国家自然科学基金(39570314) 作品数:6 被引量:45 H指数:5 相关作者: 谢龙山 陈美芳 钱富荣 陈曙霞 刘晶星 更多>> 相关机构: 上海第二医科大学附属仁济医院 上海第二医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 上海市科学技术委员会资助项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
抗柯注射液对柯萨奇B病毒性心肌炎和扩张型心肌病持续感染干预的实验研究 被引量:13 2003年 目的 :研究柯萨奇B病毒性心肌炎 (VMC)、扩张型心肌病 (DCM )中病毒持续感染与中药干预作用。方法 :①通过急慢性VMC动物模型 ,用定量多聚酶链反应测脾脏白细胞 (WBC)中以及心肌匀浆中的柯萨奇B病毒核糖核酸 (CBV RNA) ,观察其病毒持续状态 ,以明确病毒持续感染与DCM的意义 ;②观察苦参中抗柯萨奇B病毒的有效成分 (SFA)干预价值。结果 :在急性VMC模型中 ,10mg·kg-1·d-1、15mg·kg-1·d-1、2 0mg·kg-1·d-1SFA分别能清除CBV RNA达 6 7.5 8%、77.0 0 %及 92 .88%。在慢性 (2 70d)VMC动物模型脾脏WBC及心肌匀浆中定量检测的结果均证明有持续感染的存在。用 2 0mg·kg-1·d-1SFA治疗后 ,在心肌匀浆中CBV RNA的清除率为 92 .77% ,脾脏中CBV RNA的清除率为 89.0 4 %。结论 :DCM与病毒持续感染有关 ,SFA能清除CBV RNA ,其清除率与剂量有关 ,并见明显减少病变心肌的病理变化。 陈曙霞 谢龙山 刘晶星 马睿 徐欣辉 陈美芳 钱富荣 姚季生关键词:病毒性心肌炎 扩张型心肌病 柯萨奇B病毒 抗病毒药 STUDY OF PERSISTENT VIRAL INFECTION IN AN ANIMAL MODEL OF VIRAL MYOCARDITIS BY PCR 2000年 Objective To study the role of persistent viral infection in the mechanism of viral myocarditis. Methods A mice model of CVB3m viral myocarditis wes made and the viral RNA in mice myocardium and whole bind sample wes tested by using polymerase chain reaction (PCR ) technique. The pathological changes in mice myocardium were determined. Results De day 3, the viral gene in whole bind and myocardium wes found, which portly became negative on day 8, but the change of myocardial anthology borne obvious. Although the bind specimens wers tested negatively on day 12, the viral gene in mice myocardium remained positive within 120d. Conclusion This study indicates that persistent viral infection plays a role in the pathogenesis of viral myocarditis. 马睿实验性柯萨奇B_(3m)病毒性心肌病变及其病原的原位逆转录-聚合酶链反应检测 被引量:9 2001年 目的 建立柯萨奇B3m(CoxB3m)病毒性心肌病变模型 ,用原位PCR方法检测心肌病变中的病原 ,以阐明CoxB3m病毒在发病过程中的作用。方法 (1)用Balb/C小鼠 30只 ,制作CoxB3m病毒性急性心肌病变模型 ,5 0只制作慢性反复感染心肌病变的动物模型 ;并与 2 5只正常Balb/C小鼠相对照 ;(2 )对病毒反复感染所致慢性心肌病变动物模型的左室侧壁厚度及左室腔的面积大小 ,采用KS40 0型图像分析系统进行图像分析 ;(3)应用碱性磷酸酶联接的抗地高辛抗体标记的核苷酸直接掺入法建立原位PCR检测心肌组织中柯萨奇B3m病毒RNA。结果 不论是在急性或反复感染的慢性心肌病变模型心肌组织中 10 0 %可找到CVB RNA阳性信号 ,慢性病变者经图像分析证明左心腔扩大 ,室壁变薄 ,与正常对照组相比P <0 .0 1~ <0 .0 5。结论 在病变心肌组织中 ,用原位PCR检测都有阳性的CVB RNA信号 ,说明柯萨奇B3m病毒不仅能引起急性病变 ,反复感染者亦可造成慢性病变 ,后者心腔常扩大且室壁变薄。 陈曙霞 谢龙山 石迪明 徐欣晖 钱富荣 陈美芳关键词:逆转录聚合酶链反应 柯萨奇病毒B组 柯萨奇B病毒性心肌炎、扩张型心肌病中病毒持续感染及中药干预的研究(实验与临床综合报告) 目的对柯萨奇B病毒性心肌炎,扩张型心肌病中病毒持续感染与中药干预的研究。方法(1)通过急慢性病毒性心肌炎动物模型用定性及定量多聚酶链反应测脾脏白细胞中以及心肌匀浆中的柯萨奇B病毒核糖核酸(CVB-RNA);(2)对急性病... 陈曙霞 谢龙山 马睿 徐欣辉 陈美芳 钱富荣 刘晶星 姚季生关键词:病毒性心肌炎 扩张型心肌病 原位PCR 药物干预 文献传递 柯萨奇病毒BRNA与中和抗体检测在病毒性心肌炎诊断中的意义 被引量:5 2003年 目的 探讨多重聚合酶链反应 (PCR)及微量中和抗体法诊断病毒性心肌炎 (MC)的价值。方法 用微量法和逆转录PCR法 ,检测 10 0 0例诊断为急 /慢性期MC患者和 37名正常人中的柯萨奇B病毒核糖核酸 (CVB RNA)与中和抗体水平 ,并进行比较性研究。结果 正常人CVB RNA及中和抗体均为阴性。在 10 0 0例MC患者中 ,CVB RNA阳性 346例 ( 34 6 %) ,其中急性期 2 45例占70 8%,慢性期 10 1例仅占 2 9 2 %。而中和抗体检测阳性及阴性各 5 0 0例 (均为 5 0 %)。在 6 5 4例CVB RNA阴性患者中 ( 6 5 4%) ,中和抗体阳性者 36 9例 ( 5 6 4%) ,其中慢性期 2 5 5例占 6 9 1%。急性期 114例占 30 9%。表明急性期CVB RNA阳性居多 ,慢性期中和抗体阳性居多。结论 在MC的不同阶段 ,CVB RNA和中和抗体的阳性率有所不同 ,同时进行 2项检测可提高诊断率。 陈曙霞 谢龙山 梅尚文 钱富荣 陈美芳关键词:柯萨奇病毒B 中和抗体 微量法 柯萨奇B病毒性心肌炎、扩张型心肌病中病毒持续感染及中药干预的研究 被引量:14 2003年 目的 :研究柯萨奇B病毒性心肌炎、扩张型心肌病中病毒持续感染与中药干预的相关性。方法 :建立急慢性病毒性心肌炎动物模型 ,用定性及定量多聚酶链反应测脾脏白细胞中以及心肌匀浆中的柯萨奇B病毒核糖核酸 (CVB -RNA) ;对急性病毒性心肌炎及扩张型心肌病的临床病例 ,用定性的方法定期检测外周血白细胞中CVB -RNA ,观察其病毒持续状态以及用原位PCR法检测扩张型心肌病心肌活检标本中CVB -RNA ,以明确病毒持续感染与扩张型心肌病的意义 ;观察苦参中抗柯萨奇B病毒的有效成分(SFA)干预的临床价值。结果 :1 8例扩张型心肌病病人有 6例病人的外周血白细胞中CVB -RNA (+) ,占 33 .3 % ,有的已持续 3年以上 ,其中 1 3例用原位PCR检测 ,有 6例心肌细胞中CVB -RNA(+) ,占 46 .2 % ,对慢性 (2 70d)病毒性心肌炎动物模型脾脏白细胞及心肌匀浆中定量检测 ,结果均证明有持续感染的存在 ,用SFA治疗后 ,在心肌匀浆中CVB -RNA的清除率为 92 .77% ,脾脏白细胞中CVB -RNA的清除率为 89.0 4 %。结论 :扩张型心肌病与病毒性心肌炎有相关性 ,扩张型心肌病与病毒持续感染有关 ,SFA能清除CVB -RNA达 89%~ 92 %。 陈曙霞 谢龙山 马睿 徐欣辉 陈美芳 钱富荣 刘晶星 姚季生关键词:柯萨奇B病毒性心肌炎 扩张型心肌病 病毒持续感染 中药干预 中医药疗法 定量RT-PCR法对“苦参”在心肌炎模型中药效学研究 被引量:9 2003年 目的用定量RT-PCR法检测“苦参”中抗柯萨奇B病毒有效成份“抗柯注射液”,在Balb/c小鼠病毒性心肌炎模型病毒血症时,对抗“柯萨奇B病毒”的药效。 方法取48只雄性18-22g 8周龄的Balb/c小鼠,随机分成A-H共8组,每组6只。1.各治疗组(A-F组),每只小鼠从腹腔接种0.1ml l04TCID50 CVB3m病毒2h后,每天从尾静脉分别注射抗柯注射液,5、10、15、20、25、30mg/kg,2次/d,连续用药3d。2.病毒组(G组),注射病毒同上法,2h后从尾静脉注入0.3ml无菌生理盐水,2次/d,连续3d。3.空白对照组(H组),腹腔内注射无小牛血清的RPMI-1640培养液,2h后从尾静脉注入0.3ml无菌生理盐水,2次/d,连续3d。 结果 空白组CVB-RNA(-)对接种CVB3m感染后用不同剂量“抗柯注射液”治疗的各小组血液中CVB3m-RNA含量与病毒组相比明显下降,其抑制率(%)与所用抗柯注射液的剂量呈正比,即“抗柯”剂量增加,CVB3m-RNA含量下降的幅度亦增加,每天5-30mg,/kg中的各剂量都有明显抑制病毒增殖的作用。 结论用定量RT-PCR法检测到“抗柯注射液”对Balb/c小鼠病毒性心肌炎病毒血症时效果明显,最小有效剂量为5mg·kg-1·d-1。 陈曙霞 成威 谢龙山 钱富荣 陈美芳 刘晶星关键词:苦参 柯萨奇B病毒 定量RT-PCR 病毒性心肌炎