国家自然科学基金(30070279)
- 作品数：12 被引量：33H指数：3
- 相关作者：唐明骆红艳胡新武杜以梅刘长金更多>>
- 相关机构：华中科技大学科隆大学首都医科大学宣武医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金福建省自然科学基金更多>>
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- TRPV4 在渗透压对大鼠心肌收缩性影响中的作用(英文)被引量：1
- 2008年
- 本文旨在探讨低渗和高渗内环境对心肌收缩性的影响及机制。取Sprague-Dawley(SD)大鼠左心室乳头状肌,在电刺激引起兴奋的条件下,分别记录在低渗、等渗和高渗灌流液中肌条的收缩力;同样条件下观察在低渗、等渗和高渗灌流液中加入渗透压敏感蛋白瞬时感受器电位离子通道家族香草素受体亚家族IV型(transient receptor potential vanilloid4,TRPV4)的拮抗剂和激动剂后肌条收缩力的变化。结果显示:(1)与等渗(310mOsm/L)时心肌收缩力相比,渗透压为290、270和230mOsm/L时心肌收缩力分别增加11.5%、21.5%、25.0%(P<0.05);渗透压为350、370、390mOsm/L时心肌收缩力分别降低16.0%、23.7%、55.2%(P<0.05)。(2)在低渗液(270mOsm/L)中加入TRPV4拮抗剂钌红(ruthenium red,RR),低渗对心肌收缩力的增强作用被抑制36%(P<0.01);在高渗液(390mOsm/L)中加入RR,高渗对心肌收缩力的抑制作用增加56.1%(P<0.01)。(3)在等渗液中(310mOsm/L)加入TRPV4激动剂4-α-佛波醇-12,13-二癸酸(4-α-phorbol-12,13-didecanoate,4α-PDD),心肌收缩力没有改变;在高渗液中(390mOsm/L)加入4α-PDD,高渗对心肌收缩力的抑制作用增加27.1%(P<0.01)。以上结果提示,TRPV4参与渗透压引起的心肌收缩力变化。
- 李静汪明欢王艻田扬段亚琦骆红艳胡新武Jüergen Hescheler唐明
- 关键词：心肌渗透压TRPV4
- 肾上腺髓质素对豚鼠心室肌细胞L-型钙通道的作用及其信号转导机制被引量：2
- 2004年
- 目的 :研究肾上腺髓质素 (adrenomedullin ,ADM)抑制豚鼠心室肌细胞L -型钙通道的信号转导机制。方法 :应用全细胞膜片钳技术 ,记录应用ADM(1- 10 0nmol·L-1)前后L -型钙电流 (ICa ,L) ,以及分别记录应用ADM特异性受体拮抗剂ADM2 2 -52 (10 0nmol·L-1) +ADM(10 0nmol·L-1)、蛋白激酶A (PKA)特异性拮抗剂H - 89(10μmol·L-1) +ADM(10 0nmol·L-1)、蛋白激酶C (PKC)特异性拮抗剂PKC19-3 6(10 μmol·L-1) +ADM(10 0nmol·L-1)、PKC特异性激动剂PMA(1μmol·L-1)前后ICa ,L。结果 :ADM(1- 10 0nmol·L-1)浓度依赖性地抑制豚鼠心室肌细胞ICa ,L,并可被ADM2 2 -52 (10 0nmol·L-1)完全阻断 ;H - 89(10 μmol·L-1)对ADM抑制ICa,L的作用无影响。PKC19-3 6(10μmol·L-1)可完全阻断ADM对ICa ,L的抑制效应 ,且PMA(1μmol·L-1)可模拟ADM对ICa ,L的抑制效应。结论 :ADM作用于特异性ADM受体可浓度依赖性地抑制豚鼠心室肌细胞ICa,L,此作用有可能与PKC激活相关。
- 柯琴梅杜以梅冯义柏唐明狄久芳
- 关键词：肾上腺髓质素信号转导
- SERCA2a基因转导过表达增强犬心肌细胞收缩功能被引量：1
- 2010年
- 本研究旨在探讨心肌肌浆网Ca2+-ATP酶2a(sarcoplasmic reticulum Ca2+-ATPase2a,SERCA2a)基因过表达对正常犬离体心肌细胞收缩功能的影响。通过胶原酶消化法分离犬心肌细胞,将分离的心肌细胞分为未转染组、空载体组、SERCA2a转染组,转染载体为含绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒载体,转染后均培养48h。利用免疫印迹法检测各组心肌细胞SERCA2a蛋白表达水平,并通过单细胞收缩动态边缘检测系统测定各组心肌细胞收缩功能的改变。结果显示,与未转染组相比,SERCA2a转染组SERCA2a蛋白表达水平明显升高,基础状态心肌收缩百分比和药物刺激条件下心肌最大收缩百分比均明显升高,达到峰值收缩时间(TTP)和50%舒张时间(R50)亦明显延长,差异具有显著性;而空载体组各项指标均无显著变化。以上结果提示,SERCA2a基因转导过表达能够增强正常犬心肌细胞的收缩功能。
- 陈礼斌宫海滨刘颖王振全吕茜
- 关键词：肌浆网CA^2+-ATP酶腺病毒基因
- 小鼠胚胎心肌细胞的分离及电生理特性被引量：1
- 2004年
- 本文旨在探索小鼠胚胎心肌细胞的分离方法并观察其电生理特性。应用胶原酶B 消化法获得不同时期单个小鼠胚胎心肌细胞; 利用全细胞膜片钳技术, 记录胚胎心肌细胞的超极化激活的非选择性内向阳离子电流(If)和L-钙电流( ICa-L), 并用电流钳记录其自发性动作电位。胚胎心肌细胞通过相差显微镜依据其形态和自发性收缩进行鉴定。本法分离所获得的胚胎心肌细胞容易进行全细胞膜片钳记录, 可用于记录If、ICa-L电流和自发性动作电位, 已证实胚胎心肌细胞If 和ICa-L的电生理特性与成年起搏细胞或心肌细胞相似。本实验建立的分离方法简单、稳定、有效、可靠, 最早可获得 8.5 d 的胚胎心肌细胞。胚胎心肌细胞的电生理记录为探索胚胎心肌细胞的电生理特性提供了一个可用的模型, 并可能为某些心脏疾病产生的机制提供实验依据。
- 骆红艳唐明胡新武宋明柯梁华敏杜以梅张毅
- 关键词：胚胎心肌细胞小鼠
- 灵芝提取物通过抑制小胶质细胞激活保护多巴胺能神经元被引量：12
- 2010年
- 近来的研究表明,神经炎症在帕金森病（Parkinson’sdisease,PD）的发病过程中起着重要的作用,因此通过抑制神经炎症而保护黑质多巴胺能神经元可能是一种具有潜力的治疗策略。本研究组前期的临床试验表明,灵芝（Ganoderma lucidum,GL）具有潜在的神经保护作用,可能通过抗炎及免疫调节机制发挥其保护作用。本研究在神经元-小胶质细胞共培养的模型中观察了GL的神经保护作用,并探讨其可能的保护机制。小胶质细胞单独或与MES23.5多巴胺能神经细胞共培养,脂多糖（lipopolysaccharide,LPS,0.25μg/mL）孵育24h作为阳性对照,试验组分别加入GL提取物（50~400μg/mL）和/或MPP＋处理的MES23.5细胞膜碎片（150μg/mL）;检测小胶质细胞激活情况及其产生的有害因子和MES23.5细胞[3H]DA摄取能力。结果显示,LPS或MPP＋损伤的MES23.5膜碎片均可激活小胶质细胞。同时,GL提取物可以显著降低小胶质细胞源性炎症因子和细胞毒性因子（NO、TNF-α、L-1β）的产生,并呈一定的浓度依赖性;并同样可以下调TNF-α和L-1β mRNA水平的表达。此外,GL还可明显对抗由小胶质细胞激活和MPP＋介导的多巴胺能神经细胞[3H]DA摄取抑制。以上结果提示,GL主要通过抑制小胶质细胞激活,减少其神经毒性因子的释放而保护多巴胺能神经细胞。GL可能成为治疗PD的潜在药物。
- 丁晖周明张瑞萍徐胜利
- 关键词：小胶质细胞灵芝神经炎症神经保护
- 激活脊髓MrgC受体抑制大鼠痛觉过敏被引量：3
- 2015年
- 研究旨在探讨激活脊髓MrgC （Mas-related gene C）受体对痛觉过敏的作用及细胞学机制。在大鼠足底皮下注射（Tyr6）-γ2-MSH-6–12 （MSH）或完全弗氏佐剂（complete Freund’s adjuvant, CFA）形成痛觉过敏或炎性痛模型，通过缩足反射和免疫组织化学等方法观察鞘内给予MrgC受体特异性激动剂MSH或牛肾上腺髓质8-22肽（bovine adrenal medulla 8-22, BAM8-22）对痛觉过敏的影响。结果显示，鞘内给予MSH不影响正常大鼠对热伤害性刺激引起的缩足潜伏期变化，但能抑制足底注射MSH引起的急性痛觉敏感反应，还能降低CFA引起的痛觉过敏，鞘内给予μ阿片受体（μ-opioid receptor, MOR）拮抗剂CTAP （D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Arg-Thr-Pen-Thr-NH2）能阻止鞘内给予MSH的延迟抗痛觉过敏作用。鞘内给予BAM8-22能显著降低CFA引起的脊髓背角L3～L5节段一氧化氮合酶（nitric oxide synthase, NOS）阳性神经元数量和降钙素基因相关肽（calcitonin gene-related peptide, CGRP）样免疫活性物质的表达。以上结果提示，鞘内激活MrgC受体通过抑制NOS阳性神经元活性和下调CGRP阳性产物表达来降低痛觉过敏，并能通过间接机制调制MOR起到延时持续抗痛觉过敏作用。因此，MrgC受体激动剂有望成为一类新型抗炎症痛觉过敏的药物。
- 江剑平付艳胡粉娟洪炎国
- 关键词：痛觉过敏
- 不同信号分子参与M胆碱能受体激动剂对不同胚胎发育阶段小鼠心肌细胞起搏电流的调控(英文)被引量：1
- 2005年
- 应用全细胞膜片钳技术,研究了M胆碱能对不同孕期的胚胎小鼠心肌细胞的起搏电流(If)的调节。我们发现,在胚胎发育的早期阶段,M胆碱能受体激动剂(muscarinicagonistcarbachol,CCh)明显抑制If,但在胚胎发育的晚期阶段,CCh对If的抑制作用消失。腺苷酸环化酶(adeinylatecyclase,AC)激动剂毛喉素Forskolin和非选择性磷酸二酯酶(PDE)抑制剂IBMX均可增强发育早期阶段和晚期阶段的If。但有趣的是,尽管Forskolin和IBMX可增加基础If,它们对CCh抑制的If的作用却大不相同。在胚胎发育的早期阶段,Forskolin不能拮抗CCh对If的抑制作用,但IBMX可以。在发育的中期阶段Forskolin可以拮抗CCh的抑制作用,但IBMX不可以。因此,我们推断,CCh可能是通过调控细胞内的CAMP水平来调节If的。但是在胚胎发育的早期阶段和中期阶段,CCh可能通过不同的信号转导通路来实现对胞内cAMP的水平调控。在发育的早期阶段,CCh主要是通过增强PDE的活性,加速cAMP的降解而实现对If的调控。而在发育的中期阶段,CCh则主要通过与AC耦联,抑制其活性,通过减慢cAMP的合成而实现对If的调控。
- 宋元龙唐明刘长金梁华敏高琳琳席姣娅胡新武骆红艳Jürgen HESCHELER
- 关键词：膜片钳起搏电流
- 小鼠胚胎心肌细胞的I_f和I_(Ca-L)电流表达的发育依赖性变化
- 2004年
- 目的 :研究不同时期胚胎心肌细胞超极化激活的电流 (hyperpo larization activatedcurrent,If)和L 型钙电流 (L typecalciumcurrent,ICa L)表达的发育依赖性变化。方法 :运用全细胞膜片钳技术 ,记录不同发育阶段胚胎心肌细胞的If 和ICa L。结果 :If 通道在早期(EDS)、中期 (IDS)、晚期 (LDS)胚胎心室肌细胞上的功能性表达水平分别为 85 .70 %、71.60 %、44 .40 % ;其电流密度分别是 -7.2 4±1.2 8pApF- 1 、-6.48± 0 .99pApF- 1 、-3 .76± 1.0 4pApF- 1 (P均<0 .0 1)。If 通道在中、晚期胚胎心房肌细胞上的功能性表达水平分别为 77%、48.3 0 % (P <0 .0 1) ;其电流密度分别是 -8.86± 2 .3 4pApF- 1 与 -4 .62± 1.0 6pApF- 1 (P <0 .0 1)。早、中、晚期胚胎心肌细胞的ICa L的功能表达变化不明显 (P >0 .0 5 )。结论 :胚胎心肌细胞的If的功能表达呈发育依赖性下降 ,ICa
- 骆红艳唐明杜以梅刘长金宋明柯梁华敏胡新武Jurgen Hescheler
- 关键词：胚胎心肌细胞IFICA-L
- 小鼠胚胎单个心肌细胞自发节律性活动的发育依赖性变化被引量：1
- 2004年
- 目的 研究小鼠胚胎心房肌和心室肌细胞自律性水平随胚胎发育不同时期而改变的发育依赖性特点。方法采用全细胞膜片钳技术 ,在电流钳条件下 ,记录了不同胚胎发育阶段小鼠单个心室肌细胞和心房肌细胞的跨膜动作电位。结果 心室肌细胞早期 (9 5～ 10 5d ,earlydevelopmentstage,EDS)、中期 (11～ 14d ,intermediatedevelopmentstage ,IDS)、晚期 (14～ 18 5d ,latedevelopmentstage,LDS)动作电位周期分别为 (172 86± 2 6 15 )ms、(2 4 7 73±15 84 )ms、 (32 6 6 7± 30 10 )ms (P <0 0 5 ) ;中、晚期心房肌细胞动作电位周期分别为 (2 0 4 15± 2 4 14 )ms,(2 2 6 5 3± 2 0 2 8)ms。结论 随着胚胎发育成熟 ,小鼠胚胎心房肌和心室肌细胞的自律性活动逐渐降低。
- 韩林张树军杜皓唐明刘长金宋元龙Jürgen Hescheler
- 关键词：小鼠胚胎心肌细胞心率
- 视网膜Müller细胞的生理功能及在青光眼病理中的作用被引量：7
- 2013年
- Müller胶质细胞是脊椎动物视网膜主要的一类胶质细胞,在解剖和功能上与视网膜各层神经元的胞体和突起有广泛联系。Müller细胞上表达有主要神经递质的受体、转运体、离子通道,以及和细胞功能活动相关的酶分子,而且,Müller细胞也释放一些活性因子,如D-丝氨酸和谷氨酸等,从而调控神经元的兴奋性。因此,除了传统认为的对神经元支持、营养作用,Müller细胞和神经元之间的信息交换和相互作用在维持视网膜神经元功能中发挥有重要作用。在青光眼等病理过程中,Müller细胞被激活。激活的Müller细胞发生许多生理、生化和形态学改变,并释放多种有害因子[(如一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、氧自由基(ROS)和前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)等],参与视网膜神经节细胞的损伤。本文综述了视网膜Müller细胞的基本生理特征,以及在青光眼病理过程中Müller细胞的功能变化。
- 高凤季敏吴继红王中峰
- 关键词：视网膜MÜLLER细胞离子通道胶质原纤维酸性蛋白
