辽宁省科技厅科技攻关项目(2004225003-8)
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
- 相关作者：梅晰凡王岩松吕刚刘畅任甫更多>>
- 相关机构：辽宁医学院附属第一医院辽宁医学院锦州医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：辽宁省科技厅科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 联合应用地塞米松和维甲酸诱导兔骨髓基质细胞向成骨方向的转化被引量：2
- 2006年
- 目的:观察维甲酸和地塞米松对兔骨髓基质细胞的成骨诱导影响,探讨二者联合诱导兔骨髓基质细胞向成骨细胞分化的可能性和适当条件,使兔骨髓基质细胞向成骨诱导得以优化,从而为临床治疗骨缺损提供实验基础。方法:实验于2005-12/2006-3在锦州医学院附属第一医院骨科实验室完成。①体外培养兔骨髓基质干细胞。②用不同的诱导剂将其向类成骨细胞诱导。实验分非诱导组(用DMEM培养基培养),地塞米松诱导组(培养基中加入地塞米松、β-甘油磷酸钠和维生素C),维甲酸诱导组(培养基中加入维甲酸),地塞米松与维甲酸联合诱导组(培养基中加入地塞米松、β-甘油磷酸钠、维生素C和维甲酸)。③通过倒置相差显微镜对细胞的形态进行观察;于第4,6,8,10,12天定量检测其分泌的碱性磷酸酶;应用原位杂交技术检测Ⅰ型胶原的表达情况。结果:①原代和传代培养时不同组别兔骨髓基质细胞的生长情况:地塞米松诱导组细胞形态向类成骨细胞转化,维甲酸诱导组细胞与神经干细胞类似,地塞米松与维甲酸联合诱导组细胞与地塞米松诱导组细胞形态变化大体一致,但细胞更饱满,多角形细胞比例更高,部分区域细胞呈现漩涡状分布。②各组碱性磷酸酶活性检测结果:非诱导组碱性磷酸酶表达量低,随时间略有增加;地塞米松诱导组碱性磷酸酶表达呈曲线升高[6,8,10,12d依次为(265.9±47.3),(445.4±69.4),(650.3±52.0),(703.6±62.5)nkat/L];维甲酸诱导组基本无碱性磷酸酶表达;地塞米松与维甲酸联合诱导组碱性磷酸酶表达趋势与地塞米松诱导组相似,但绝对值有所增高[6,8,10,12d依次为(355.4±62.2),(631.3±84.4),(925.0±69.0),(1039.5±85.2)nkat/L]。③各组原位杂交技术检测Ⅰ型胶原结果:地塞米松诱导组和地塞米松、维甲酸联合诱导组检测Ⅰ型胶原结果发现胞浆内可见大量棕黄色颗粒,非诱导组与维甲酸诱导组�
- 王岩松梅晰凡
- 关键词：骨髓基质细胞地塞米松维甲酸细胞分化
- 透明质酸钠可作为成骨诱导后骨髓间充质干细胞的载体被引量：3
- 2009年
- 目的:研究透明质酸钠作为组织工程骨支架的可行性。方法:体外培养兔骨髓间充质干细胞(MSCs),在成骨诱导剂地塞米松等的诱导下,向成骨细胞转化,并使之与透明质酸钠凝胶复合,通过倒置相差显微镜和扫描电子显微镜观察细胞贴附情况。结果:地塞米松等诱导组细胞形态向类成骨细胞转化,碱性磷酸酶表达明显增高,并表达Ⅰ型胶原。体外复合培养10h,成骨细胞即开始于透明质酸钠凝胶中伸展生长,复合培养7d,成骨细胞在凝胶中分化增殖,分泌细胞外基质。结论:适当浓度成骨诱导剂可成功地将兔MSCs向成骨细胞诱导,透明质酸钠是骨组织工程的良好载体。
- 梅晰凡王岩松吕刚任甫李全双郭占鹏
- 关键词：骨髓间充质干细胞成骨细胞透明质酸钠生物相容性
- 新生大鼠肌源性干细胞的原代培养和鉴定被引量：3
- 2008年
- 目的探讨骨骼肌源性干细胞体外培养、鉴定的方法。方法采用Ⅰ型胶原酶和胰蛋白酶两步消化法分离大鼠骨骼肌源性干细胞,经差速贴壁法纯化后,培养液中培养。倒置显微镜观察细胞形态,生长曲线分析肌源性干细胞的增殖能力,结蛋白细胞免疫荧光方法鉴定肌源性干细胞。结果经过两步消化和差速贴壁后,成功培养出高纯度的肌源性干细胞,细胞免疫荧光结果为desmin(+)。结论通过体外原代培养获得高纯度肌源性干细胞,结蛋白细胞免疫荧光可以对其早期鉴定,为组织工程的临床应用提供种子细胞。
- 刘福强刘畅杨彪梅晰凡
- 关键词：肌源性干细胞体外培养
