王宝恩肝纤维化研究基金(20080017)
- 作品数：8 被引量：19H指数：3
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- Notch／Jagged信号通路在肝纤维化大鼠模型中的动态表达及意义被引量：5
- 2011年
- 目的探讨Notch／Jagged通路在肝纤维化大鼠模型中的动态表达及意义。方法健康雄性SD大鼠42只分为健康对照组和模型组，模型组再按造模后不同时间分为4d、1周、2周、4周、6周、8周等6个亚组，每组6只。模型组腹腔注射二甲基亚硝胺（DMN）诱导大鼠肝纤维化模型，测定不同时间点血清ALT、AST、Alb和HA的变化；肝组织经HE、Masson染色，光学显微镜下观察；采用RT-PCR和免疫组织化学法检测不同时间点肝脏Notch-1、Jagged-1mRNA和蛋白表达。各组间均数比较采用单因素方差分析。结果DMN腹腔注射成功诱导大鼠肝纤维化模型，表现为造模4周后肝小叶结构破坏或消失，汇管区或中央静脉有较粗大的纤维条索包绕肝组织形成假小叶。ALT、AST、Alb、HA均于造模后4d开始上升，并于4周达到最高峰，且明显高于健康对照组（F值分别为83．10，104．63，54．24，203．81；均P〈0．05）。Notch-1、Jagged-1mRNA及蛋自在正常肝组织中仅少量表达，模型组表达显著增加（F值分别为282．44，369．14，374．17，256．14；均P〈0．01），且与肝纤维化分级和转化生长因子B1（TGFβ1）的表达量呈正相关（r分别为0．821，0．917，0．767，0．844；P％0．01）。结论Notch／Jagged信号通路可能参与肝纤维化的发生，并与肝纤维化的发展过程和严重程度密切相关。
- 叶超陈永平金晓芝程瑗戴志娟林镯
- 关键词：疾病模型信号传导转化生长因子Β1
- β连环蛋白在大鼠肝纤维化模型中的动态表达及意义被引量：2
- 2011年
- 目的研究wnt信号通路的核心因子β连环蛋白(β-catenin)在肝纤维化大鼠模型中的动态表达及意义。方法腹腔注射二甲基亚硝胺(DMN)诱导大鼠肝纤维化模型。分别在造模后4 d、1、2、4、6、8周等不同时间点测血清ALT、AST、TBil、Alb的变化,采用HE及Masson染色观察肝组织学变化,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同时间点肝脏β-catenin mRNA的表达。结果正常肝组织中有少量β-catenin表达,随着肝纤维化的发展,β-catenin的表达量逐渐增加,至第4周达到高峰,第8周略有下降,但仍高于正常。β-catenin的表达量与肝脏纤维化分期(S0～S4)呈正相关(rs=0.926,P<0.001)。结论β-catenin可能参与肝纤维化的发生,并与纤维化的发展过程密切相关。
- 叶超陈永平戴志娟李文渊林镯程瑗金晓芝
- 关键词：Β连环素信号传导
- 半乳糖凝集素-3在大鼠肝纤维化组织中的表达及意义被引量：3
- 2012年
- 目的研究半乳糖凝集素-3(galectin-3,Gal-3)、转化生长因子β1(transforming growth factor beta-1,TGF-β1)、a-平滑肌肌动蛋白(a-smooth muscle actin,a-SMA)在肝纤维化大鼠模型中的动态表达及意义。方法雄性SD大鼠随机分为健康对照组6只,肝纤维化模型组24只,采用二甲基亚硝胺(DMN)腹腔注射制备肝纤维化模型。分别在造模后2、4、6、8周门静脉采血检测血清ALT、AST、Alb,采用HE及Masson染色观察肝组织学变化,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同时间点肝脏galectin-3 mRNA的表达。结果正常肝组织中有galectin-3低表达,2周即升高,4周达高峰,6周下降,差异有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,galectin-3水平与TGF-β1、a-SMA呈正相关(r=0.882～0.963,P<0.01)。结论 Galectin-3可能与肝纤维化的发生发展过程密切相关。
- 苏林红陈达之王春莹陈永平刘俊
- 调节性T细胞对肝星状细胞增殖及透明质酸分泌的影响被引量：5
- 2012年
- 目的研究CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)对肝星状细胞(HSC)增殖及透明质酸(HA)分泌的影响。方法 MASC法分离慢性乙型肝炎患者血中CD4+CD25+Treg细胞;传代培养人HSC LX-2(空白组),不同比例CD4+CD25+Treg细胞与HSC直接共培养(共培养组),不同剂量的重组人转化生长因子(TGF)β1和HSC共培养(对照组);使用CCK-8法检测HSC增殖、放射免疫法检测HA分泌情况。组间比较采用单因素方差分析。结果共培养组与空白对照组(0.6623±0.02702)相比,在比例为2.5∶1时HSC增殖最为明显(0.6836±0.00560),比例为1∶1、5∶1及7.5∶1时HSC增殖均明显减少,且随着比例升高其增殖水平逐渐降低,各组与空白对照组相比有统计学差异(F=11.421,5.272,84.514,490.639;均P<0.05)。不同浓度TGFβ1对照组的HSC均比空白对照组(0.3883±0.00189)细胞增殖明显(0.6720±0.00753,0.6773±0.00585,0.5373±0.00387),并于8 ng/μl时增殖达到高峰,各亚组与空白组相比有统计学差异(F=196.175,799.624,236.461;P<0.01)。共培养组与对照组中细胞上清液中HA浓度与HSC增殖呈正相关(r=0.661、0.871,均P<0.01)。结论 CD4+CD25+Treg细胞促HSC增殖并促进其分泌HA,并在体外证实CD4+CD25+Treg细胞在慢性乙型肝炎进展过程中发挥重要作用。
- 陆小蒟陈永平阳韬程瑗金晓芝申春燕刘俊王春莹王晓东林镯
- 关键词：T淋巴细胞肝星状细胞
- SnoN蛋白在肝纤维化大鼠肝组织中的表达及其意义被引量：3
- 2011年
- 目的观察SnoN蛋白在大鼠肝纤维化进展过程中的动态表达变化及其意义。方法 SD大鼠分两组:正常对照组6只,模型组24只,二甲基亚硝胺(DMN)腹腔注射制备大鼠肝纤维化模型。造模后分别在第2周、4周、6周、8周取大鼠血及肝脏标本,HE和Masson染色并光镜下观察各组大鼠肝组织病理变化;RT-PCR检测SnoN、Smurf 2、TGF-β1及Ⅰ型胶原纤维(COL-1)在造模过程中的动态变化。结果模型组第4周、6周肝纤维化明显;模型组血清ALT、AST升高,第4周时达高峰;Alb逐步下降,6周时最低,各时间点与对照组比较均有统计学差异(P<0.005)。造模后,SnoN表达进行性降低,第8周达到最低,Smurf 2表达量逐渐增加,在第6周达最高峰,且明显高于对照组,各模型组与对照组相比均具有显著差别(P<0.05或0.01);TGF-β1表达水平逐步增高,于第4周时达高峰,各模型组与对照组相比均具有统计学差异(P<0.01)。结论 SnoN蛋白表达的降低可能是肝纤维化中的一个重要环节,值得进一步深入研究。
- 杨壮智阳韬陈永平
- 关键词：肝纤维化二甲基亚硝胺
- 原肌球蛋白1在大鼠肝纤维化模型及肝星状细胞中的动态表达及其意义被引量：1
- 2011年
- 目的观察原肌球蛋白1（TPMl）在大鼠肝纤维化模型及肝星状细胞（HSC）中的动态表达。方法将SD大鼠随机分为正常对照组（6只）和模型组（24只）。二甲基亚硝胺腹腔注射建立大鼠肝纤维化模型，于第2、4、6、8周（每组各6只）门静脉采血及取肝组织标本；HSC-T6细胞设对照组及刺激组，刺激组以5ng／ml转化生长因子βl（TGFβ1）作用48h。苏木素－伊红和Masson染色观察肝组织病理变化，RT-PCR、免疫组织化学和Westemblot检测组织与细胞中TPMl，TGFβ1及α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的mRNA和蛋白的表达，以及TPMl在肝组织中的定位。两样本均数比较采用独立样本t检验；相关性采用Pearson直线相关分析。结果成功建立肝纤维化模型，TPMl在正常肝组织中低表达于汇管区血管内皮上，在模型组TPMl强表达于增生的肝纤维间隔，TPMl及α－SMA的mRNA及蛋白的表达在肝纤维化过程中均逐渐升高，6周时高于其他各组，8周时下降，与对照组相比，差异均有统计学意义（P〈0．05）；TGFβ1先升高，4周时高于其他各组，6周时下降（P〈0．05）；相关性分析表明TPMl与α－SMA和TGFβ1的表达均呈正相关（rs=0．688和rs=0．692，P〈0．01）；HSC－T6细胞中，TGFβ1刺激组TPMl及α－SMA的mRNA表达均升高，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论TPMl参与了肝纤维化的发生和发展过程，有望成为肝纤维化诊断与治疗的新靶点。
- 刘俊王春莹陈永平林镯阳韬陆小蒟
- 关键词：肝硬化原肌球蛋白转化生长因子ΒΑ平滑肌肌动蛋白
- 膜联蛋白Ⅰ在大鼠肝纤维化组织中的表达及意义
- 2011年
- 目的检测膜联蛋白Ⅰ(AnnexinⅠ)、转化生长因子(TGF)β1、α–平滑肌肌动蛋白(α–SMA)在大鼠肝纤维化组织中的表达,阐明AnnexinⅠ在肝纤维化中的作用机制。方法雄性SD大鼠随机分为健康对照组6只,肝纤维化模型组24只,采用二甲基亚硝胺(DMN)腹腔注射制备肝纤维化模型。肝纤维化模型组2、4、6、8周各6只大鼠门静脉采血检测血清ALT、AST,采用HE及Masson染色观察肝组织学变化,应用反转录聚合酶链反应(RT–PCR)检测肝组织AnnexinⅠ、TGFβ1、α–SMA mRNA表达,Western Blot法检测肝组织AnnexinⅠ表达。结果与对照组比较,肝纤维化模型组血清ALT、AST水平随损伤时间延长逐渐升高,4周达高峰,6周下降,差异有统计学意义(P<0.05);正常肝组织有AnnexinⅠ、TGFβ1、αSMA低表达,2周即升高,4、6周较明显,8周下降,肝纤维化模型组与对照组在2、4、6、8周各时间点差异有统计学意义(P<0.05)。结论 AnnexinⅠ对肝脏可能有保护作用,为临床肝纤维化的防治提供新策略。
- 王春莹刘俊林镯陆小蒟阳韬陈永平
- 关键词：膜联蛋白A1转化生长因子Β1肌动蛋白类
- 骨成形蛋白7对大鼠肝星状细胞增殖的抑制作用
- 2012年
- 目的研究骨成形蛋白7（BMP7）对大鼠肝星状细胞（HSC）增殖的抑制作用。方法体外培养HSC—T6细胞，分为对照组、TGFβ1组、TGFβ1＋BMP7组和TGFβ1＋BMP7＋Noggin组。RT—PCR法检测果蝇蛋白质1（smadl）、α-平滑肌肌动蛋白（mSMA）、gremlin和纤维连接蛋白（FN）mRNA的表达，Western印迹法检测磷酸化smadl／5／8（P-smadl／5／8）、α-SMA、gremlin蛋白的表达。采用单因素方差分析、LSD检验、Dunnett T3检验和Pearson直线相关分析进行统计学处理。结果对照组HSC—T6细胞中可见P—smadl／5／8、α-SMA、gremlin及FN的表达，TGFβ1刺激后表达量明显增加，差异有统计学意义（均P〈0．05）。与TGFβ1组比较，TGFβ1＋BMP7组α—SMA、gremlin及FN表达下调，但P—smadl／5／8蛋白表达增加（1．613±0．031比2．503±0．014±34．89，P〈0．05）。TGFβ1＋BMP7＋Noggin组α-SMA、gremlin及FN表达较TGFβ1＋BMP7组增加，而P-smadl／5／8蛋白表达下调（t=34．05，P〈0．05）。smad1mRNA在各组表达均无显著变化。结论BMP7对α—SMA、gremlin和FN均有较强的抑制作用。
- 王春莹陈达之刘俊李春艳林镯阳韬陆小蒟陈永平
- 关键词：骨形态发生蛋白7磷酰化纤连蛋白类
