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国家自然科学基金(30070344)

作品数：12 被引量：21H指数：3
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相关机构：第二军医大学济南军区总医院福建医科大学更多>>
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文献类型

  • 12篇期刊文章
  • 4篇会议论文

领域

  • 16篇医药卫生

主题

  • 14篇细胞
  • 10篇肝癌
  • 9篇肝癌细胞
  • 9篇癌细胞
  • 8篇基因
  • 7篇乙型肝炎病毒
  • 7篇肝炎病毒
  • 7篇病毒
  • 6篇乙型
  • 6篇乙型肝炎
  • 6篇细胞癌
  • 6篇肝细胞
  • 6篇肝细胞癌
  • 6篇肝炎
  • 6篇P53
  • 4篇蛋白
  • 3篇抑癌
  • 3篇抑癌基因
  • 3篇生长抑制因子
  • 3篇生物学

机构

  • 16篇第二军医大学
  • 1篇福建医科大学
  • 1篇济南军区总医...

作者

  • 16篇朱明华
  • 11篇祝峙
  • 8篇倪灿荣
  • 8篇林静
  • 8篇陈颖
  • 7篇曲建慧
  • 6篇李芳梅
  • 5篇刘晓红
  • 4篇王力
  • 3篇罗志刚
  • 3篇曹晓哲
  • 3篇李咏梅
  • 3篇于观贞
  • 2篇曲建慧
  • 2篇赵海华
  • 1篇文军慧
  • 1篇郑建明
  • 1篇余党会
  • 1篇史敏

传媒

  • 4篇中华病理学杂...
  • 3篇肿瘤
  • 1篇国外医学（肿...
  • 1篇第二军医大学...
  • 1篇癌症
  • 1篇中华肝脏病杂...
  • 1篇南方医科大学...

年份

  • 8篇2009
  • 1篇2008
  • 2篇2006
  • 2篇2004
  • 2篇2003
  • 1篇2002
共 12 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
HBV对肝癌细胞增殖与凋亡的双重作用
为了进一步观察HBV导致原发性肝癌发生的机制,首先观察了HepG2细胞以及稳定转染了HBV质粒的HepG2.2.15细胞某些生物学活性如细胞周期、细胞凋亡的差异,Western Blot方法检测了细胞中P53蛋白表达情况...
曲建慧林静祝峙倪灿荣李芳梅朱明华
关键词：原发性肝细胞癌抑癌基因P53P21
不同p53状态的肝癌细胞系DNA损伤修复能力的比较被引量：5
2003年
目的　观察不同 p5 3状态的肝癌细胞在DNA损伤因素存在下 ,探讨 p5 3在肝细胞癌发生过程中的作用。 方法　选用内源性表达野生型 p5 3、突变型 p5 3、p5 3全基因缺失的HepG2、PLC /PRF / 5、Hep3B肝癌细胞系 ,将含有 p5 3结合序列的CAT报告基因质粒分别转染各细胞 ,通过ELISA方法检测报告基因CAT活化情况 ,观察 p5 3功能状态 ;用细胞生长曲线比较不同p5 3状态的细胞生长速度的差异 ;给予一定剂量的紫外线照射 ,检测各细胞程序外DNA损伤修复 (UDS)能力 ;观察紫外线照射后细胞克隆形成情况 ,反映不同细胞系在紫外线照射后细胞存活率的不同。结果　报告基因CAT在HepG2细胞表达最强 ,而在PLC /PRF / 5、Hep3B肝癌细胞均处于较低水平 ,说明HepG2细胞具有功能性的p5 3表达 ;HepG2细胞生长速度明显慢于其他两种细胞 ;紫外线照射后 ,HepG2具有较好的DNA损伤修复能力以及较高的细胞生存率。 结论　野生型 p5 3具有抑制肝癌细胞生长、保持细胞良好的DNA损伤修复的功能。
曲建慧朱明华文军慧林静李芳梅倪灿荣
关键词：P53肝癌细胞DNA损伤DNA修复能力细胞基因
抑癌基因ING1不同剪接体差异性调节肝癌细胞HepG2生长
生长抑制因子(inhibitor of growth 1,ING1)最初是通过将人乳腺癌上皮细胞的cDNA与正常上皮细胞cDNA进行消减杂交,然后结合体内选择技术而克隆出的一个新的抑癌基因。在乳腺癌、胶质母细胞瘤、胃癌、...
祝峙李咏梅罗志刚陈颖朱明华
关键词：生长抑制因子肝细胞癌细胞周期
文献传递
乙型肝炎病毒X蛋白和p14^ARF依赖性、非依赖性途径对肝癌细胞生长的影响被引量：1
2009年
目的探讨乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)是否通过p14ARF途径影响肝癌细胞生长及其作用机制。方法将HBx及p14ARF单转染及共转染含野生型p53但不表达p14ARF的肝癌细胞株HepG2。实验分为pcDNA3、pcDNA3HBx、pcDNA3p14ARF、pcDNA3HBx+pcDNA3p14ARF4组。通过流式细胞仪比较各转染组HepG2细胞凋亡、细胞周期的变化情况。用含p53结合位点p21WAF1启动子荧光素酶活性检测和Western blotting观察各转染组细胞p14ARF、MDM2、p53、p21WAF1蛋白表达水平的变化。结果HBx及p14ARF单转染及共转染含野生型p53但无p14ARF表达的HepG2细胞,单转染HBx及p14ARF组其细胞凋亡率(14.11%、13.72%)、G0/G1期阻滞细胞数(63.62%、61.75%)、p21WAF1启动子荧光素酶活性(1.25±0.05、1.09±0.06)及p53、p21WAF1蛋白的表达较对照组(10.66%、57.42%、0.77±0.03)明显升高,而共转染组与单转染p14ARF组相比其p14ARF蛋白表达及上述各项指标(18.61%、66.74%、3.53±0.43)又进一步升高。结论HBx通过依赖及非依赖p14ARF途径诱导p53表达从而导致激活p21WAF1,进而引起细胞周期G0/G1期的阻滞及细胞凋亡的增加。
余党会林静曲建慧祝峙李芳梅倪灿荣朱明华
关键词：P14^ARFP21^WAF1
生长抑制因子抑癌基因家族生物学功能及其在肿瘤中的研究进展
2009年
生长抑制因子（inhibitor of growth，ING）家族是新近发现的一组重要的肿瘤抑制基因。目前发现ING基因家族至少有5个成员：ING1～ING5，每个成员可能都具有多个不同的mRNA转录剪接体。近年来，ING基因家族的抑癌功能及其机制正受到越来越多的关注。
祝峙朱明华
关键词：生长抑制因子肿瘤抑制基因生物学功能ING1MRNA
P53与乙型肝炎病毒增强子Ⅰ上游P53样应答元件结合序列关系研究被引量：2
2004年
背景与目的:在前期工作中,我们经计算机序列分析发现,在乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus,HBV)基因组增强子Ⅰ上游1047～1059bp存在P53样应答元件结合序列5'-TGCC(G)TTGCCT-3',体外实验应用凝胶迁移方法(EMSA和EMSSA)发现这段序列与P53蛋白能够进行特异性结合。本实验拟观察肝癌细胞中P53蛋白与HBV基因组P53样应答元件结合序列之间的关系。方法:报告基因质粒pX-CAT上游为X基因增强子和启动子序列,其中含有P53样应答元件结合序列5'-TGCGTTGCCT-3'。首先用PCR方法将pX-CAT质粒中5'-TGCGTTGCCT-3'进行点突变,成为5'-TGTATTGTAT-3',以破坏P53样应答元件结合序列。将pX-CAT和变异后的pX-CAT(mpX-CAT)分别单独或与pCMV-p53质粒共转染HepG2细胞,通过检测报告基因CAT的活化情况,观察P53蛋白与这段DNA序列的作用关系。将HBV基因P53样应答元件结合序列反向构建于真核表达质粒pZeoSV2中(αpZeoXP),转染HepG2.2.15细胞并稳定筛选,以封闭HBV基因上P53样结合位点,观察细胞中P53/P21蛋白表达的改变,以及细胞周期、细胞凋亡的变化。结果:HepG2细胞中,报告基因CAT活性在pCMV-p53与pX-CAT共转染组较pX-CAT单独转染组明显升高(1.353vs0.738,P<0.05),而mpX-CAT单独转染组CAT活性则明显降低(0.304),即使与pCMV-p53共转染CAT活性?
曲建慧朱明华林静倪灿荣李芳梅祝峙于观贞
关键词：P53乙型肝炎病毒
HBx蛋白羧基端30个氨基酸缺失对肝癌细胞生物学行为的影响被引量：3
2006年
目的:探讨羧基端缺失了30个氨基酸的乙型肝炎病毒X蛋白(hepatitis B virus X protein,HBx)突变体ΔHBx和野生型HBx对肝癌细胞Huh7生物学行为的影响。方法:脂质体介导pcDNA3ΔHBx和pcDNA3HBx重组体转染人HBV(-)的肝癌细胞Huh7。PCR扩增Neo基因及Western blot检测转染重组体。运用细胞生长曲线绘制、平板克隆形成、流式细胞仪和裸鼠成瘤实验对转染pcDNA3ΔHBx、pcDNA3HBx和pcDNA3的细胞生物学活性进行检测。结果:pcDNA3ΔHBx组细胞生长速度较pcDNA3HBx组和pcDNA3组减慢,其倍增时间延长;pcDNA3ΔHBx组克隆形成率较pcDNA3HBx组和pcDNA3组下降;细胞周期检测显示pcDNA3ΔHBx表达使Huh7细胞G0/G1期→S期的进程明显减慢。结论:HBx羧基端缺失了30个氨基酸的突变体比野生型HBx具有明显抑制细胞增殖的能力,提示该区域对于HBx功能发挥起着至关重要的作用。
刘晓红朱明华曹晓哲郑建明陈颖
关键词：HUH7细胞
乙型肝炎病毒X蛋白羧基端30个氨基酸缺失突变体转染Huh7细胞的基因表达谱和蛋白质组差异分析被引量：1
2006年
目的:本课题组既往研究显示乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)羧基端30个氨基酸的缺失突变雄(△HBx)具有明显不同于野生型HBx(wtHBx)的细胞生物学效应,因此,本研究进一步探讨△HBx和wtHBx导致Huh7细胞差异生物学效应的分子基础。方法:采用cDNA芯片和双向凝胶电泳方法,从基因和蛋白质组水平,对分别转染了△HBx和wtHBx的Huh7细胞进行检测。结果:cDNA芯片检测结果显示,对比wtHBx组,△HBx组存在193个基因(0．95％)的显著性改变,154和39个基因分别显示表达上调和下调。双向凝胶电泳结果显示,对比wtHBx组,△HBx组存在147个蛋白差异点。基因表达谱和质谱分析结果显示,△HBx组差异表达的基因和蛋白主要涉及宿主细胞的基因转录、细胞连接、信号转导和代谢、免疫应答等过程及癌基因和抑癌基因。结论:HBx缺失突变体对细胞基因和蛋白质的影响是广泛的,涉及肝组织特异性的代谢基因的变化。这些差异表达的基因和蛋白质在HBx突变致癌过程中是否发挥了重要的作用,需要进一步的研究证实。
刘晓红王力赵海华陈颖朱明华
关键词：HUH7细胞
抑癌基因ING1不同剪接体差异性调节肝癌细胞HepG2生长被引量：1
2009年
生长抑制因子（inhibitor of growth1，ING1）是通过将人乳腺癌上皮细胞的cDNA与正常上皮细胞cDNA进行消减杂交，然后结合体内选择技术而克隆出的抑癌基因。在乳腺癌、胶质母细胞瘤、胃癌、结直肠癌、肝癌、卵巢癌等多种原发性肿瘤中，ING1基因均呈不同程度的下降表达。ING1定位于人染色体13q33—34，含有3个外显子和2个内含子，通过不同的转录剪接，
祝峙李咏梅罗志刚陈颖朱明华
关键词：肝癌细胞HEPG2生长抑制因子抑癌基因剪接体
SMMC—7721肝癌细胞系中p53与乙型肝炎病毒相互作用的研究被引量：1
2004年
目的 进一步观察乙型肝炎病毒(HBV)与p53的作用关系,以便更深入地了解HBV对原发性肝细胞癌发生的影响。方法 选用SMMC-7721肝癌细胞系(表达野生型p53,HBV阴性)为靶细胞,采用脂质体转染法,将pCMVp53单独或者与野生型HBV质粒(pCMVHBVa)、变异型HBV质粒(pcMVHBVb)共转染细胞,用annexin V-FITC标记及流式细胞仪检测细胞凋亡的变化;各组分别共转染报告基因:PG13-CAT、含有p21基因启动子的p21-LUC,通过CAT酶以及荧光素酶的检测,观察p53活性情况以及对p21启动子的活化情况;western blot方法检测各转染组p53蛋白表达情况。结果 单独的pCMVp53质粒转染SMMC-7721细胞系能够促进p21报告基因的表达,细胞凋亡率升高;HBVa质粒与pCMVp53共同转染可使细胞中p53蛋白表达水平、p53对报告基因PG13-CAT的活化作用以及对p21基因启动子的激活作用增强,细胞凋亡率增加,细胞生长受到抑制,而与pCMVHBVb共转染时则不能。结论 HBV在细胞内的复制可能通过使p53蛋白半衰期延长,及p53蛋白的表达及作用增强,促进p53下游基因p21的转录,导致细胞凋亡率增强,细胞生长受到抑制;p53可能通过某种机制对HBV的复制具有一定的促进作用。
曲建慧朱明华林静倪灿荣李芳梅祝峙于观贞
关键词：SMMC-7721细胞P53乙型肝炎病毒相互作用
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