江苏省高校自然科学研究项目(07KJD320245)
- 作品数：9 被引量：52H指数：5
- 相关作者：张育张学增沈维干马莹莹高波更多>>
- 相关机构：扬州大学泰兴市人民医院江苏省苏北人民医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 金雀异黄素对CIA大鼠促炎和抗炎因子分泌的影响被引量：3
- 2014年
- 目的研究金雀异黄素对Ⅱ型胶原诱导型关节炎大鼠促炎和抗炎因子分泌的影响。方法建立Ⅱ型胶原诱导型关节炎大鼠模型,通过50、100和200μm的金雀异黄素治疗,以0.1 mg/mL每周甲氨蝶呤(MTX)作为阳性对照,治疗后每周检测Ⅱ型胶原诱导型关节炎大鼠关节炎指数评分和后肢容积,第5周取膝关节进行关节滑膜组织病理检测;取静脉血分离出血清后,用酶联免疫吸附试验检测各组大鼠血清中白细胞介素-4(IL-4)、IL-6、IL-8、IL-10、转化生长因子-β1(TGF-β1)、淋巴毒素-α的水平。结果关节炎指数评分、后肢容积以及关节滑膜组织病理结果显示造模成功。模型组大鼠血清中的炎症因子IL-6、IL-8和淋巴毒素-α的表达水平明显高于空白对照组(P<0.05);金雀异黄素能下调IL-6、IL-8、淋巴毒素-α的分泌,200μm金雀异黄素对IL-6、IL-8的抑制作用与MTX相当,而各金雀异黄素治疗组对淋巴毒素-α的抑制作用均弱于MTX。模型组大鼠血清中的细胞因子IL-4、IL-10、TGF-β1的表达水平低于空白对照组(P<0.05);金雀异黄素能上调IL-4、IL-10、TGF-β1的分泌。100μm金雀异黄素对IL-4的上调作用与MTX相当;200μm金雀异黄素对IL-10的促进作用与MTX相当,对TGF-β1的上调作用强于MTX。结论金雀异黄素抑制Ⅱ型胶原诱导型关节炎大鼠炎症因子的释放,促进抗炎因子的表达,改善关节炎大鼠滑膜炎症。
- 马莹莹张育许金鑫王燕茹
- 关键词：金雀异黄素甲氨蝶呤CIA
- 金雀异黄素对类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞骨保护素/细胞核因子κB受体活化因子/细胞核因子κB受体活化因子配体通路的影响被引量：4
- 2013年
- 目的研究金雀异黄素(genistein,Gen)对人类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)骨保护素(osteoprotegerin,OPG)/细胞核因子κB受体活化因子(receptor-activator of nuclear factor kappa bata,RANK)/细胞核因子κB受体活化因子配体(receptor-activator of nuclear factor kappa bata ligand,RANKL)通路的影响及机制。方法培养人RA-FLS,并分为对照组(RA-FLS细胞)、TNF-α组(RA-FLS细胞+TNF-α10 ng/ml)、TNF-α+Gen组(RA-FLS细胞+TNF-α10 ng/ml+Gen 50μM)、Gen组(RA-FLS细胞+Gen 50μM)。应用免疫印迹检测Gen作用RA-FLS的RANK、RANKL、OPG、雌激素受体(estrogen receptorα,ERα)表达情况,免疫荧光检测ERα细胞内分布情况。结果 Gen组、TNF-α组及TNF-α+Gen组细胞内RANK蛋白表达量较对照组无明显差异(P>0.05),但OPG及RANKL蛋白表达明显高于对照组(均P<0.05)。Gen组OPG/RANKL较对照组增高(P<0.05)。Gen组、TNF-α组及TNF-α+Gen组细胞内ERα蛋白表达量与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。免疫荧光结果显示核内ERα表达量增加。结论 Gen可能通过与雌激素受体结合,转入核内发挥免疫调节作用,从而调节OPG/RANKL/RANK通路,发挥抑制骨破坏的作用。Gen可以上调人RA-FLS中OPG及RANKL,且对OPG的上调作用更强。
- 王燕茹张育沈维干尚辰马莹莹方振玉
- 关键词：金雀异黄素类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞骨保护素
- 金雀异黄素对胶原诱导性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞MAPK信号通路的影响被引量：7
- 2011年
- 目的研究金雀异黄素(genistein,Gen)对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)动物模型胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)MAPK信号传导通路的影响。方法建立CIA大鼠模型,将培养的CIA大鼠FLS采用随机法分组,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测Gen(浓度分别为50、100、200μmol/L)对CIA大鼠FLS增殖的影响;采用免疫印迹(Western blot)法检测Gen(浓度分别为50、100、200μmol/L)对CIA大鼠FLS细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)和磷酸化的细胞外信号调节激酶(phosphorylated extracellular signal-regulated kinase,p-ERK)表达的影响。结果 Gen能够抑制CIA大鼠FLS的增殖,Gen高剂量组细胞增殖度在72h仅为1.10±0.04,明显低于模型组2.12±0.03(P<0.01),并且Gen作用于FLS细胞后,p-ERK表达降低,Gen高剂量组仅为0.34±0.02,明显低于模型组2.68±0.14(P<0.01),而ERK表达无改变(P>0.05)。结论 Gen能够抑制CIA大鼠FLS的增殖,其作用机制主要与下调MAPK信号传导通路的酪氨酸激酶,抑制ERK的磷酸化有关。
- 张学增张育沈维干高波许金鑫
- 关键词：金雀异黄素胶原诱导性关节炎成纤维样滑膜细胞
- 瘦素影响强直性脊柱炎Th17相关细胞因子表达的研究被引量：3
- 2010年
- 取30例强直性脊柱炎(AS)患者和30例健康对照组外周血清和膝关节滑液,采用放射性免疫法和双抗体夹心酶免疫吸附法分析瘦素(leptin)、IL-17、TNF-α、IL-6含量,探讨leptin、Th17细胞因子与AS病情活动的相关性。结果表明:AS患者外周血和膝关节滑液中leptin、IL-17、TNF-α、IL-6含量比健康对照组明显升高(P<0.01)。AS外周血和关节滑液中leptin的表达水平与IL-17、IL-6呈显著相关(P<0.01),与TNF-α表达相关不显著。AS患者外周血清和关节滑液中leptin、IL-17、IL-6平均表达水平与AS患者的血沉、C-反应蛋白、Bath强直性脊柱炎活动指数呈显著相关(P<0.05),TNF-α的表达水平与AS病情活动指标相关不显著。说明leptin及Th17相关细胞因子在AS患者外周血和关节滑液中明显升高,可能直接参与了AS关节炎症过程。
- 李国青刘延庆张育郭试瑜久光正
- 关键词：强直性脊柱炎瘦素
- 金雀异黄素对CIA大鼠炎症及细胞因子影响的研究被引量：9
- 2010年
- 目的研究金雀异黄素(Gen)对类风湿关节炎(RA)动物模型CIA大鼠炎症及细胞因子的作用。方法采用Ⅱ型胶原建立CIA大鼠模型;通过Gen和/或MTX治疗后检测CIA大鼠关节炎指数(AI)评分和后肢容积,摄取大鼠关节X线片;观察大鼠关节病理学改变;Western Blot法检测血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达。结果 CIA大鼠造模成功;Gen治疗组、MTX治疗组及Gen+MTX治疗组大鼠炎症反应较模型对照组减轻,血清中IL-1β、TNF-α表达明显降低(P<0.05),Gen+MTX治疗组的效果更佳。结论 Gen能够降低CIA大鼠炎症反应,减缓关节炎病情进展,可能是通过抑制IL-1β、TNF-α的表达而发挥抗炎作用。
- 许金鑫张育张学增马莹莹
- 关键词：金雀异黄素CIA大鼠滑膜炎细胞因子
- 金雀异黄素对CIA大鼠成纤维样滑膜细胞增殖、凋亡及其机制的研究被引量：9
- 2011年
- 目的研究金雀异黄素(Genistein,Gen)对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)动物模型CIA大鼠成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)增殖、凋亡及其PI3K/AKT信号转导通路的影响。方法采用0、50、100、200μmol.L-1的Gen处理FLS 24、48、72 h,采用MTT法检测Gen对FLS增殖的影响;免疫印迹(Western blot)法检测Gen对CIA大鼠FLS凋亡蛋白bcl-2、bax表达的影响;West-ern blot法检测不同浓度的Gen处理后的CIA大鼠FLS中AKT和p-AKT表达情况。结果 50、100、200μmol.L-1的Gen均能抑制CIA大鼠FLS的增殖,且能够调节CIA大鼠FLS凋亡蛋白的表达,呈剂量依赖性关系;Gen对细胞中AKT蛋白表达无影响,不同浓度的Gen作用于FLS 72 h后p-AKT表达均有降低(P<0.05)且随Gen浓度的增加p-AKT表达逐渐降低。结论 Gen能够调节CIA大鼠FLS增殖与凋亡的平衡,其作用机制可能与下调PI3K/AKT信号传导通路的酪氨酸激酶,抑制AKT的磷酸化有关。
- 张育张学增沈维干许金鑫马莹莹
- 关键词：金雀异黄素CIA大鼠成纤维样滑膜细胞增殖凋亡
- 金雀异黄素对Ⅱ型胶原诱导型关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞分泌白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α的影响被引量：9
- 2009年
- 目的:观察金雀异黄素(genistein,Gen)对Ⅱ型胶原诱导型关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠膝关节成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocyte,FLS)分泌炎症因子白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的影响。方法:采用Ⅱ型胶原注射建立CIA动物模型,用关节炎指数(arthritis index,AI)分析法评估CIA模型是否建立成功。胶原酶消化法分离培养原代FLS,用流式法检测滑膜细胞血管细胞黏附分子-1(vascular cell ad-hension molecule-1,VCAM-1)的表达。在FLS培养液中加入不同浓度的Gen,用酶联免疫吸附测定法检测FLS培养上清中IL-1β和TNF-α的含量。结果:Ⅱ型胶原致敏后3d,大鼠开始出现关节肿胀,AI逐渐增高,至造模后第3周最为明显,与空白对照组比较差异有统计学意义。大鼠滑膜细胞培养至第4代,检测其VCAM-1的表达高达85.5%,提示所培养的细胞为FLS,即B型滑膜细胞。不同浓度的Gen(100、200、400μmol/L)作用于FLS细胞后,细胞培养上清中TNF-α和IL-1β的分泌不同程度地受到抑制,且抑制作用呈剂量依赖性。结论:金雀异黄素能抑制FLS分泌TNF-α和IL-1β,且抑制作用呈剂量依赖性,这可能是其抗CIA大鼠滑膜炎的作用机制之一。
- 高波张育马莉张学增
- 关键词：关节炎金雀异黄素成纤维样滑膜细胞白细胞介素1Β
- 金雀异黄素抗Ⅱ型胶原诱导型关节炎大鼠滑膜血管新生的研究被引量：14
- 2011年
- 目的:研究金雀异黄素(genistein,Gen)对Ⅱ型胶原诱导型关节炎(typeⅡcollagen-induced arthritis,CIA)大鼠关节滑膜血管新生的影响。方法:将40只大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、Gen治疗组、甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)治疗组和Gen+MTX治疗组,每组8只。除空白对照组外,各组大鼠用Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂注射诱导CIA建立大鼠模型。Gen治疗组造模次日开始用药,每天胃内灌注Gen混悬液1mL,剂量为30mg/(kg.d);MTX治疗组造模后用药,每周胃内灌注0.2mg/kg;Gen+MTX治疗组两种药物联合应用;空白对照组和模型对照组每天灌注等量的生理盐水。造模后第6周,取膝关节用免疫组织化学法检测其滑膜的微血管密度,并取血清用Westernblotting检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和基质金属蛋白酶(matrix metallopeptidase,MMP)-1、2、9的表达并计算其相对含量。结果:CIA大鼠模型关节炎指数评分、后肢容积及关节滑膜组织病理情况与正常大鼠比较差异有统计学意义(P<0.05),提示造模成功。Gen可使CIA大鼠关节滑膜新生血管数目明显减少,且滑膜炎症较模型对照组轻,同时还能降低血清中VEGF和MMP-1、2、9蛋白的表达。结论:Gen可能通过抑制VEGF和MMP-1、2、9的表达而发挥抗滑膜血管新生的作用,从而延缓病情的发展。Gen联合MTX治疗效果可能更强。
- 许金鑫张育张学增马莹莹
- 关键词：金雀异黄素血管新生基质金属蛋白酶类滑膜
- RA治疗新靶点——信号转导通路的调节被引量：4
- 2010年
- 类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种常见的慢性多系统性炎症性的自身免疫性疾病,多引起受累关节的破坏。在RA发病过程中,多种RA相关炎性细胞参与其中,如T淋巴细胞、成纤维样滑膜细胞(FLS)和巨噬细胞。目前用抗炎症因子生物制剂抑制RA相关炎性细胞间信号转导,来改善RA的炎性破坏已得到广泛的证实。信号转导通路具有重要的细胞周期调节功能,同时对细胞的发生、发展和凋亡也发挥着重要的作用。大量的实验已证实ERK、p38/MAPK等信号通路的抑制剂能够改善RA病情。通过对RA相关炎性细胞间信号转导通路研究的不断深入,将可能为我们在RA的治疗中开辟一条崭新道路。
- 张学增张育
- 关键词：类风湿关节炎MAPKPI3K/AKT
