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国家自然科学基金(30070242)

作品数:5 被引量:3H指数:1
相关作者:林万敏徐平陈献华李静孙凯华更多>>
相关机构:复旦大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金更多>>
相关领域:生物学医药卫生自然科学总论更多>>

文献类型

  • 5篇中文期刊文章

领域

  • 2篇生物学
  • 2篇医药卫生
  • 1篇自然科学总论

主题

  • 2篇特异
  • 2篇细胞
  • 2篇抗体
  • 2篇剪接
  • 2篇ZIS
  • 2篇FGF-2
  • 1篇蛋白
  • 1篇选择性剪接
  • 1篇融合蛋白
  • 1篇特异抗体
  • 1篇特异性
  • 1篇细胞化学
  • 1篇细胞特异
  • 1篇细胞特异性
  • 1篇免疫
  • 1篇免疫细胞
  • 1篇免疫细胞化学
  • 1篇基因
  • 1篇基因表达
  • 1篇基因表达调控

机构

  • 4篇复旦大学

作者

  • 4篇陈献华
  • 4篇徐平
  • 4篇林万敏
  • 3篇李静
  • 2篇孙凯华
  • 1篇黄嘉
  • 1篇李丽书
  • 1篇吴琨
  • 1篇汪凌
  • 1篇韩彧

传媒

  • 1篇中国科学(C...
  • 1篇中国免疫学杂...
  • 1篇实验生物学报
  • 1篇中国生物化学...
  • 1篇Scienc...

年份

  • 2篇2004
  • 2篇2003
  • 1篇2002
5 条 记 录,以下是 1-5
排序方式:
用于前体mRNA剪接机制研究的小基因模型的建立和研究应用被引量:1
2003年
建立可用于选择性前体mRNA剪接分析的小基因模型。以人或小鼠基因组DNA为模板,通过PCR扩增获得GluR-B,FGF-2R和ZiS小基因片段,并将其克隆至真核表达载体中,构建了小基因的质粒。在此基础上,将上述3个小基因模型和剪接因子Tra2β_1或Zis2表达质粒共转染HeLa细胞,并用RT-PCR进行了被剪接的小基因产物的半定量检测。结果表明,这些小基因可用于细胞水平的基因剪接分析,利用该技术平台,发现了Zis2亚型可以促进Zis小基因选择性剪接。
李静陈献华林万敏李丽书韩彧徐平
关键词:剪接机制基因表达调控选择性剪接ZIS
Tra2β1蛋白在神经特异性的基因剪接中的功能被引量:1
2004年
体外(in vitro)生化研究已证明哺乳动物Tra2蛋白是前体mRNA剪接的重要调控因子,但是,对该蛋白在in vivo条件下的剪接功能,尤其是在神经特异性基因剪接中的功能及其细胞特异性,目前所知甚少。本文采用in vivo分析模型,在COS-1和PFSK两种不同类型的细胞中,研究了两个神经特异性基因(GluR-B,SMN2)剪接的细胞特异性,同时分析了Tra2β1在这两个基因剪接中的功能及其细胞特异性。结果表明,在研究的两种细胞中,GluR-B和SMN2“小基因”的剪接均具有明显的细胞特异性;而Tra2β1蛋白的过量表达在这两种不同的细胞中对“小基因”的剪接有显著的相同倾向的调节作用,提示Tra2β1蛋白对该两个基因剪接的调节作用可能没有细胞特异性。
陈献华李静林万敏吴琨徐平
关键词:基因剪接细胞特异性MRNA
前体mRNA剪接蛋白Tra2α特异抗体的制备和鉴定
2002年
目的 :制备用于检测人胚胎组织Tra2α蛋白的特异抗体。方法 :选择Tra2α中特有的一段编码序列 (第 5 2~ 16 5位核苷酸 ) ,通过克隆至pGEX 3x表达载体形成GST融合基因 ,并以诱导表达和纯化的该融合蛋白为抗原免疫新西兰兔 ,获得了抗Tra2α的血清。结果 :免疫印迹 (Westernblot)检测结果显示 ,该血清能特异地与人胎脑组织中的Tra2α蛋白结合。免疫组织化学结果显示 ,该血清能用于人胎脑组织中Tra2α蛋白分布的检测。结论 :所制备的抗血清具有很好的特异性 ,可用于人胚胎组织中Tra2α蛋白的检测。
陈献华林万敏孙凯华黄嘉汪凌徐平
关键词:抗体
Establishment and application of minigene models for studying pre-mRNA alternative splicing被引量:1
2004年
The objective of the present study is to establish a minigene model for studying pre-mRNA alternative splicing. To prepare the minigene DNA constructs, with human or mouse genomic DNA as templates, GluR-B , FGF-2R and Zis 搈inigene?fragments were amplified us-ing PCR and cloned to the eukaryotic expression vectors. The three constructed minigenes and the expression vectors of Tra2b1 and Zis2 were co-transfected in Hela cells. RT-PCR analysis was performed to semi-quantitatively determine the spliced products from the minigenes. The results demonstrated that the constructed minigenes are useful in studying the pre-mRNA al-ternative splicing in cultured cells. With the established Zis minigene, we for the first time found that Zis2 isoform regulates the alternative splicing of Zis minigene.
LI Jing CHEN Xianhua LIN Wanmin LI Lishu HAN Yu XU Ping
关键词:PRE-MRNA
前体mRNA剪接蛋白Tra2β1的抗体制备及鉴定被引量:1
2003年
Tra2 β1是Tra2 β前体mRNA剪接调节蛋白家族中的一个组织分布最广、表达量最多的成员 ,它在选择性前体mRNA剪接中有调节功能 ,而在基础性剪接中不是必需的 .为便于对该蛋白功能的进一步研究 ,需要制备能特异地检测Tra2 β1蛋白的抗体 .选择包含Tra2 β1的N端 12个氨基酸的特异编码序列的Tra2 β2全长编码序列 (共 117个核苷酸 ) ,将其克隆至pGEX 3X表达载体形成GST融合基因 ,并以诱导表达和纯化的该融合蛋白为抗原免疫新西兰兔 ,获得了相应的抗体 .Western印迹和免疫细胞化学分析结果显示 ,获得的抗体能特异地检测Tra2
陈献华李静孙凯华林万敏徐平
关键词:抗体融合蛋白免疫细胞化学
共1页<1>
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