四川省教育厅资助科研项目(2006ZD019)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：李洪龚舒刘友平张春燕杨烨更多>>
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- 发文基金：四川省教育厅资助科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 缺氧复氧诱导人肾小管上皮细胞蛋白质组表达变化的初步研究被引量：1
- 2010年
- 目的:采用将人肾小管上皮细胞置于缺氧环境中然后复氧的方法模拟缺血再灌注(ischemia reper-fusion,IR)所致肾损伤的发生和发展过程,研究IR对人肾小管上皮细胞表达蛋白质组的影响。方法:人肾小管上皮细胞株(HK-2细胞)常规培养,随机分为2组,IR组缺氧培养8h,然后复氧培养24h,对照组常规培养,裂解细胞,提取全细胞蛋白。双向电泳(2-DE)分离,ImageMaster2D Platinum V5.0软件进行差异表达蛋白质组分析,基质辅助激光解吸附离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定蛋白质。结果:通过对2-DE图谱蛋白斑点的匹配及对比分析,与HK-2缺氧复氧诱导的差异表达蛋白斑点为109个;经质谱鉴定的7个差异表达的蛋白斑点包括:核糖体蛋白S2、普通转录因子ⅡH亚基1变体、双链断裂修复蛋白rad-21同源物、富含亮氨酸重复序列蛋白-45、DNA依赖性蛋白激酶、丝/苏氨酸蛋白激酶Chk1和程序性细胞死亡蛋白-4。结论:IR组与对照组的表达蛋白质组相比较存在明显差异;7个与HK-2缺氧复氧诱导表达改变的蛋白质的功能涉及细胞增殖、细胞凋亡、细胞信号转导、抗细胞损伤等,提示IR的发生发展与相应的病理生理过程相关。
- 张春燕刘友平杨烨龚舒李洪
- 关键词：再灌注损伤缺氧复氧肾小管上皮细胞蛋白质组
- 重组流行性乙型脑炎病毒E基因原核表达条件的优化
- 2009年
- 目的:对重组流行性乙型脑炎病毒E基因(JEVE)进行优化表达研究。方法:采用正交实验设计L9(34)方案,通过SDS-PAGE分析,对诱导时机、诱导时间、IPTG浓度、诱导温度四因素对重组产物表达的影响进行了研究。结果:菌体在37℃培养条件下,当LB培养基OD600达到0.8时,加入终浓度为0.025mmol/L的异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(Isopropylthio-β-D-galactoside,IPTG)诱导4h,可获得较高表达量的重组乙脑病毒E蛋白。结论:获得较为满意的表达条件,为下步纯化和进一步大规模生产奠定了基础。
- 王丽李洪邢文静于海清龚舒何涛
- 关键词：正交实验设计
