国家自然科学基金(30571154)
- 作品数：9 被引量：31H指数：4
- 相关作者：晏月明张艳贞李巧云王轲王爱丽更多>>
- 相关机构：首都师范大学中国农业科学院作物科学研究所青岛农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 小麦籽粒发育过程中的蛋白质组分析
- 以京411为材料,研究了籽粒不同发育时期清球蛋白、谷蛋白和醇溶蛋白三个亚蛋白组的合成与积累特征．采用不同的蛋白提取方法,分别利用双向电泳(2-DE)和生物质谱技术(MS)、SDS-PAGE 电泳以及反相高效液相色谱(RP...
- 高利艳王爱丽李小辉晏月明
- 关键词：醇溶蛋白双向电泳质谱技术
- 文献传递
- 蛋白质糖基化修饰的研究方法及其应用被引量：9
- 2006年
- 蛋白质糖基化是一种重要的翻译后修饰,它参与和调控生物体的许多生命活动。随着蛋白质组技术的不断发展,蛋白质糖基化研究越来越受到广泛的重视。本文介绍了蛋白质糖基化修饰的研究内容与方法,并综述了最近的研究进展。
- 张倩杨振张艳贞王爱丽安学丽晏月明
- 关键词：糖基化糖蛋白糖链质谱
- 毛细管电泳技术在蛋白质翻译后修饰中的应用
- 2008年
- 蛋白质中翻译后修饰蛋白的鉴定是蛋白质组学研究的主要内容之一。毛细管电泳技术由于其高分辨能力、低样品上样量、易操作性和较少的分析时间等特点,迅速发展成为一种重要的分离技术。通过毛细管电泳与质谱连用,可以得到许多关于蛋白质鉴定、纯化和结构改变方面的十分有价值的信息。对毛细管电泳技术进行了简单介绍,并且就其在蛋白质磷酸化和蛋白质糖基化研究中的应用进行了综述。
- 张东阳晏月明
- 关键词：毛细管电泳翻译后修饰磷酸化蛋白质
- 小麦高分子量谷蛋白亚基功能的体外鉴定被引量：6
- 2008年
- 通过SDS-PAGE方法回收纯化小麦高分子量谷蛋白亚基1Ax1、1Dx5、1Dy10、1Bx7、1By8和1By9,然后利用微量配粉方法将单个亚基分别添加到对照"京411"面粉中,经过揉混仪分析单个亚基对揉面特性的影响,进而确定各个亚基的功能特性。根据揉面时间、稳定时间等参数的变化,6个小麦高分子量谷蛋白亚基对面粉品质的影响表现为1Dy10>1Ax1>1Dx5>1By8>1Bx7>1By9。研究结果表明,通过揉混仪进行体外配粉检测是快速鉴定高分子量谷蛋白亚基功能的一种有效方法。
- 裴玉贺孙辉宋希云晏月明祭康敏李巧云何中虎刘丽黄兴峰
- 关键词：高分子量谷蛋白亚基
- 新型HMW-GS基因1Dy12.1^(*t)植物双元表达载体的构建及其遗传转化被引量：1
- 2009年
- 为了建立快速研究高分子量谷蛋白亚基(high molecular weightglutenin subunit,HMW-GS)基因功能活性的植物表达体系,以自主克隆的新型HMW-GS基因1Dy12.1*t为目的基因,利用限制性内切酶XhoⅠ和SalⅠ切割后5’端能形成相同粘性末端的特性,成功构建了1Dy12.1*t的植物双元表达载体pBINHP-GluT。该载体选择使用胚乳特异性强启动子,利用已知HMW-GS基因内部均不含有的XbaⅠ和KpnⅠ内切酶位点引入1Dy12.1*t编码区,并将1Dy12.1*t的表达调控置于T-DNA区内,从而奠定了其在不同HMW-GS基因功能活性研究上的便利性。通过根癌农杆菌烟草叶盘转化研究目的基因1Dy12.1*t在植物体的表达特性,SDS-PAGE和western blotting鉴定结果表明,1Dy12.1*t在转基因烟草种子胚乳中得到高效表达,进一步证实了所克隆基因的正确性和所构建载体的有效性。
- 张艳贞王轲张静晏月明
- 关键词：HMW-GS基因双元表达载体植物体高分子量谷蛋白亚基SDS-PAGE限制性内切酶
- 小麦籽粒发育过程中的蛋白质组分析被引量：4
- 2007年
- 以京411为材料,研究了籽粒不同发育时期清球蛋白、谷蛋白和醇溶蛋白三个亚蛋白组的合成与积累特征.采用不同的蛋白提取方法,分别利用双向电泳(2-DE)和生物质谱技术(MS)、SDS-PAGE电泳以及反相高效液相色谱(RP-HPLC)等主要蛋白质组技术进行了鉴定与分析,初步得到了三种蛋白的合成与积累特征,为今后小麦发育蛋白质组学以及品质改良研究提供了科学依据.
- 高利艳王爱丽李小辉晏月明
- 关键词：醇溶蛋白双向电泳质谱技术
- 野生二粒小麦高分子量谷蛋白亚基等位变异分析被引量：1
- 2009年
- 本研究采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)方法,对从国内外引进的175份野生二粒小麦(Triticum dicoccoides)种质资源高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)Glu1-等位基因组成进行了鉴定和分析.结果表明,175份野生二粒小麦中,Glu-1B位点上的HMW-GS有32种变异类型,比普通面包小麦Glu-1B位点编码的HMW-GS的变异类型丰富得多,其中7+8和14.1+15.1亚基分布频率最高(占20.00%);Glu-1A位点编码的HMW-GS有4种变异类型:1、1*、2*和Null,一共鉴定了10个新的高分子量亚基.这些新的亚基和等位基因有可能成为面包小麦品质改良的候选基因资源.
- 卢霖谢震泽高利艳王轲晏月明
- 关键词：HMW-GS野生二粒小麦SDS-PAGE
- 小麦贮藏蛋白分子结构及其研究技术进展被引量：5
- 2007年
- 小麦贮藏蛋白不仅是人类植物蛋白的重要来源,也是面粉加工品质的决定因素。尽管人们对面团中二硫键的形成模式有了初步的认识,但仍无法完整、准确、系统地阐述面团的产生机制。为了给相关研究提供参考,笔者介绍了蛋白质分子结构研究的主要技术,如圆二色光谱技术、傅立叶-红外光谱技术、扫描隧道显微镜检测技术、原子力显微镜、核磁共振波谱技术和差示扫描量热技术的原理及其特点,综述了近年来这些技术应用于小麦贮藏蛋白分子结构研究方面的进展,并讨论了存在问题及其发展前景。
- 董艳敏李小辉晏月明
- 关键词：小麦贮藏蛋白核磁共振波谱圆二色谱扫描隧道显微镜
- 野生二粒小麦(Triticum dicoccoides)低分子量谷蛋白亚基基因的克隆与序列分析被引量：3
- 2007年
- 目的旨在从野生二粒小麦中克隆新的低分子量谷蛋白亚基基因。方法首先通过SDS-PAGE方法对野生二粒小麦Y5和Y13的低分子量谷蛋白亚基(LMW-GS)进行鉴定,并利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)方法确定其精确分子量。然后采用AS-PCR方法,运用1对LMW-GS特异的引物,分别从Y5和Y13中扩增并克隆了2个亚基的编码基因(命名为LMW-Y5和LMW-Y13)。结果测序结果表明,所得基因均为完整的基因序列,包括上游区域、开放阅读框和下游区域,无内含子存在。由核酸序列所推导出的氨基酸序列表明,这两个基因的编码蛋白(命名为LMW-Y5和LMW-Y13)均属于LMW-i型亚基,分子量分别为38.9122kD和31.8708kD。其中LMW-Y5的分子量与质谱鉴定的分子量基本一致,表明该蛋白亚基没有翻译后修饰存在。但LMW-Y13的分子量与SDS-PAGE和质谱鉴定结果存在较大差异,其原因可能是在克隆过程中发生了重复区的碱基丢失。结论明确了野生二粒小麦两个LMW-i型亚基的分子结构特征,并讨论了LMW-i型亚基分子结构与品质的关系以及在小麦品质改良中的应用潜力。
- 李巧云安学丽肖英华张倩张艳贞夏先春何中虎晏月明
- 关键词：野生二粒小麦LMW-GSAS-PCR基因克隆
- 小麦高分子量谷蛋白亚基多克隆抗体的制备、纯化及鉴定被引量：2
- 2007年
- 利用丙酮沉淀法对小麦高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)进行快速高效纯化,以纯化后的蛋白做为抗原,免疫白兔,制备了相应的多克隆抗体.与大肠杆菌裂解液共温育去除交叉反应性抗体,并用饱和硫酸铵沉淀法对抗体进行了初步纯化.电泳及免疫印迹结果表明,所制备的多克隆抗体能与小麦的高分子量谷蛋白亚基发生强烈反应,而与小麦中的水溶性蛋白、醇溶蛋白及低分子量谷蛋白亚基不反应.该抗体的制备为进一步研究小麦高分子量谷蛋白亚基的功能及其品质改良提供了基础材料和有用工具.
- 祭康敏李巧云裴玉贺王轲李凤艳晏月明
- 关键词：小麦高分子量谷蛋白亚基多克隆抗体
