广州市科技攻关项目(2004Z2-E0214)
- 作品数：8 被引量：36H指数：3
- 相关作者：赵卫曹虹贡树基张文炳周浩更多>>
- 相关机构：南方医科大学广州市疾病预防控制中心广州市第八人民医院更多>>
- 发文基金：广州市科技攻关项目广东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 登革2型病毒全长基因组的长链RT-PCR法扩增被引量：6
- 2006年
- 目的采用长链RT-PCR技术扩增登革2型病毒新几内亚株(NGC)全长基因组。方法根据登革2型病毒NGC株基因组全序列设计引物,在上游引物中加入Sp6 RNA聚合酶启动子核心序列,下游引物中加入ClaⅠ内切酶位点。从病毒感染的乳鼠脑中提取RNA,采用长链RT-PCR技术进行扩增。以获得的PCR产物为模板分别扩增3个NGC株特异的基因片段。结果长链RT-PCR法扩增出约11 kb基因片段,经PCR法证实为登革2型病毒NGC株特异序列。结论通过长链RT-PCR技术,获得了登革2型病毒NGC株全长基因组,为进一步构建感染性克隆打下基础。
- 贡树基赵卫曹虹张文炳周浩陈丽丹
- 关键词：登革2型病毒全长CDNA
- 人微小病毒B19感染的研究进展被引量：20
- 2007年
- 近年来人微小病毒B19(human parvovirus B19)作为人类疾病的重要病原已愈来愈广泛受到重视。大量研究成果不但揭示了B19病毒的致病机理,Th-1介导的细胞免疫应答,而且发展了B19感染的诊断和B19污染血制品的筛查技术,并且为疫苗的研制奠定了基础。这里对人类B19病毒的病原学特征、致病机理、临床症状及实验室诊断方法和技术进行了较全面的综述。
- 曹虹贡树基赵卫仲华张文炳
- 关键词：人微小病毒B19致病
- 登革病毒2型全长cDNA感染性转录体的构建和鉴定被引量：1
- 2009年
- 为构建登革病毒感染性克隆,针对登革病毒2型基因组全长cDNA的体外转录方法及感染性转录体进行研究。采用长链RT-PCR技术,扩增DEN2NGC株全长基因组cDNA,以之为模板,用SP6RNA聚合酶系统制备体外转录RNA转录体,分别经乳鼠脑内接种及电穿孔转染BHK-21细胞,观察其感染效应。并从受染鼠脑和病变细胞中提取总RNA,进行RT-PCR扩增、克隆测序以及电镜观察。结果发现,从感染鼠脑和细胞中经RT-PCR均可扩增出病毒特异的基因片段,大小与预期一致;并从乳鼠脑组织和BHK-21细胞中观察到恢复病毒颗粒。上述结果表明本文成功构建的DEN2 NGC株病毒全长cDNA的体外转录体具有感染性,乳鼠脑内接种途径与电穿孔转染细胞一样可成为体外转录体感染宿主细胞、获得恢复病毒的方法。
- 贡树基赵卫张文炳周浩陈丽丹张复春严子锵曹虹
- 关键词：登革2型病毒全长CDNA
- 登革病毒E蛋白区基因组特征和血清学分型相关性分析
- 2008年
- [目的]比较4种血清型登革病毒E蛋白型特异性抗原表位所在区域对应的基因序列差异,以期发现登革病毒的基因组特征和血清学分型之间的相关性,建立一种新的基因分型方法。[方法]利用DNAstar数据包中的Edit-seq将E蛋白中的型特异性抗原表位所对应的基因从登革病毒的全基因组中截取出来,再用ClustalX软件进行多序列比对,找出型内保守型间变异的基因,探索一种新的基因分型方法。[结果]E蛋白型特异性抗原表位276-281位氨基酸和E基因1387位碱基高度保守,型内完全相同,型间不同。[结论]E蛋白型特异性抗原表位276-281位氨基酸和E基因1387位碱基可以作为登革病毒分型的依据。
- 张玲赵卫朱利龙北国贡树基叶惠媚陈创彬
- 关键词：登革病毒基因分型血清学分型
- 登革病毒感染实验室诊断的研究进展被引量：6
- 2005年
- 贡树基赵卫曹虹
- 关键词：登革病毒感染SYNDROME登革休克综合征FEVER登革出血热公共卫生问题
- 登革病毒E蛋白结构与功能的研究进展被引量：1
- 2007年
- 仲华曹虹赵卫
- 关键词：登革病毒单股正链RNA病毒登革休克综合征蚊媒传染病登革出血热
- 登革病毒基因组研究进展被引量：2
- 2007年
- 登革病毒基因组研究的进展有利于相关疫苗研制及针对性药物设计。本文就登革病毒基因组特征、功能、抗原表位及登革病毒感染后宿主体内产生的化学增活素作用等方面的研究进展加以综述。
- 张玲赵卫朱利龙北国
- 关键词：抗原表位
- 登革2型病毒NGC株基因组亚克隆的构建及其鉴定被引量：1
- 2006年
- 目的构建登革2型病毒NGC株基因组全序列的亚cDNA克隆,为进一步构建全长感染性cDNA克隆奠定基础。方法根据登革2型病毒NGC株基因组全序列中的酶切位点设计2对引物,从病毒感染的乳鼠脑中提取RNA,采用长链RT-PCR技术扩增出覆盖病毒基因组全长的2个cDNA片段,并克隆至pCR-XL-TOPO载体后测序。结果经酶切鉴定和序列测定表明,获得的cDNA克隆为登革2型病毒NGC株特异的。结论已成功构建出登革2型病毒NGC株基因组的2个cDNA亚克隆。
- 贡树基曹虹赵卫张文炳周浩陈丽丹
- 关键词：登革2型病毒RT-PCRCDNA克隆
