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国家自然科学基金(30972234)

作品数:3 被引量:4H指数:1
相关作者:侯加法周振雷邓益锋江莎孟凡更多>>
相关机构:南京农业大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金国家教育部博士点基金江苏高校优势学科建设工程资助项目更多>>
相关领域:生物学医药卫生农业科学更多>>

文献类型

  • 3篇期刊文章
  • 2篇学位论文
  • 1篇会议论文

领域

  • 3篇农业科学
  • 2篇生物学
  • 2篇医药卫生

主题

  • 3篇蛋鸡
  • 3篇基因
  • 2篇凋亡
  • 2篇凋亡相关
  • 2篇凋亡相关基因
  • 2篇凋亡相关基因...
  • 2篇多克隆
  • 2篇多克隆抗体
  • 2篇原核表达
  • 2篇破骨
  • 2篇破骨细胞
  • 2篇细胞
  • 2篇细胞凋亡
  • 2篇相关基因
  • 2篇相关基因表达
  • 2篇小鼠
  • 2篇抗体
  • 2篇抗体制备
  • 2篇克隆
  • 2篇基因表达

机构

  • 6篇南京农业大学

作者

  • 4篇侯加法
  • 3篇邓益锋
  • 3篇周振雷
  • 2篇杨俊花
  • 2篇郑燕玲
  • 2篇江莎
  • 1篇夏继飞
  • 1篇孟凡
  • 1篇崔军
  • 1篇张建鹏

传媒

  • 1篇中国兽医学报
  • 1篇生物学杂志
  • 1篇畜牧与兽医
  • 1篇第三届中国兽...

年份

  • 1篇2018
  • 2篇2016
  • 3篇2012
3 条 记 录,以下是 1-6
排序方式:
过表达TRPV6基因对小鼠破骨细胞钙转运基因与凋亡相关基因表达的影响被引量:1
2018年
破骨细胞是体内唯一的骨吸收细胞,对钙离子跨细胞膜转运及维持正常血钙水平有非常重要的作用。瞬时性受体电位通道香草酸受体6(transient receptor potential vanilloid receptor 6,TRPV6)是TRP家族中的一员,对钙离子有高度选择性,且是钙离子跨细胞转运的限速门控通道。本试验旨在研究TRPV6过表达对破骨细胞钙转运相关基因及细胞凋亡相关基因表达的影响。用TRPV6过表达慢病毒载体(LV-TRPV6)转染培养7 d的破骨细胞构建TRPV6过表达破骨细胞模型,以阐释小鼠破骨细胞中TRPV6与钙离子转运和细胞凋亡的关系。将破骨细胞分为3组:空白对照组、阴性对照组和LV-TRPV6组。结果显示:与空白对照组比较,破骨细胞TRPV6过表达后钙离子转运相关基因(calbindin-D28K,NCX1) mRNA和蛋白表达水平显著增加(P<0.05);破骨细胞TRPV6过表达后细胞凋亡相关基因mRNA和蛋白表达水平显著降低(Fas和FasL除外)(P<0.05)。流式细胞仪分析显示,LV-TRPV6组凋亡率显著下降6.33%±0.235%(P<0.05)。研究表明,破骨细胞过表达TRPV6基因导致钙转运相关基因表达增加并抑制破骨细胞凋亡。
崔军邓益锋孟范勇周振雷侯加法
关键词:过表达破骨细胞细胞凋亡钙离子转运
荧光Real-time PCR鉴定鸡胸骨总RNA质量被引量:3
2012年
为了更准确地鉴定提取鸡骨总RNA的质量,试验分别用核酸蛋白检测仪、1%琼脂糖凝胶电泳和荧光Real-time PCR检测评价3种不同的方法提取成年鸡胸骨总RNA的质量。结果显示,荧光Real-time PCR可更好地鉴定提取的骨总RNA的质量。用核酸蛋白检测仪、1%琼脂糖凝胶电泳能粗略检测RNA的纯度和完整性,但不能反映提取过程中是否引起基因不均一的减少,所检测的纯度也不能精确反映RNA的反转录效率。
江莎孟凡周振雷邓益锋侯加法
关键词:胸骨PCRRNA
蛋鸡TRPV6基因的原核表达、纯化及抗体制备
2012年
为制备蛋鸡TRPV6蛋白多克隆抗体,根据其基因序列,设计1对特异性引物,以卵巢组织中提取的总RNA为模板,扩增蛋鸡TRPV6基因1 801~2 176nt的375bp序列,构建原核表达质粒pET-32a(+)-TRPV6;将重组质粒转化BL21(DE3),经IPTG诱导表达TRPV6融合蛋白,通过镍离子螯合柱纯化后免疫新西兰大白兔,获得兔抗鸡TRPV6多克隆抗体,分别通过酶联免疫吸附试验(ELISA)法和Western blot检测抗体的效价和抗体特异性。结果表明,试验成功构建原核表达载体pET-32a(+)-TRPV6,SDS-PAGE蛋白电泳检测发现目的蛋白大小约35 000;Western blot分析显示,表达的TRPV6融合蛋白具有良好的免疫原性,其抗体可与大肠杆菌表达的产物特异性结合;ELISA显示其抗体效价达1∶100 000。获得纯化的融合蛋白和多克隆抗体对研究TRPV6钙离子通道在蛋鸡髓质骨形成的作用机理具有重要作用。
郑燕玲杨俊花张建鹏江莎侯加法
关键词:原核表达多克隆抗体
体内阻断TRPV6对钙转运基因及骨代谢的影响
瞬时受体电位(TRP)阳离子通道作为细胞传感器让人和动物感应到化学、机械力、光以及温度的变化。他们对于离子体内平衡和新陈代谢同样重要。TRP和TRP基因的突变与人和动物疾病密切相关。TRP家族包括6个亚族:TRPA、TR...
孟范勇
关键词:蛋鸡钙转运骨代谢
文献传递
过表达TRPV6基因对小鼠破骨细胞钙转运及凋亡相关基因表达的影响
钙和体内骨稳态息息相关。骨细胞胞内的Ca2+是一种重要的第二信使。胞内Ca2+水平的细微变化可影响正常的骨稳态,胞内钙离子浓度的改变会导致钙离子参与细胞凋亡。TRPV6是TRP家族中的一员,对钙离子有高度选择性,由细胞内...
崔军
关键词:破骨细胞钙转运细胞凋亡
蛋鸡TRPV6基因的原核表达、纯化及抗体制备
为制备蛋鸡TRPV6蛋白多克隆抗体,根据基因序列,设计一对特异性引物,以卵巢组织中提取的总RNA为模板,扩增蛋鸡TRPV6基因1801至2176位置的375 bp序列,构建原核表达质粒pET-32a(+)-TRPV6;将...
邓益锋郑燕玲杨俊花周振雷夏继飞侯加法
关键词:多克隆抗体原核表达纯化蛋鸡
文献传递
共1页<1>
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