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自噬在椎间盘退变中的作用研究进展被引量：1: 2016年; 椎间盘退变(intervertebral disc degeneration,IDD)是脊柱退行性疾病发生的始动因素,也被认为是导致下腰痛发生的重要原因。目前认为椎间盘细胞的凋亡与衰老下调了细胞的功能,是椎间盘退变的重要致病因素。自噬(autophagy)是哺乳动物细胞的一种宿主防御机制,不仅与细胞的代谢、增殖、凋亡紧密相关,更参与多种退行性疾病的病理过程。近年来细胞自噬在椎间盘退变中的研究逐渐成为热点,本文就自噬在椎间盘退变中的发生、诱导因素、作用及机制综述如下。; 陈德横周凯亮徐华梓; 关键词：椎间盘退变细胞自噬

细胞自噬在糖尿病大鼠椎间盘退变中的作用被引量：16: 2013年; 目的:探讨凋亡和自噬水平在糖尿病大鼠椎间盘髓核组织中的变化及其作用。方法:SD大鼠注射链脲佐菌素(STZ)复制糖尿病模型16周后,完整获取大鼠腰椎间盘,经石蜡包埋切片、苏木素-伊红(HE)染色和阿里新蓝染色,在组织水平检测椎间盘病理变化。DNA原位末端标记法(TUNEL)检测髓核细胞凋亡率,免疫组织化学及Western blotting方法检测髓核组织凋亡和自噬水平。结果:HE和阿里新蓝染色显示糖尿病大鼠椎间盘发生退变。和正常组相比,caspase-3阳性细胞比例在糖尿病大鼠椎间盘中明显增加。TUNEL结果显示糖尿病大鼠椎间盘髓核细胞凋亡率升高。Western blotting和免疫组织化学检测发现自噬指标LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和beclin-1表达量在糖尿病大鼠组均高于正常组。结论:STZ诱导的糖尿病可加速大鼠椎间盘退变,并且提高了髓核组织中凋亡和自噬水平。; 郑旭浩张小磊江立波胡旭琪金永龙郑亦静吴畏徐华梓; 关键词：椎间盘退变糖尿病自噬细胞凋亡

脂肪干细胞与纤维环细胞共培养后的类纤维环分化效应研究: 2013年; 干细胞移植是治疗椎间盘退变的新方向,而对纤维环的修复是治疗椎间盘退变的前提。该研究利用Transwell共培养系统在常氧(20%)及低氧(2%)条件下探讨共培养诱导后SD大鼠脂肪干细胞向类纤维环细胞的分化能力。1,9-Dimethylmethylene blue(DMMB)检测表明,低氧组脂肪干细胞诱导7,14,21 d后及常氧组脂肪干细胞诱导14 d及21 d后与对照组脂肪干细胞相比分泌氨基聚糖明显增加(P<0.05),且共培养14 d及21 d后低氧组脂肪干细胞较常氧组脂肪干细胞分泌氨基聚糖含量明显增多(P<0.05)。qRT-PCR检测结果表明,与对照组相比,共培养14 d及21 d后常氧组及低氧组ADSCs COL I、COL II及Aggrecan mRNA表达均明显增强(P<0.05),且低氧组ADSCs表达量高于常氧组(P<0.05)。COL I、COL II免疫组化及阿利辛染色也证实了上述结果。由此说明共培养可以诱导脂肪干细胞向类纤维环细胞分化,且低氧(2%)有利于这种分化的发生。; 胡旭琪张小磊郑旭浩吴畏江立波倪晓余洋周一飞徐华梓; 关键词：脂肪干细胞纤维环细胞共培养椎间盘退变

细胞自噬对饥饿环境下椎间盘髓核细胞的保护作用被引量：18: 2012年; 目的:探讨饥饿条件下椎间盘髓核细胞是否发生自噬及自噬对髓核细胞的作用。方法:原代培养SD大鼠髓核细胞,对细胞表型进行鉴定后,将细胞分为正常对照组、3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)加DMEM培养基组、3-MA加EBSS培养基组和EBSS饥饿组,接着用单丹磺酰戊二胺(monodansylcadaverine,MDC)染色、透射电镜和Western blotting观察各组细胞的自噬差异,最后采用CCK-8法测定细胞生长抑制率以及TUNEL法测定细胞凋亡率。结果:成功培养出SD大鼠髓核细胞。与对照组相比,电镜和荧光显微镜下观察到EBSS培养基诱导的髓核细胞出现自噬囊泡,但是3-MA抑制后细胞自噬泡明显减少;Western blotting检测发现LC3-II/LC3-I和Beclin-1/β-actin在EBSS处理组明显大于3-MA+EBSS处理组和对照组(P<0.05),而3-MA+EBSS处理组的细胞抑制率和凋亡率明显高于EBSS处理组(P<0.05)。结论:饥饿可以诱导大鼠椎间盘髓核细胞发生自噬,并且3-MA能抑制自噬发生。自噬对饥饿环境下的髓核细胞可能具有一定的保护作用。; 江立波张小磊徐华梓吴瑞凯杨光永吴畏胡旭琪郑旭浩; 关键词：髓核细胞自噬细胞凋亡饥饿

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浙江省重中之重学科建设项目(2011GK001)