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国家自然科学基金(30672358)
作品数:
3
被引量:3
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相关作者:
张彦
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朱振宇
熊建军
杨光
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2010
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野生型stathmin 1及其C末端突变体的功能研究
被引量:1
2009年
目的:研究stathmin1过表达对黑色素细胞的生长和功能的作用;探讨C末端7个氨基酸残基的突变对stathmin1生物功能的影响。方法:构建stathmin1克隆载体及其C末端定点突变载体。转染载体到黑色素细胞中,MTT、流式细胞仪、分光光度法等研究野生型以及突变型stathmin1对于黑色素细胞生长以及细胞特异性功能的影响。结果:成功构建含有野生型stathmin1的克隆载体pAdTrack-stathmin1及其定点突变载体pAdTrack-stathmin 1-mut;MTT法和流式细胞仪检测到突变型和野生型stathmin 1都能有效抑制黑色素细胞生长、诱导细胞凋亡;分光光度法检测黑色素细胞特异性功能黑色素产量以及酪氨酸酶活性因stathmin 1的转染而受到明显影响。结论:Stathmin 1稳定表达对于黑色素细胞的生长有重要意义,高表达可以抑制细胞生长以及细胞特异性功能,C末端模序结构的破坏并不能影响stathmin 1的生物学功能。
张彦
熊建军
王嘉励
杨光
朱振宇
关键词:
STATHMIN
定点突变
黑素细胞
淋巴母细胞端粒酶活性和成瘤性的关系
被引量:2
2010年
目的 EB病毒相关的淋巴母细胞(lymphoblastoid cell lines,LCLs)有较高的端粒酶活性。本实验旨在分析淋巴母细胞成瘤性与端粒酶活性的关系。方法采用端粒重复扩增法(telomericrepeat amplification protocol,TRAP)分别测定淋巴细胞源性肿瘤细胞以及EB病毒相关淋巴母细胞的端粒酶活性,并对淋巴母细胞的成瘤性进行体内体外试验。结果 5株EB病毒相关的LCLs端粒酶活性与细胞传代次数有关,它们都能在免疫缺陷小鼠体内致瘤。结论容易形成集落的细胞系更容易在小鼠体内致瘤,也具有更高的端粒酶活性。
张彦
冯哲玲
熊建军
王嘉励
朱振宇
关键词:
EB病毒
端粒酶
Stathmin1 RNA干扰载体的构建及功能检测
2009年
目的构建用于stathmin1 RNA干扰的重组质粒并验证其干扰效果,初步探讨stathmin1对于黑色素细胞生长的影响。方法两步PCR法构建含有shRNA编码序列的重组质粒,脂质体转染黑色素细胞。RT-PCR、Western印迹等方法检测stathmin1在黑色素细胞中表达水平改变;MTT、流式细胞仪等方法检测黑色素细胞生长状态。结果成功构建3个stathmin1特异性的RNA干扰载体,在黑色素细胞中能有效降低stathmin1在mRNA水平的表达,蛋白质表达水平分别降低为对照组的6%、17%和15%;黑色素细胞的生长由于stathmin1减弱表达而受到明显抑制,凋亡率提高到约60%。结论干扰质粒能有效介导stathmin1的RNA干扰;stathmin1对于黑色素细胞的生长具有重要意义。
张彦
熊建军
王嘉励
杨光
朱振宇
关键词:
STATHMIN
RNA干扰
黑色素细胞
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