广东省医学科学技术研究基金(A2003347)
- 作品数：6 被引量：19H指数：2
- 相关作者：杨红何震宇潘伟李月琴崔炳权更多>>
- 相关机构：广东药学院暨南大学广东药科大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 扩增引进限制性酶切位点技术检测CYP2C9基因的多态性被引量：1
- 2006年
- 建立了一种简便、快速、准确的检测CYP2C9基因Arg144Cys位点和Ile359Leu位点多态性的新方法.该方法采用与模板具有1个碱基错配的引物通过PCR在扩增产物中引进限制性酶切位点,即扩增引进限制性酶切位点(amp lification-created restriction sites,ACRS),其中通过上游引物在扩增Arg144Cys位点的片断中引入AvaⅡ切点,使得野生型基因CYP2C9*1和突变型基因CYP2C9*2的PCR产物中分别含有2个和1个AvaⅡ切点;通过下游引物在扩增Ile359Leu位点的片断中引入MvaⅠ切点,使得野生型基因CYP2C9*1和突变型基因CYP2C9*3的PCR产物中分别含有1个和2个MvaⅠ切点.将来自Arg144Cys位点和Ile359Leu位点的PCR产物各取一份测序,表明错配碱基成功引入PCR产物中.将包含Arg144Cys位点的PCR产物用AvaⅡ消化,将包含Ile359Leu位点的PCR产物用MvaⅠ消化,然后通过聚丙烯酰胺凝胶电泳-银染进行基因分型.由于野生型基因和突变型基因的PCR产物中都至少含有1个酶切位点,能完全避免因限制性核酸内切酶失活或酶切不完全而导致的基因分型错误.
- 何震宇杨红李月琴周天鸿
- 关键词：多态性聚合酶链反应
- 多重PCR-RFLP用于药酶CYP2C9基因分型的研究
- 2007年
- 目的建立鉴定CYP2C9基因型的多重PCR-RFLP方法。方法用2对引物分别在同一管中PCR扩增针对外显子2中T269C和外显子7中A1075C两个多态位点的靶片段,PCR产物用MvaⅠ酶切分型;另用2对引物分别在同一管中PCR扩增针对外显子3中C430T和外显子6中A895G两个多态位点的靶片段,PCR产物用VpaK11BⅠ酶切分型。结果多重PCR-RFLP分型结果与单管单位点PCR-RFLP分型结果一致。结论建立了一种一次可以同时检测CYP2C9基因T269C,A1075C两个多态位点及C430T,A895G两个多态位点的方法,该法具有简单、快速、灵敏、经济、准确等特点。
- 何震宇杨红潘伟周天鸿
- 关键词：CYP2C9多重聚合酶链反应基因分型
- 广东地区人群CYP2C9基因启动子区-1189C/T位点的多态性
- 2007年
- 目的:检测中国广东地区人群CYP2C9基因启动子区-1189C/T位点的多态性并调查其等位基因及基因型频率。方法:提取152例广东药学院新生外周血基因组DNA,PCR扩增含CYP2C9基因-1189C/T位点的DNA片段,用MboⅡ酶切PCR产物,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳-银染判断基因型。结果:在检测的152例样本中,CYP2C9基因-1189C/T位点基因型:C/C 21例、C/T 82例、T/T 49例,其相应的频率分别为0.14、0.54、0.32,符合Hardy-Weinberg平衡;等位基因-1189C和-1189T的频率分别为0.41和0.59,与日本人群和西班牙人群相比,差异没有统计学意义。结论:本研究建立了一种基于PCR-RFLP的简单、快速、灵敏的检测CYP2C9基因-1189C/T位点多态性的方法;CYP2C9基因-1189C/T位点多态性在中国广东地区人群中极为常见,是一个较好的遗传标志。
- 何震宇潘伟崔炳权杨红
- 关键词：基因CYP2C9启动子
- 广东人群CYP2C9等位基因及基因型分布频率被引量：15
- 2006年
- 目的了解广东人群CYP2C9等位基因及基因型分布频率。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,对100例健康广东人个体进行CYP2C9基因分型。结果CYP2C91及CYP2C93等位基因频率分别为0.965及0.035,未检测到CYP2C92等位基因;基因型CYP2C91/CYP2C91和CYP2C91/CYP2C93的频率分别为0.930、0.070,符合Hardy-Weinberg平衡分布。结论广东人群CYP2C93等位基因频率与国内其他人群及亚洲其他各国人群相比,差异无显著性,而与欧美高加索人群显著不同。广东人群使用CYP2C9底物药时,应进行相应的CYP2C9基因型检测,以指导临床合理用药和个体化医疗。
- 何震宇孙丽敏李月琴潘伟杨红
- 关键词：CYP2C9等位基因多态性
- 广东人群CYP2C9基因第四外显子多态性研究
- 2005年
- 目的研究广东人群CYP2C9基因第四外显子的多态性。方法PCR扩增50例健康广东人之CYP2C9基因跨越第四外显子的DNA片断,测序后截取完整的第四外显子序列进行blast分析。结果检测的50个广东人的CYP2C9基因第四外显子序列均与GenBank中进入号为AY702706.1的相应序列完全一致。结论广东人群CYP2C9基因第四外显子的基因序列高度保守,无多态性。
- 何震宇潘伟梅寒芳李春梅杨红
- 关键词：聚合酶链反应多态性
- 广东人群CYP2C9基因T269C位点多态性研究被引量：3
- 2006年
- 目的研究广东人群CYP2C9基因T269C位点多态性。方法PCR扩增跨越CYP2C9基因T269C位点的DNA片断,用MvaI酶切PCR产物,通过PAGE-银染判断基因型。结果在接受检测的158例健康广东人中,共检出2名CYP2C9 T269C位点杂合子个体,其余156人均为野生型纯合子个体。结论广东人群存在CYP2C9 269C即CYP2C9*13等位基因,其频率为0.006;中国人群和韩国人群CYP2C9*13等位基因频率差异无显著性。
- 何震宇潘伟崔炳权杨红
- 关键词：细胞色素P450聚合酶链反应
