,分别占18.75%(12/64)、15.62%(10/64)。结论海军潜水人群携带的铜绿假单胞菌具有遗传多样性和优势基因型,MLST分型对于研究海军潜水人群携带的铜绿假单胞菌遗传差异与流行特征具有重要意义。
- 陈双红陈锐勇陈海庭徐雄利李慈
- 关键词：铜绿假单胞菌多位点序列分型基因型
- 氦氧饱和高气压暴露对铜绿假单胞菌毒力表型的诱导调节被引量：1
- 2011年
- 研究氦氧饱和高气压暴露对铜绿假单胞菌与急性侵袭感染相关的主要毒力因子表型的影响。分别检测暴露前后铜绿假单胞菌的生长速度、运动能力,对乙酰胺的分解能力和培养细胞外液中绿脓菌素、弹性蛋白酶的分泌水平和活性。在动物水平验证毒力的变化。结果显示,经4.5 MPa氦氧饱和加压暴露后,与对照组相比铜绿假单胞菌的生长增殖、运动能力和对乙酰胺的分解能力增强,绿脓菌素分泌增加,弹性蛋白酶活性增强;暴露后细菌对实验小鼠的毒性增加。因此氦氧饱和高气压环境对铜绿假单胞菌的毒力表型有正调控作用。
- 陈双红陈锐勇肖卫兵徐雄利武文斌巴剑波
- 关键词：铜绿假单胞菌毒力
- 氦氧饱和潜水实验人群铜绿假单胞菌鉴定及毒力研究被引量：5
- 2012年
- 目的调查参与某次氦氧饱和实验的潜水作业人群皮肤粘膜日常携带铜绿假单胞菌及其毒力情况。方法用生化鉴定法对细菌进行分类;稀释平板法分析分离菌株生长特征;分光光度法测定绿脓菌素含量;动物染毒法观察分离菌毒力。结果 27名潜水员中有6名被检出携带铜绿假单胞菌,检出率为22.22%,其生长曲线与对照组铜绿假单胞菌标准株PAO1的生长曲线差异无统计学意义(P>0.05);被检出的6株铜绿假单胞菌中有4株绿脓菌素试验为阳性;分离菌株均能造成小鼠致死性感染,绿脓菌素测定为阴性的分离菌株致死率低于绿脓菌素测定为阳性的分离菌株(P<0.05)。结论在潜水人群中,铜绿假单胞菌广泛存在,在高气压潜水作业过程中极易发生急性感染,应采取必要防控措施。
- 徐雄利陈双红陈锐勇武文斌巴剑波肖卫兵
- 关键词：绿脓菌素毒力
- 氦氧饱和高气压暴露对铜绿假单胞菌PAO1基因表达的诱导调节被引量：1
- 2011年
- 研究氦氧饱和高气压暴露对铜绿假单胞菌基因表达谱的系统影响,对急性毒力基因表达的调节。用全基因组DNA芯片分析技术比较菌株暴露前后基因表达谱差异;RT-PCR方法验证部分差异表达基因;用分光光度法在细胞水平验证弹性蛋白酶含量;小鼠染毒法观察暴露组细菌毒力在整体动物水平的变化。基因表达谱分析结果表明,铜绿假单胞菌暴露12 h差异表达基因达243个、72 h差异表达基因为1 168个。72 h差异表达基因中与细菌应激响应、蛋白折叠、转录调节、菌毛和鞭毛合成、毒力因子调节与合成、细菌外膜蛋白和抗原合成的基因大量上调;部分基因的RT-PCR验证结果与芯片结果一致;细胞水平验证结果显示暴露72 h细菌毒力表型增强。因此,氦氧饱和高气压暴露对铜绿假单胞菌基因表达谱有明显影响,对急性侵袭性感染毒力因子基因表达水平有正向诱导调节作用。
- 陈双红陈锐勇徐雄利李慈肖卫兵
- 关键词：铜绿假单胞菌基因芯片毒力基因
