目的观察结肠癌HT-29细胞在三维或单层培养条件下细胞形态学、细胞周期、细胞凋亡及对化疗药物5-Fu敏感性的变化。方法分别采用liqu id overlay技术或常规贴壁法对HT-29细胞进行三维或单层培养,通过显微镜观察细胞形态学变化,流式细胞仪测定不同培养方式对细胞周期和凋亡率的影响,并采用rad ial outgrowth测定法或MTT法分别测定三维或单层培养细胞对5-Fu的敏感性。结果三维培养HT-29细胞悬浮生长,形成致密的多细胞球结构,中心出现坏死区,细胞间有较多的微绒毛、紧密连接、桥粒等结构,而单层培养HT-29细胞呈单层贴壁生长,未见紧密连接、桥粒等连接结构;与单层培养细胞相比,三维培养HT-29细胞G1期比例明显升高[(64.95±0.59)%对(36.77±0.51)%,P<0.01]、细胞自发性凋亡率降低[(0.99±0.12)%对(4.79±0.49)%,P<0.01]、对5-Fu产生明显耐药。结论三维培养HT-29细胞在细胞形态学、细胞周期、细胞凋亡等方面与单层培养细胞存在明显差异,可能是导致结肠癌多细胞耐药的重要原因。
