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翻译后修饰可能影响黄瓜花叶病毒2b蛋白抑制子活性及稳定性: 2011年; 黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)编码的2b蛋白具有RNA沉默抑制子功能,为了研究翻译后修饰对2b功能的影响,利用反向PCR定点突变方法对CMV-Q株系2b蛋白的1个预测的磷酸化位点(S40)和2个预测的泛素化/SUMO化位点(K22,K39)进行了点突变,同时将点突变体插入植物表达载体。通过农杆菌共注射法对3个2b突变体的抑制子活性进行了分析,结果证明,当S40突变为A(2bS40A)后,2b抑制局部和系统沉默的活性均大幅降低;当K22突变为R(2bK22R)后,2b的抑制子活性无明显变化;而将K22和K39均突变为R(2bK22R/K39R)后,2b抑制系统沉默的活性则大幅减弱。对叶片中2b突变体的蛋白含量的Western blotting检测表明,与野生型2b蛋白相比,2bK22R在植物中积累水平变化不大,而2bS40A和2bK22R/K39R的蛋白积累量则明显降低,说明K39和S40位点在维持2b蛋白的抑制子活性及其在植物细胞中的稳定性方面起重要作用。; 李沫贾燕涛方荣祥; 关键词：黄瓜花叶病毒翻译后修饰

番茄中一个LSm1蛋白同源基因LeLSm1的克隆及表达分析被引量：1: 2007年; 从番茄品种超级大明星中克隆LSm1蛋白同源基因LeLSm1。LeLSm1基因全长cDNA共有1 038个核苷酸,包含一个387个核苷酸的编码区,以及318个核苷酸的5′非编码区和333个核苷酸的3′非编码区,编码一个含128个氨基酸的蛋白质,分子质量为14.5 ku,等电点为4.94。LeLSm1编码的氨基酸序列包含LSm1蛋白的保守功能域,与截形苜蓿、拟南芥和水稻等植物的类似LSm蛋白具有高度的同源性,在氨基酸水平上的一致性依次为82.8%、82.0%和72.1%。用PCR方法克隆了LeLSm1基因,其全长转录区共4 751 bp,其中包含5个外显子和4个内含子。Southern杂交结果显示,LeLSm1是单拷贝基因。半定量RT-PCR分析表明,LeLSm1在番茄五叶期和结果期的根、茎、叶以及花和果实中均有表达,且表达量无明显差异,是一个组成型表达基因。; 蒙姣荣陈本勇何小丹陈保善; 关键词：番茄基因克隆

番茄叶片cDNA文库的构建及质量评价被引量：4: 2014年; 黄瓜花叶病毒（Cueutubermosaicvirus，CMV）是番茄病毒病的主要病原之一。为了研究CMV与番茄相互作用的分子机制，本研究以受CMV侵染的番茄叶片为材料，构建了番茄的cDNA文库。文库总库容量为2．346×10^6cfu，其中0．5～1kb片段文库库容量为1．02×10^6cfu；1～2kb片段文库库容量为8．56×10^5cfu；大于2kb片段文库库容量为4．7×10^5 cfu。三个子文库各检测20个克隆，重组率为100％。随机挑取30个克隆进行测序，获得29条有效序列，有23条序列包含完整的开放阅读框，表明获得的文库质量较高。高质量番茄cDNA文库的获得，为研究CMV一番茄相互作用奠定了基础。; 曾泉宁小清潘瑞兰蒙姣荣陈保善; 关键词：黄瓜花叶病毒番茄 CDNA文库

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国家重点基础研究发展计划(2006CB101906)