国家自然科学基金(30972235) 作品数:9 被引量:28 H指数:3 相关作者: 夏成 张洪友 舒适 白云龙 吴凌 更多>> 相关机构: 黑龙江八一农垦大学 武汉科立博牧业科技有限公司 吉林大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 黑龙江省自然科学基金 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
基于2D-DIGE/MALDI-TOF-MS技术筛选奶牛低血钙症生物标志物 被引量:3 2015年 奶牛乳热(MF)是一种严重的营养代谢性疾病,通常被分为临床型及亚临床型低血钙症(SH)。奶牛乳热的诊断通常是应用奶牛血浆中的钙浓度进行判定的,但是在奶牛乳热整个发生发展的过程中,发病的具体机制仍是研究的盲点。在本试验中通过筛选奶牛乳热、亚临床低血钙症及健康奶牛间生物标志物进而解释可能的发生机制。选取27头奶牛作为实验动物,并根据其血浆钙浓度及有无临床症状分为乳热组(MF组)、亚临床低血钙组(SH组)和正常组(C组)。在组内每3个样品混合成为1个混合样本应用于2D-DIGE试验。结果得到110个差异蛋白质点,选取其中80个点进行MALDI-TOF-MS质谱分析,得到66个阳性结果并整合成为16种蛋白质。根据试验结果,选取A2M、HP和PON1进行Western blotting验证试验。本试验首次证实A2M、HP和PON1是奶牛乳热症3种新的生物标志物,并分析了其在乳热症发生过程中的可能作用机制。 舒适 夏成 张洪友 许楚楚 李昌盛 肖鑫焕 王刚 白云龙关键词:奶牛 WESTERN 基于SELDI-TOF-MS技术的患亚临床低血钙症奶牛血浆蛋白质组谱分析 被引量:1 2014年 旨在探讨患亚临床低血钙症奶牛血浆蛋白质组学的异常变化。收集32头患亚临床低血钙症奶牛和59头健康奶牛的血浆,应用SELDI-TOF-MS技术测得血浆蛋白质谱,经wilcoxon sum rank test分析两组峰值,结合Swissport蛋白质数据库鉴定,从而获得组间差异表达蛋白,并进行决策树分析。结果获得了7个差异峰,经鉴定得到6种差异表达蛋白质。经决策树模型分析得出神经分泌蛋白VGF片段和淀粉样β蛋白4可能为诊断健康牛和亚临床低血钙症牛的生物标志物。应用SELDI-TOF-MS技术可有效分离健康牛与患病牛之间的血浆差异表达蛋白质,其中有可能存在能够成为该疾病的诊断标识物,其具体发生机制有待研究,该结果对探究奶牛亚临床低血钙症发病机制及其对机体生物学功能的影响具有重要的理论价值。 王朋贤 舒适 王博 许楚楚 刘健男 夏成 吴凌 王哲关键词:奶牛 SELDI-TOF-MS 血浆蛋白质组学 乳热奶牛与亚临床低血钙奶牛的血浆理化指标检测 被引量:5 2013年 为了解奶牛分娩当天低血钙发生状况及其调节作用,本试验选取分娩奶牛30头,按照血钙水平和临床表现将这些牛分为对照组(Ca>2.20 mmol/L)、乳热组(Ca<1.70 mmol/L)、亚临床低血钙组(1.70 mmol/L0.05)。结论:奶牛发生乳热时血钙稳态调节机制发挥了一定的作用,但未充分发挥其作用。 舒适 夏成 张洪友 孙照磊 刘健男 王博关键词:奶牛 低血钙症 过瘤胃维生素D对围产期奶牛低血钙症的影响 被引量:9 2013年 为了阐明日粮添加过瘤胃维生素D对围产期奶牛低钙血症的调控机制,在某集约化奶牛场选取40头奶牛,随机分为4组,对照组(C)饲喂基础日粮,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别于产前10d至分娩后10d在日粮中每天添加1.5、3.0、6.0g/头过瘤胃维生素D。对4组试验奶牛围产期(分别于产前10、7、3、0d和产后3、7、10d)血清维生素D3(1,25-(OH)2D3)、钙、羟脯氨酸、甲状旁腺素和降钙素水平进行检测。结果表明,围产期奶牛血钙水平分娩时达最低,产后逐渐上升,且产前7d至产后10d对照组奶牛血钙浓度显著低于试验Ⅰ组(P<0.05);分娩当天试验Ⅰ组奶牛血浆中1,25-(OH)2D3、羟脯氨酸和降钙素水平显著高于对照组(P<0.05),甲状旁腺素水平显著低于对照组(P<0.05)。提示,日粮中每天添加1.5g/头过瘤胃维生素D能调节甲状旁腺素和降钙素等激素的分泌,促进肠道对钙的吸收,动员骨钙,从而防止奶牛产后低钙血的发生,且围产期奶牛低血钙症与机体血钙稳态调节作用密切关联。 郑家三 夏成 王琳琳 张洪友 徐闯 吴凌关键词:奶牛 围产期 低血钙症 基于SELDI-TOF-MS技术的奶牛乳热血浆蛋白质组学分析 被引量:1 2016年 奶牛乳热是围产期奶牛营养代谢性疾病,对于奶牛乳热在病理方面少有血浆蛋白质组学的研究。本研究目的是探究奶牛乳热在蛋白质组学层面的变化。试验21头患有奶牛乳热的奶牛和59头健康奶牛作为试验动物。试验通过SELDI-TOF-MS技术检验得到24个差异肽段的峰值,其中10个肽段经过Swissport Protein数据库搜索鉴定为10种差异蛋白。结果相对于对照组,乳热组中表达上调的蛋白4个;表达下调的蛋白2个;还有既表达上调又表达下调的蛋白4个。结论本次试验应用SELDI-TOF-MS技术鉴定了几个在奶牛发生乳热时表达的差异蛋白质。这些发现也为以后揭示奶牛乳热代谢性改变提供了依据。 舒适 夏成 张洪友 许楚楚 李昌盛 肖鑫焕 王刚关键词:SELDI-TOF-MS技术 蛋白质组学 奶牛 日粮阴阳离子差对围产期奶牛血钙稳态机制的影响 (目的 )为了解日粮阴阳离子差对围产期奶牛血钙稳态机制的作用.(方法 )在黑龙江省集约化牛场选取100头国产期奶牛,随机分为一个对照组(C)和四个试验组(T1、T2、T3、T4),每组20头,依次供给不同DCAD值(85... 夏成 杨龙蛟 桑松柏 张洪友 徐闯 吴凌 郑家三关键词:奶牛 围产期 阴阳离子平衡 血钙 文献传递 三种血酮仪对奶牛酮病诊断效果的比较 被引量:3 2018年 本试验应用3种血酮仪检测奶牛酮病,经综合指标分析,为奶牛场血酮仪的选择提供依据。在黑龙江某集约化奶牛场,随机选取3~6胎次,产后5~21 d泌乳奶牛29头,经尾静脉采血分离血清。应用3种血酮仪(雅培、BHBCheck、怡成)与生化仪对比检测奶牛血清酮体。结果显示:雅培,敏感度87.5%,特异度100%,准确率93.1%,Youden指数87.5%;怡成:敏感度75%,特异度100%,准确率86.2%,Youden指数75%;BHBCheck:敏感度93.8%,特异度100%,准确率96.5%,Youden指数93.8%。并且,ROC曲线下面积,雅培为0.938,怡成为0.875,BHBCheck为0.969。在价格方面,雅培30元/例,BHBCheck 23元/例,怡成15元/例。结论:综合评价三种血酮仪,BHBCheck性价比最优。 刘建波 田琳琳 李兴华 白云龙 李鑫 夏成 徐闯 张洪友关键词:奶牛酮病 综合评估 奶牛卵巢静止发生的风险预警体系建立 被引量:3 2019年 近年来,我国集约化牛场卵巢静止性乏情率较高,但临床奶牛卵巢静止的发生尚未有完整的预警体系,为临床预测奶牛卵巢静止提供预警指标,选取产后60~90d卵巢静止组和对照组奶牛血液样本,在蛋白组学前期研究的基础上筛选出检测试验奶牛血液中与卵巢静止相关指标。3种能量指标:谷草转氨酶(AST)、葡糖糖(Glu)、非游离性脂肪酸(NEFA);4种生殖激素:雌二醇(E2)、孕酮(P4)、促卵泡生长激素(FSH)、促黄体素(LH);4种关键差异表达蛋白:胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP-2)、α-2-HS糖蛋白(AHSG)、载脂蛋白A4(ApoA4)、视黄醇结合蛋白4(RBP-4);6种关键酶活性:果糖二磷酸醛缩酶(ALDOB)、L-乳酸脱氢酶(LDHB)、inter-α-胰蛋白酶抑制剂重链H3(ITIH3)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX3)、血清衍生的透明质酸相关蛋白(SPAM1)、丙酮酸激酶(PKM2)。结果显示,经过相关性分析、二元逻辑回归建模以及ROC分析,建立了ApoA4和ITIH3单一指标的预警技术,其预警值分别为ApoA4>28.825μg/L,ITIH3>195.07ng/L。建立了基于ApoA4+ITIH3和ApoA4+ITIH3+E2潜在生物标志物的多指标预警体系,前者预警值为ApoA4>19.55μg/L,ITIH3>191.14ng/L;后者预警值为ApoA4>47.56μg/L,ITIH4>187.80ng/L,E2<69.63ng/L。 白云龙 赵畅 舒适 张江 宋玉锡 孙书函 夏成关键词:奶牛 卵巢静止 E2 ROC 奶牛亚临床低血钙症的蛋白质组学分析 被引量:2 2017年 根据奶牛血浆钙浓度将奶牛分为试验组和对照组,并设置2个平行试验组。应用iTRAQ/LC-MS/MS技术对2组奶牛样品进行差异表达蛋白的筛选和鉴定,并结合生物信息学软件对试验结果进行分析。试验共得到398个差异表达蛋白,其中2个平行试验组重叠的蛋白为265个,经过筛选共得到14种具有统计学差异的表达蛋白。结合生物信息学分析中的基因功能分析,结果得到74个注释结果,细胞组成、分子功能和生物过程分别为6,12,55个。根据结果分析可知,奶牛亚临床低血钙症生理和病理现象能够从3个方面解释其生理和病理现象,分别是血钙调节、免疫与炎症反应和血液凝固与补体途径。本试验首次应用iTRAQ结合LC-MS/MS技术对亚临床低血钙症奶牛进行蛋白质组学分析,填补该技术对亚临床低血钙症的空白,并提供科学依据。 舒适 肖鑫焕 王刚 白云龙 范子玲 夏成 吴凌 张洪友 杨威关键词:奶牛 蛋白质组学 ITRAQ LC-MS/MS 营养对奶牛围产期健康的影响 被引量:5 2010年 在奶牛围产期,营养状况直接影响到奶牛疾病的发生。对于高产奶牛,由于奶牛体内的钙流失或者能量出现负平衡,容易产生乳热、酮病、脂肪肝等疾病,通过改善妊娠后期奶牛营养可减少这些疾病的发生。围产期奶牛的感染性疾病的易感性取决于免疫系统的完整性,而营养因素可影响机体免疫功能;其它非感染性疾病也可以通过改善营养状况来加以预防。 夏成 张洪友关键词:奶牛 围产期 免疫学 代谢疾病 酮病