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突变型早老素-1致维甲酸诱导PC12细胞ERp29表达增强及其意义: 2008年; 目的探讨突变型早老素-1（PS-1）对维甲酸（RA）诱导PC12细胞基因表达的影响。寻找与阿尔茨海默病发病机制相关的基因。方法分别建立表达突变型和野生型PS-1的经RA诱导的基因工程化PC12细胞．应用银染mRNA差异显示技术研究突变型PS-1对RA诱导的PC12细胞基因差异表达的影响。结果成功建立了表达突变型和野生型PS-1的经RA诱导的基因工程化PC12细胞后，应用银染mRNA差异显示技术发现29型内质网蛋白（ERp29）在表达突变型PS-1的基因工程化PC12细胞中高表达．并与细胞凋亡密切相关。结论突变型PS-1致细胞内ERp29的表达增强可能是内质网应激的结果．ERp29表达增强与阿尔茨海默病的发生与发展可能存在着密切关系。; 杨荣华黄其林; 关键词：阿尔茨海默病早老素-1

全反式维甲酸对PC_(12)细胞AchE和ChAT活性的影响被引量：2: 2003年; 目的　观察不同浓度全反式维甲酸 (RA)诱导PC1 2 细胞呈现拟胆碱能神经元表型 ,以及不同RA浓度对PC1 2细胞增殖及细胞凋亡的影响。方法　利用 1～ 5 0 μmol L浓度RA诱导PC1 2 细胞 ,MTT法、流式细胞仪、TUNEL法、分光光度法和放射酶学法检测细胞生长曲线和细胞生长周期的变化、细胞凋亡情况、乙酰胆碱酯酶 (AchE)和胆碱乙酰基转移酶(ChAT)活性变化。结果　① 1,5 ,10 ,2 0 μmol L浓度RA均明显增加ChAT活性 ,以 10 μmol L浓度时ChAT活性最高 ,超过该浓度后ChAT活性呈下降趋势。RA对AchE活性无明显诱导作用。②当浓度大于 10 μmol L后RA诱导PC1 2 细胞凋亡的作用明显增强。③ 1～ 5 0 μmol L浓度RA均能抑制PC1 2 细胞增殖 ,RA浓度越高 ,抑制作用越明显 ,呈明显的剂量依赖效应。④RA对细胞周期的抑制作用主要表现于G1 →S期。结论　RA具有诱导PC1 2 细胞呈现拟胆碱能神经元表型的作用 ,10μmol L 是最佳诱导浓度。; 滕晓华黄其林张可成; 关键词：全反式维甲酸 PC12细胞胆碱能神经元凋亡

Presenilin-1突变对RA诱导的PC12细胞生长和凋亡的影响被引量：1: 2004年; 目的观察PS-1突变型L286V对RA诱导的PC12细胞生长和凋亡的影响。方法运用脂质体介导的基因转染技术建立稳定表达PS-1WT和突变型L286V基因的细胞克隆,采用MTT法、流式细胞仪检测细胞生长曲线、生长周期及细胞凋亡情况。结果(1)PS-1突变型L286V能使RA诱导的PC12细胞增殖指数降低,G1期细胞增多、S期细胞减少;(2)在正常培养条件和无血清培养下,PS-1突变型L286V对RA诱导的PC12细胞均具有促进细胞凋亡的作用,以无血清培养时表现得更为明显。结论PS-1突变型L286V对RA诱导的PC12细胞生长具有抑制作用和促进细胞凋亡的作用。; 滕晓华黄其林张可成; 关键词：PC12细胞凋亡阿尔茨海默病 AD

Presenilin-1突变对全反式维甲酸诱导的PC12细胞生长和凋亡的影响: 2004年; 目的　观察Presenilin 1(PS 1)突变型L2 86V对全反式维甲酸 (RA)诱导的PC12细胞生长和凋亡的影响。　方法　运用脂质体介导的基因转染技术建立稳定表达PS 1WT和突变型L2 86V基因的细胞克隆 ,采用MTT法、流式细胞仪检测细胞生长曲线、生长周期及细胞凋亡情况。　结果　 (1)PS 1突变型L2 86V对RA诱导的PC12细胞生长具有抑制作用 ;主要表现为G1期细胞增多、S期细胞减少 ,细胞增殖指数降低 ;(2 )在正常培养条件下 ,对照组细胞凋亡率 (% )为 0 31±0 0 9、野生型组为 0 4 3± 0 11、L2 86V组为 0 6 2± 0 2 7;无血清培养 1、2、3d ,对照组细胞凋亡率 (% )分别为 0 5 5± 0 0 7、1 2 3± 0 4 7、5 5 9± 2 91;野生型组为 1 0 9± 0 73、3 2 1± 1 4 1、7 79± 2 78;L2 86V组为 4 6 5± 1 0 4、10 5 4± 3 18、14 4 7± 3 5 3;PS 1突变型L2 86V对RA诱导的PC12细胞均具有促进细胞凋亡的作用 ,以无血清培养时表现得更为明显。　结论　PS 1突变型L2 86V对RA诱导的PC12细胞生长具有抑制作用 ;在有和无血清培养条件下均具有促进细胞凋亡的作用 ,以无血清培养时表现得更为明显。; 滕晓华黄其林张可成; 关键词：全反式维甲酸 PC12细胞细胞生长 RA

银染mRNA差异显示方法的改进与优化被引量：2: 2008年; 目的对银染mRNA差异显示方法进行改进与优化,建立具有良好重复性和稳定性的银染mRNA差异显示新方法。方法通过对银染mRNA差异显示方法中的PCR参数进行优化以及凝胶电泳和加样方式进行改进。结果经改进与优化的银染mRNA差异显示方法具有良好的重复性、稳定性,差异条带清晰易辨。结论经改进和优化的银染mRNA差异显示方法具有良好的重复性、稳定性,可以代替传统的放射性同位素方法,应用于基因差异表达的研究。; 杨荣华黄其林; 关键词：放射性同位素基因差异表达稳定性凝胶电泳 PCR

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国家自然科学基金(30070274)