安徽省人才开发基金(20052041)
- 作品数：3 被引量：10H指数：2
- 相关作者：任明山许文华吴怀国杨毅熊小平更多>>
- 相关机构：安徽医科大学附属省立医院安徽医科大学更多>>
- 发文基金：安徽省人才开发基金安徽省自然科学基金安徽省卫生厅科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- T细胞共刺激分子在重症肌无力发病机制中的作用
- 2007年
- 重症肌无力（MG）是由乙酰胆碱受体抗体介导的细胞免疫依赖性和补体参与的神经肌接头部位的自身免疫性疾病，免疫应答异常是其发病本质。近年研究发现CD28：CTLA4／87和CD154／CD40是最重要的共刺激分子，对T和B淋巴细胞的增殖、活化、抗体和细胞因子的分泌均具有重要作用，其对重症肌无力的发生和发展也具有十分关键的作用。
- 吴怀国任明山
- 关键词：共刺激分子重症肌无力发病机制
- 重组人乙酰胆碱受体α亚基1-210诱导实验性自身免疫性重症肌无力模型被引量：3
- 2007年
- 目的克隆和表达人乙酰胆碱受体α亚基1-210(hAChR α1-210),并以该表达产物免疫 Lewis 鼠诱导实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)模型。方法将经逆转录-PCR 扩增出的目的基因片段 AChR α1-210在大肠杆菌中诱导表达,经 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和 Westernblot 鉴定表达产物为 rhAChR α1-210。将凝胶上一定剂量 rhAChR α 1-210融合蛋白与完全氟氏佐剂(CFA)充分乳化后,经皮下多点注入实验组,对照组则注入等剂量与 CFA 充分混匀乳化的空菌总蛋白。观察免疫后鼠体重的变化,并给予 Lennon 临床评分;低频重复电刺激检查电衰减反应和 ELISA法检测血清 AChR-ab 滴度作为评价造模是否成功的客观依据。结果将一定量的表达产物 rhAChRα1-210融合蛋白免疫 Lewis 鼠,并在4周后强化免疫一次。在强化免疫10 d 后实验组(n=10)部分鼠出现体重下降和肌无力,至实验结束时实验组有7只鼠 Lennon 临床评分达1级以上,对照组未见体重下降和肌无力表现。低频重复电衰减检查显示实验组3 Hz 和5 Hz 衰减率分别为13.90%±4.20%、13.20%±2.62%,对照组则为5.60%±2.06%、7.70%±2.40%,两组比较差异有统计学意义。ELISA 法检测血清 AChR-ab 滴度结果表明实验组阳性率为70%,对照组未出现阳性,两组比较差异有统计学意义。结论采用 rhAChR α1-210融合蛋白可成功诱导 EAMG 动物模型,与经典方法相比具有操作方法简单、成本较低、免疫原充足等优点。
- 许文华许功林陈兵鲁云霞任明山
- 关键词：重组融合蛋白质类
- 鼠源性乙酰胆碱受体α亚基97—116肽段（V108A）鼻黏膜耐受对实验性自身免疫性重症肌无力大鼠的影响被引量：7
- 2008年
- 目的 研究鼠源性乙酰胆碱受体α亚基97-116肽段丙氨酸替代108缬氨酸[Rα97—116（V108A）]鼻黏膜耐受对实验性自身免疫性重症肌无力（EAMG）大鼠肌无力表现及免疫功能的影响。方法将采用Rα07-116强化免疫接种方法成模的22只EAMG大鼠随机分成耐受组和对照组，分别经鼻黏膜给予Rα07-116（V108A）和PBS缓冲液免疫耐受处理10d后，观察不同时间点两组大鼠体质量、Lennon肌无力评分、血清AChR—ab（ELISA法）及CD28、CTLA4、B7共刺激分子（流式细胞仪）变化。结果耐受组EAMG大鼠体质量[（228．1±5．8）g]较对照组[（215．0±16．2）g]增加（t=2．395，P〈0．05）；肌无力临床评分[耐受组（1．55±0．44）分，对照组（2．10±0．66）分]下降（t=-2．20，P〈0．05）；血清AChR-ab（耐受组0．97±0．20，对照组1．27±0．26，t=-2．857，P〈0．05）和外周血CD28、B7-1、B7-2、CTLA4分子的表达（％）耐受组（分别为27．35±7．05、4．73±0．58、2．71±0．35、1．72±0．44）较对照组（分别为40．02±8．81、9．52±1．25、5．88±1．09、2．64±0．47）明显下调（t=3．479、10．861、8．755、4．403，均P〈0．01）。结论Re07—116（V108A）鼻黏膜耐受能明显减轻EAMG的肌无力症状，并能引起特异性T细胞活化和B细胞免疫功能抑制。
- 吴怀国杨毅熊小平许文华任明山
- 关键词：鼻黏膜
