国家自然科学基金(30672332) 作品数:3 被引量:0 H指数:0 相关作者: 刘洁 钟鸣 郭艳 于阳阳 宫雁冰 更多>> 相关机构: 中国医科大学 北京大学 沈阳军区总医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 辽宁省自然科学基金 辽宁省教育厅高等学校科学研究项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
人成釉细胞瘤中端粒酶反转录酶启动子区的DNA甲基化 2007年 目的研究成釉细胞瘤(ameloblastoma,AB)中 hTERT 启动子区的 DNA 甲基化,并探讨其生物学意义。方法选取新鲜标本 AB 12例,同时用11例正常黏膜做对照观察,用甲基化特异PCR 检测上述组织中人类端粒酶反转录酶(human telomerase reverse transcripase,hTERT)启动子区的DNA 甲基化。结果 AB、正常黏膜中 hTERT 启动子区的 DNA 非甲基化阳性分别为4例(4/12)和6例(6/11)。AB、正常黏膜中 hTERT 启动子区的 DNA 甲基化阳性分别为11例(11/12)和3例(3/11),其中4例 AB 和1例正常黏膜同时表现 hTERT 启动子区 DNA 的甲基化和非甲基化。结论AB 的 hTERT 启动子区的 DNA 甲基化比正常黏膜常见且有意义;hTERT 启动子的甲基化可能对hTERT 基因起调节作用。 钟鸣 阎英 王洁 刘洁 李乐 宫雁冰关键词:成釉细胞瘤 DNA甲基化 CPG岛 绿色荧光蛋白-CCNG2表达载体的构建及鉴定 2011年 目的为进一步探讨细胞周期蛋白G2(CCNG2)基因功能奠定基础。方法以成人脑cDNA文库为模板,PCR扩增人CCNG2基因,In-Fusion技术定向克隆到pENTR1A中,酶切测序鉴定后重组到pcDNA6.2TM/EmG-FP-DEST Gateway载体,构建pcDNA6.2-EmGFP-G2。将鉴定正确的质粒瞬时转染人舌鳞癌细胞Tca-8113,24 h后观察,定量PCR检测CCNG2 mRNA表达。结果扩增得到1 032 bp的基因片段,经测序验证与GenBank中人CCNG2序列相符;pcDNA6.2-EmGFP-G2经酶切和测序鉴定无误。转染Tca-8113后,荧光信号除在胞质中表达外,在部分细胞的胞核DAPI染色弱信号区浓聚。转染该重组质粒后CCNG2 mRNA表达水平显著增高。结论成功构建了以绿色荧光蛋白作为报告基因的CCNG2表达载体,为进一步研究CCNG2基因功能奠定了基础。 刘洁 钟鸣 李自娟 朱莉 郭艳 任美思关键词:绿色荧光蛋白 基因载体 成釉细胞瘤中心体的检测及意义 2009年 目的:检测成釉细胞瘤(AB)中心体的改变,分析其与细胞DNA含量及细胞增殖能力的关系,探讨中心体异常与AB生物学行为的相关性。方法:采用免疫荧光及免疫组化方法检测101例AB、5例成釉细胞癌、10例正常口腔黏膜及10例口腔鳞癌(OSCC)的中心体状况和ki-67的表达,检测细胞DNA含量,采用SPSS11.0软件包对数据进行统计学分析。结果:①29.7%的AB和70.0%的OSCC表现出中心体异常,而正常口腔黏膜上皮细胞无中心体异常表现(χ2=165.905,P=0.000)。②AB细胞DNA含量平均为15420.37,高于正常口腔黏膜组,低于OSCC组(F=16.523,P=0.000)。③AB中心体异常组和OSCC中心体异常组细胞DNA含量间存在显著差异,且均与正常口腔黏膜组存在显著差异(F=10.222,P=0.000)。AB及OSCC的中心体异常组与中心体正常组间也存在显著差异(分别为F=40.901,P=0.000和F=7.863,P=0.023)。④ABki-67LI平均为3.41,且随AB的复发,与恶变有增强的趋势(F=4.344,P=0.017)。⑤AB中心体的异常与ki-67的表达相关(r=0.341,P=0.006),但细胞DNA含量与ki-67LI无相关(r=0.156,P=0.218)。结论:部分AB中存在中心体的异常,与细胞DNA含量的增多有关,并可能与AB基因组不稳定相关。 洪岩松 于阳阳 钟鸣 刘洁 魏振辉 郭艳 张波 侯琳关键词:成釉细胞瘤 中心体 DNA 肿瘤生物学行为 免疫荧光