辽宁省教育厅高等学校科学研究项目(20061011)
- 作品数：6 被引量：16H指数：2
- 相关作者：郑锐秦晓松李文洁康健吴莎更多>>
- 相关机构：中国医科大学中国医科大学附属第一医院更多>>
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- 抑制Src酪氨酸激酶对非小细胞肺癌细胞外信号调节激酶影响的研究
- 2011年
- 目的:探讨抑制Src酪氨酸激酶活化对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞外信号调节激酶的影响及其作用。方法:采用NSCLC细胞株进行细胞培养,分别给予不同浓度的Src酪氨酸激酶抑制剂。蛋白质印迹检测NSCLC细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)磷酸化以及抑制Src酪氨酸激酶活化对NSCLC细胞ERK1/2磷酸化的影响。MTT法检测抑制Src酪氨酸激酶活化对NSCLC细胞体外增殖的影响。软琼脂糖集落形成实验检测抑制Src酪氨酸激酶对NSCLC细胞克隆形成的影响。结果:选用的NSCLC细胞都存在ERK1/2磷酸化。抑制Src酪氨酸激酶对PC-9和A549细胞ERK1/2磷酸化呈现浓度依赖性抑制作用,亚微摩尔水平Src酪氨酸激酶抑制剂几乎完全抑制PC-9和A549细胞ERK1/2磷酸化。Src酪氨酸激酶抑制剂对PC-9和A549细胞体外增殖表现出明显的浓度依赖性抑制作用(F=5.072,P=0.004;F=4.368,P=0.008)。0.1、0.3和1.0μmol/L的Src酪氨酸激酶抑制剂对PC-9和A549细胞增殖的抑制率分别为14.7%、47.1%、61.3%和19.8%、24.2%、30.6%。而其余3种NSCLC细胞ERK1/2磷酸化以及体外增殖对Src酪氨酸激酶抑制剂反应不敏感。Src酪氨酸激酶抑制剂明显抑制PC-9和A549细胞的克隆形成(t=11.746,P<0.001;t=5.237,P<0.001)。结论:抑制Src酪氨酸激酶能够抑制PC-9和A549细胞ERK1/2磷酸化,从而抑制PC-9和A549细胞体外增殖。
- 郑锐秦晓松李文洁康健
- 关键词：SRC酪氨酸激酶细胞外信号调节激酶1/2增殖
- 抑制Src酪氨酸激酶对非小细胞肺癌细胞分泌MMP-2和MMP-9的影响被引量：10
- 2011年
- 背景与目的 Src酪氨酸激酶和基质金属蛋白酶在肺癌的浸润和转移中发挥重要作用。本研究旨在探讨抑制Src酪氨酸激酶对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞分泌基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase2,MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase9,MMP-9)以及NSCLC细胞侵袭浸润的影响。方法采用ELISA法检测NSCLC细胞(PC14PE6、H226、PC-9、A549)培养上清中MMP-2和MMP-9含量以及抑制Src酪氨酸激酶对NSCLC细胞分泌MMP-2和MMP-9的影响;Boyden chamber法检测抑制Src酪氨酸激酶对NSCLC细胞体外侵袭浸润的影响。结果 NSCLC细胞中PC14PE6和H226中MMP-2和MMP-9的水平较高,A549细胞中MMP-9的水平较低,而MMP-2和MMP-9在PC-9细胞中检测不到。Src酪氨酸激酶抑制剂对PC14PE6中的MMP-2水平以及PC14PE6、H226和A549细胞中的MMP-9水平呈剂量依赖性抑制关系。10μM Src酪氨酸激酶抑制剂使PC14PE6细胞中的MMP-2水平、H226细胞和A549细胞中的MMP-9水平降低50%以上。10μM Src酪氨酸激酶抑制剂对H226细胞中的MMP-2无明显抑制作用。Src酪氨酸激酶抑制剂对4种NSCLC细胞体外侵袭浸润的抑制程度略有差异,但均呈现明显的剂量依赖性抑制作用。3μM Src酪氨酸激酶抑制剂对PC14PE6、H226、A549和PC-9细胞体外侵袭浸润的抑制率分别为79.1%、68.09%、90.96%和96.98%(P<0.001)。结论通过抑制NSCLC细胞分泌MMP-2和MMP-9,抑制Src酪氨酸激酶可降低细胞的体外侵袭浸润能力。
- 郑锐秦晓松李文洁康健
- 关键词：SRC酪氨酸激酶肺肿瘤MMP-2MMP-9
- Src蛋白在肺癌细胞增殖浸润中的作用被引量：5
- 2011年
- 背景与目的 Src蛋白在肿瘤的发生、发展和转移中具有重要作用。本研究旨在探讨Src蛋白在肺癌细胞中的表达活化情况及其对肺癌细胞增殖浸润的影响。方法采用Western blot和免疫沉淀法检测Src蛋白在肺癌细胞株中的表达和磷酸化情况;M法检测抑制Src酪氨酸激酶活化对肺癌细胞体外增殖的影响;Boyden chamber法检测抑制Src酪氨酸激酶活化对肺癌细胞体外侵袭浸润的影响。结果本实验选用的肺癌细胞都存在pp60src的表达,非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞株Src蛋白的自主磷酸化水平(SrcpY418)明显增高,而人小细胞肺癌细胞株SBC5中几乎检测不到SrcpY418。抑制Src酪氨酸激酶活化对肺癌细胞体外增殖呈现出不同的反应,亚微摩尔Src蛋白酪氨酸激酶抑制剂对PC-9和A549细胞体外增殖表现出剂量依赖性抑制作用(P<0.05);而1M Src酪氨酸激酶抑制剂对H226、PC14PE6和RERFLCOK细胞增殖没有明显的抑制作用。Src酪氨酸激酶抑制剂对肺癌细胞体外侵袭浸润呈现明显的剂量依赖性抑制作用(P<0.05)。结论 Src蛋白的活化,而不是过度表达,在NSCLC细胞体外增殖和浸润中发挥着重要作用。
- 郑锐秦晓松李文洁康健
- 关键词：肺肿瘤SRC酪氨酸激酶增殖
- 抑制Src酪氨酸激酶对小鼠肺转移癌的干预作用
- 2011年
- 目的:探讨抑制Src酪氨酸激酶对小鼠肺转移癌的干预作用及其机制。方法:采用雄性严重联合免疫缺陷(SCID)小鼠,敲除NK细胞,建立肺腺癌A549细胞诱导的实验性肺转移癌动物模型。每天给予小鼠口服Src酪氨酸激酶抑制剂,研究抑制Src酪氨酸激酶对实验性肺转移癌的影响;采用免疫组化法研究抑制Src酪氨酸激酶对转移瘤中增生指数(Ki67染色)和微血管密度(CD31染色)的影响。结果:A549细胞在肺表面形成弥漫性的转移性损伤,50mg/kg/d Src酪氨酸激酶抑制剂口服治疗组肺表面比对照组光滑,肺重量明显小于对照组和10mg/kg/d治疗组(P<0.05),而10mg/kg/d治疗组的肺重量和对照组相比没有明显差别。A549细胞接种后35天,对照组小鼠体重显著下降(P<0.01),而治疗组未见小鼠体重明显下降。口服Src酪氨酸激酶抑制剂50mg/kg/d,明显减少肺组织内转移性肺损伤的数目和面积,同时显著减少Ki67阳性的增生性肿瘤细胞数(P<0.001)。结论:抑制Src酪氨酸激酶通过抑制局部增殖和浸润抑制A549细胞诱导的肺转移癌。
- 郑锐秦晓松李文洁吴莎康健
- 关键词：SRC酪氨酸激酶肺转移瘤微血管密度
- 抑制Src酪氨酸激酶对非小细胞肺癌细胞VEGF表达的影响
- 2011年
- 目的:探讨抑制Src酪氨酸激酶对非小细胞肺癌细胞VEGF表达的影响。方法:采用ELISA法检测非小细胞肺癌细胞株培养上清中VEGF表达以及抑制Src酪氨酸激酶对VEGF表达的影响;采用雄性严重联合免疫缺陷(SCID)小鼠,敲除NK细胞,建立非小细胞肺癌细胞诱导的皮下肿瘤和实验性肺转移瘤动物模型,采用免疫组化法研究抑制Src酪氨酸激酶对皮下肿瘤和肺转移瘤中VEGF表达的影响。结果:本实验采用的3种非小细胞肺癌细胞都表达VEGF。0.1μmol/L、0.3μmol/L、1μmol/L和3μmol/L Src酪氨酸激酶抑制剂对H226细胞VEGF表达的抑制率分别为18%、8%、24%和47%,对A549细胞VEGF表达的抑制率分别为14%、23%、50%和43%,对PC-9细胞VEGF表达的抑制率分别为25%、56%、51%和71%。抑制Src酪氨酸激酶明显抑制VEGF在肺转移瘤和皮下肿瘤中的表达。结论:抑制Src酪氨酸激酶能够抑制非小细胞肺癌细胞体外和体内VEGF的表达。
- 郑锐秦晓松李文洁吴莎
- 关键词：SRC酪氨酸激酶非小细胞肺癌肺转移瘤皮下肿瘤VEGF
- 抑制Src酪氨酸激酶对人类肺腺癌小鼠皮下移植瘤的抑制作用及其机制被引量：1
- 2011年
- 目的探讨抑制Src酪氨酸激酶对人类肺腺癌小鼠皮下移植瘤的影响及其机制。方法采用雄性严重联合免疫缺陷（SCID）小鼠，建立肺腺癌PC-9和A549细胞诱导的皮下移植瘤动物模型，采用免疫组织化学法研究抑制Src酪氨酸激酶对肺腺癌皮下移植瘤增生指数（PI）（Ki-67染色）和微血管密度（MVD）（CD34染色）的影响。结果PC-9细胞皮下移植瘤对Src酪氨酸激酶抑制剂非常敏感，治疗组和对照组之间差异有统计学意义（P〈0．01）。10mg·kg^-1·d^-1治疗组和50mg·kg^-1·d^-1治疗组之间差异也有统计学意义（P〈0．01）。停药1周时10mg·kg^-1·d^-1和50mg·kg^-1·d^-1治疗组的抑瘤率分别为33．19％和84．79％。A549细胞皮下移植瘤对Src酪氨酸激酶抑制剂不敏感。在PC-9细胞皮下移植瘤中，50mg·kg^-1·d^-1Src酪氨酸激酶抑制剂治疗组和对照组相比，PI显著降低（P〈0．01）。在A549细胞皮下移植瘤中，PI略有下降（P〉0．05）。在PC-9和A549细胞皮下移植瘤中，50mg·kg^-1·d^-1 Src酪氨酸激酶抑制剂治疗组和对照组相比，MVD均显著降低（P〈0．05）。结论抑制Src酪氨酸激酶通过直接抑制肺腺癌细胞增生和间接抑制血管新生，进而抑制肺腺癌细胞皮下移植瘤生长。
- 郑锐秦晓松李文洁吴莎康健
- 关键词：肿瘤肺肿瘤微血管密度
