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猪胰岛细胞微囊化后腹腔移植治疗小鼠糖尿病: 2014年; 目的探讨猪胰岛细胞微囊化后腹腔移植治疗小鼠糖尿病的效果。方法采用胶原酶灌注消化法及不连续密度梯度离心法分离并纯化成体猪胰岛，并用海藻酸钠、多聚赖氨酸对猪胰岛进行微囊化。双硫腙（DTZ）染色观察分离胰岛纯度，葡萄糖刺激胰岛素释放实验检测纯化胰岛和微囊化胰岛体外功能。利用链脲佐菌素（STZ）200mg／kg腹腔内注射，制作BALB／c小鼠1型糖尿病动物模型。成模后动物随机分为3组：猪胰岛微囊组、空微囊组和生理盐水对照组。每只小鼠腹腔内分别移植500个相应胰岛，检测移植前后小鼠的血糖变化。采用单因素方差分析法进行统计分析。结果不连续密度梯度离心纯化后，得到胰岛的纯度为〉90％；碘化丙啶／双醋酸荧光素（PI／FDA）染色后，测定胰岛的活力为〉90％；葡萄糖刺激胰岛素分泌检测，分离纯化的胰岛和微囊化胰岛的刺激指数均〉2．0；将微囊化胰岛移植到STZ诱导的糖尿病小鼠腹腔内，能够使小鼠血糖恢复并维持正常超过60d〈9．3mmol／L）。与空囊移植组和生理盐水对照组比较，血糖为正常水平的控制时间明显延长（F=13．587，P〈0．05）。病理学检查发现，微囊内胰岛形态基本完整，胰岛素染色为阳性。结论微囊化胰岛腹腔移植后，能有效降低小鼠血糖，微囊具有较好的免疫隔离作用。; 魏玲玲邓绍平杨卯竹钟明黄孝伦; 关键词：糖尿病异种移植微囊化腹腔移植

外加直流电场对人晶状体上皮细胞移行和增殖活力的影响: 2017年; 目的:观察外加直流电场对人晶状体上皮细胞(lens epithelial cell,LEC)移行和增殖活力的影响。方法:将培养的人晶状体上皮细胞系HLE-B3细胞暴露于电场强度为100、200、400mV/mm的直流电场中,未受电场暴露的细胞作为正常对照组。倒置显微镜观察并记录电场暴露前及暴露后的细胞图像,并计数细胞数目;流式细胞仪检测电场暴露前及暴露24h后的细胞凋亡率和细胞周期。结果:强度为400mV/mm的电场暴露3h后,HLE-B3细胞呈现朝向电场阴极一侧的定向移行。电场持续暴露后,HLE-B3细胞数逐渐减少,在电场作用6h和12h时分别较正常对照组减少12.6%和18.6%,差异均具有统计学意义(P<0.05)。100、200、400mV/mm电场暴露24h后,HLE-B3细胞凋亡率分别为(9.2±1.9)%、(23.9±2.6)%、(54±2.5)%,与正常对照组相比明显增加(P<0.05);细胞周期检测结果显示,HLE-B3细胞进入G_2/M期的比例随电场强度增加逐渐上升,其中200mV/mm和400mV/mm电场中G_((2))/M期细胞比例分别为(13.8±2.2)%和(15.6±2.5)%,与正常对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:外加直流电场可诱导HLE-B3细胞的定向移行,随电场作用时间的延长和电场强度增加,细胞生长受到抑制,同时伴随细胞凋亡增加和细胞周期G_2/M期阻滞。; 韩静刘珺严宏闫小龙; 关键词：电场人晶状体上皮细胞细胞移行凋亡细胞周期

多点矩阵扫描激光与多波长激光治疗糖尿病视网膜病变合并黄斑水肿效果比较被引量：13: 2017年; 目的对比577 nm多点扫描矩阵激光与多波长激光治疗糖尿病视网膜病变(SNPDR)合并黄斑水肿的效果。方法将SNPDR合并黄斑水肿的68例(76只眼)患者随机分为两组,A组36只眼采用577 nm多点扫描矩阵激光分2次完成全视网膜激光光凝(PRP),单点模式行黄斑区格栅样光凝;B组40只眼采用多波长扫描激光分4次完成PRP,黄光行黄斑区格栅样光凝。分别于治疗前和治疗后1周、1个月、3个月时采用ETDRS视力表检测两组最佳矫正视力(BCVA)、光学相干断层扫描(OCT)检测黄斑中心凹厚度(CMT)和视乳头旁视神经纤维层(RNFL)厚度。结果两组BCVA于激光治疗后缓慢上升,治疗3个月时与治疗前相比,P均<0.05;治疗1周、1个月、3个月时两组BCVA比较,P均>0.05。两组CMT于治疗1个月时较治疗前均减少(P<0.05),3个月时较治疗前略增加(P>0.05),治疗1周、1个月、3个月时两组间CMT比较,P均>0.05。治疗后A组平均RNFL厚度未见明显变化,而B组平均RNFL厚度于治疗3个月时与治疗前相比增加(P<0.05),两组3个月时RNFL厚度比较,P<0.05。结论 577 nm多点扫描矩阵激光与多波长激光对SNPDR合并黄斑水肿患者的治疗效果相当,多波长激光在治疗后短期可能引起视神经纤维层厚度增加。; 韩静郭勇刘燕严宏; 关键词：糖尿病视网膜病变黄斑水肿全视网膜光凝多波长激光

外源性及内源性细胞凋亡机制研究进展被引量：29: 2014年; 细胞凋亡是由一系列信号分子精密调控的程序性死亡过程,在光镜和电镜下,以细胞皱缩、染色质固缩、以及凋亡体形成为主要特征。细胞凋亡参与多种重要的生理过程,如免疫系统的正常发育及功能、新老细胞更替、胚胎发育、激素依赖性萎缩等。促凋亡与抗凋亡信号分子间平衡被打破是多种人类疾病的根源,如神经退行性疾病、缺血性损伤、自身免疫性疾病及多种肿瘤等。凋亡机制被完全阐明后将极大地改进其相关疾病的治疗策略。目前,细胞凋亡的信号传导大体分为两条基本途径:①外源性途径,由TNF-a,TRAIL,FAS-L等死亡受体介导;②内源性途径,由线粒体外膜通透性增加所介导。现就上述两条通路的分子机制进行综述。; 钟明魏玲玲杨显富邓绍平; 关键词：凋亡 BCL-2家族 CASPASE

二甲双胍对炎症状态下人视网膜血管内皮细胞生物学行为的保护作用及其机制被引量：7: 2017年; 背景研究表明炎性过程参与糖尿病视网膜病变（DR）的发生和发展，而炎症作用的靶细胞为视网膜血管内皮细胞（RVECs）。二甲双胍是临床上常用的降血糖药物，近年来表明其可发挥保护心血管、预防肿瘤和保护血－脑屏障等多重生物学效应，但其对炎症状态诱导的人视网膜血管系统异常是否具有防护作用尚不清楚。目的观察二甲双胍对肿瘤坏死因子-α（TNF-α）刺激下人视网膜血管内皮细胞（RVECs）增生、移行以及分泌单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）和白细胞介素-8（IL-8）的影响，探讨二甲双胍对炎症环境中人RVECs生物学行为的保护作用。方法对原代RVECs进行培养和传代并分为正常对照组、5 mmol/L二甲双胍组、TNF-α（2.5 ng/ml）组、TNF-α＋不同浓度（5、10、20、40 mmol/L）二甲双胍组，分别按照分组方法在培养液中添加相应药物处理24 h。分别于处理前及处理后24 h采用Image-Pro Plus Software 7.0软件计数各组细胞数目；采用MTS法检测各组RVECs的吸光度（A490）值以评价细胞的代谢活力；采用Transwell小室法检测各组迁移细胞数；采用ELISA法检测各组细胞上清液中MCP-1和IL-8质量浓度，并对各组间检测结果进行比较。结果正常对照组、5 mmol/L二甲双胍组、TNF-α组、TNF-α＋5 mmol/L二甲双胍组、TNF-α＋10 mmol/L二甲双胍组、TNF-α＋20 mmol/L二甲双胍组和TNF-α＋40 mmol/L二甲双胍组细胞数目总体比较差异有统计学意义（F＝189.31，P〈0.01）；各组细胞代谢活力（A490值）分别为0.32±0.02、0.32±0.03、0.97±0.02、0.90±0.05、0.76±0.15、0.74±0.05和0.41±0.03；各组细胞移行数目分别为（1 214±49）、（1 200±45）、（1 648±43）、（1 309±48）、（1 279±73）、（961±60）和（942±106）/视野；各组细胞上清液中MCP-1质量浓度分别为（0.385±0.050）、（0.362±0.060）、（2.285±0.200）、（1.131±0.180）、（0.622±; 韩静闫小龙Xiaoxi Qiao; 关键词：细胞移行

同种异体胰岛移植治疗1型糖尿病1O例及随访观察3年的临床研究被引量：8: 2016年; 目的评估同种异体胰岛移植治疗1型糖尿病的3年随访结果。方法对10例1型糖尿病患者（T1DM）施行同种异体胰岛移植。以Liberase酶消化，COBE2991型专用胰岛细胞分离机分离及连续密度梯度纯化，获取高纯度与高活性的胰岛。采用经皮肝门静脉穿刺，胰岛悬液重力输注，将短期培养的胰岛经门静脉移植到肝脏内。术后采用兔抗人T淋巴细胞免疫球蛋白（ATG）、注射用依那西普联合应用他克莫司＋吗替麦考酚酯的改良Edmonton免疫抑制方案，随访3年，定期监测受者血糖、C肽与糖化血红蛋白的水平。结果随访36个月，6例完全撤除胰岛素治疗，4例胰岛索用量较术前减少60％以上。术后血糖稳定维持在正常水平，C肽均在正常范围内，糖化血红蛋白基本正常，肝肾功能稳定维持正常，无胰岛移植并发症发生。结论同种异体胰岛移植治疗1型糖尿病3年期临床疗效较好，手术简捷，创伤小，安全性高，远期疗效尚需进一步观察。; 姚豫桐魏玲玲杨卯竹罗兰云薛华骆乐邹海波王冠向光明赖春友邓绍平黄孝伦; 关键词：胰岛移植糖尿病免疫抑制

眼科住院医师规范化培训教学模式的应用研究被引量：20: 2017年; 目的:探讨眼科住院医师规范化培训中不同教学模式的培训效果。方法:将60名于2015-01/2016-06在我中心进行住院医师规范化培训的住院医师随机平均分为讲授式教学(Lecture-Based Learning,LBL)、基于问题教学(ProblemBased Learning,PBL)和基于团队教学(Team-Based Learning,TBL)共三组,教学前后进行考核,对比考核成绩的变化。结果:教学后各组的成绩均有提高,TBL组成绩优于LBL组(P<0.001)和PBL组(P<0.001)。亚组分析显示LBL可提高研究对象的基础知识(LBL vs PBL,P=0.002;LBL vs TBL,P=0.001);TBL有助于强化研究对象的临床思维能力(TBL vs LBL,P<0.001;TBL vs PBL,P<0.001)。结论:TBL有助于强化培训对象的临床思维能力、提高眼科住院医师规范化培训的质量,其更适用于眼科住院医师规范化培训。; 韩静闫小龙; 关键词：眼科住院医师规范化培训教学模式

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国家自然科学基金(81200617)

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