海南省自然科学基金(313077)
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
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- 相关机构：中国热带农业科学院海南医学院海南大学更多>>
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- qRT-PCR分析莱茵衣藻氮、硫同化相关基因的表达
- 2014年
- 实验发现,缺氮、缺硫的环境有利于莱茵衣藻油脂的积累,说明与氮、硫同化相关的基因也与油脂合成有着密切的关系.分析了氮、硫同化通路相关基因,选择氮同化相关的6个基因（NAR3、NAR1.1、NII1、NIA1、NIT2、AOX1）以及硫同化相关的6个基因（SULP1、SIR1、SLT1、ARS1、SULTR1、ATS1）进行qRT-PCR分析.对莱茵衣藻CC124以及CC425藻株分别进行缺氮、缺硫处理,Trizol法连续提取4d的RNA作为模板,进行实时荧光定量PCR检测基因的表达水平.结果发现,这12种基因均较对照上调表达,其中,莱茵衣藻氮、硫运载体基因上调表达非常显著.缺氮条件下NAR3、NAR1.1较正常最高上调表达200倍;缺硫条件下SLT1较对照有1 000～2000倍的mRNA表达量,SULTR2也最高能增高450倍的表达量.
- 李平费小雯李兴涵邓晓东
- 关键词：莱茵衣藻缺氮缺硫QRT-PCR
- 莱茵衣藻磷酸果糖激酶RNAi载体构建及其对莱茵衣藻油脂积累的影响被引量：5
- 2014年
- 为研究磷酸果糖激酶（PFK2）对微藻油脂积累的影响,克隆了莱茵衣藻磷酸果糖激酶同源基因CrPFK2,构建CrPFK2 RNAi干涉载体并转化莱茵衣藻.通过测定转基因藻在HSM培养下的生物量和油脂含量的结果发现,CrPFK2 RNAi转基因藻株在HSM培养基中生长加快,油脂含量下降了17.03％～21.48％,说明CrPFK2基因表达的降低与藻细胞油脂含量减少成正相关.CrPFK2通过改变光合碳流的多少间接调控藻细胞油脂的合成.该结果为CrPFK2基因应用于微藻油脂的遗传改良将起到重要作用.
- 李兴涵费小雯邓晓东
- 关键词：莱茵衣藻RNAI油脂含量
- 莱茵衣藻中Limp77基因干涉后油脂含量升高被引量：2
- 2013年
- 随着能源危机问题日益严重,可再生能源的研究渐渐成为目前研究的热点.微藻生物能源又以众多的优点成为目前可再生能源的研究重点.我们发现,在减氮培养下的莱茵衣藻,其油脂含量增加,Limp77基因的表达量明显下降.Limp77基因编码的是一类CCCH型锌指蛋白,具有通过与DNA、RNA结合来实现转录的调控或通过调控其它基因转录的锌指蛋白来实现转录调控的功能,极可能参与到莱茵衣藻油脂代谢调控中.通过利用RNAi干涉技术构建Limp77基因的干涉载体,并通过玻璃珠法转入莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)2A38中,研究其与油脂相关的生理生化指标的变化.实验结果表明,Limp 77基因明显抑制莱茵衣藻油脂的积累.
- 王蒙费小雯徐立新邓晓东
- 关键词：莱茵衣藻油脂含量
- 莱茵衣藻磷脂二脂酰甘油酰基转移酶3在三酰甘油合成中的功能研究被引量：3
- 2014年
- 为研究磷脂二脂酰甘油酰基转移酶(PDAT)在三酰甘油合成中的功能,克隆了莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)PDAT同源基因CrPDAT3干涉片段,通过构建CrPDAT3 RNAi干涉载体并转化莱茵衣藻,对CrPDAT3基因有效沉默,结果显示转基因藻株生长减缓,油脂含量下降14.65%—45.15%,说明CrPDAT3对油脂合成起到重要的作用。研究结果对于该基因应用于微藻油脂的遗传改良将起到重要作用。
- 邓晓东蔡佳佳费小雯
- 关键词：三酰甘油RNAI莱茵衣藻
