国家自然科学基金(30576867)
- 作品数：5 被引量：6H指数：1
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- ZNF262在常染色体显性多囊肾病患者肾组织中的表达及意义
- 2006年
- 目的:检测锌指蛋白262(ZNF262)在正常肾组织及不同发病阶段多囊肾组织中的表达,并以增殖细胞核抗原(PCNA)为对照,初步探讨ZNF262在常染色体显性多囊肾病(autosomal dominant polycystic kidney disease,ADPKD)中的作用。方法:根据肾小球滤过率(GFR)大小对ADPKD(n=8)进行分期,观察其影像学、常规病理检查结果,采用半定量RT-PCR方法检测人正常肾组织(n=8)、早期多囊肾组织(n=4)、晚期多囊肾组织(n=4)中ZNF262和PCNA的表达,并对上述组织中ZNF262和PCNA的表达进行相关性分析。结果:与正常肾组织相比,ZNF262和PCNA在早期、晚期多囊肾组织中的表达均显著增多(P<0.01),且晚期多囊肾组织表达高于早期多囊肾组织(P<0.05)。ZNF262和PCNA在早期、晚期多囊肾及正常肾组织中的表达存在显著的相关性(r1=0.842 6,r2=0.902 1,r3=0.883 5,均P<0.05)。结论:与正常组织相比,ZNF262不仅在ADPKD高表达,并且随着病程进展表达逐步增高,这与PCNA的表达具有显著的相关性。提示ZNF262可以作为检测ADPKD的指标,并有助于临床进展分期的判别。
- 王素霞王丽刘亚伟付莉莉许涛梅长林
- 关键词：增殖细胞核抗原
- 塞来昔布通过阻断丝裂原活化蛋白激酶信号途径抑制多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖被引量：4
- 2006年
- 目的:探讨环氧合酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布(CXB)能否通过阻断丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导途径抑制多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖。方法:原代培养多囊肾囊肿衬里上皮细胞,以不同浓度CXB(0、2.5×10-6、5×10-6、1×10-5、2×10-5、3×10-5、4×10-5、5×10-5mol/L)处理细胞,采用BrdU法检测细胞增殖状态。ELISA法检测各组血管内皮生长因子(VEGF)的含量。荧光定量PCR技术检测增殖细胞核抗原(PCNA)、磷酸化MAPK的mRNA含量,Western印迹法检测PCNA、MAPK和磷酸化MAPK的表达。结果:CXB对囊肿衬里上皮细胞的增殖具有明显抑制作用,呈时间和剂量依赖性,其中2×10-5mol/L CXB作用24 h的抑制作用最强,抑制率为(63.9±1.2)%;CXB可减少囊肿衬里上皮细胞VEGF的分泌,而且抑制作用具有时间、浓度依赖性。CXB剂量依赖性减低PCNA和磷酸化MAPK的mRNA和蛋白表达。结论:CXB明显抑制囊肿衬里上皮细胞增殖,抑制细胞产生VEGF;其作用与干扰MAPK磷酸化,部分阻断MAPK信号转导通路有关。
- 许涛曲巍梅长林叶朝阳王素霞付莉莉
- 关键词：塞来昔布丝裂原活化蛋白激酶囊肿衬里上皮细胞
- 静脉铁剂治疗血液透析患者肾性贫血的临床疗效和安全性被引量：1
- 2006年
- 目的:比较静脉注射右旋糖酐铁和口服硫酸亚铁分别与重组人红细胞生成素(rhEPO)联合应用,治疗伴有缺铁的血液透析患者肾性贫血的有效性和安全性。方法:采用前瞻性、随机、对照的研究方法把90例血透患者分为静脉组和口服组,每组各45例。静脉组患者每次透析时使用100 mg右旋糖酐铁,直至完成总预计补铁量。口服组患者服用硫酸亚铁525 mg,1次/d,共8周。两组患者均使用rhEPO治疗,剂量为每周120～150 U／kg。观察并比较两组患者贫血治疗的效果、铁代谢指标的变化及不良反应发生情况。结果:治疗前静脉组与口服组在男女性别比例、年龄、体重和维持性透析时间及血红蛋白(Hb)、铁蛋白和转铁蛋白饱和度等方面均无显著差异。治疗后静脉组和口服组Hb均较治疗前明显升高(P<0．001),而静脉组Hb上升幅度明显高于口服组,上升速度明显快于口服组(P<0．01)。两组患者平均rhEPO用量无差异。两组患者治疗后铁蛋白和转铁蛋白饱和度均明显高于治疗前,治疗后静脉组铁蛋白和转铁蛋白饱和度均明显高于口服组(P<0.001)。两组患者治疗前后血清Bun、Scr、AST、AlP、Alb和CRP等均无明显变化,无严重不良反应发生,但静脉组不良反应发生率明显低于口服组(P=0．016)。结论:右旋糖酐铁能安全有效地纠治接受rhEPO治疗的血液透析患者的肾性贫血,疗效优于口服铁剂,且不良反应发生率更低。
- 王丽任传路肖丽谈珺杰倪华芳尹卓文周琳
- 关键词：肾透析
- 人肾组织磷酸化蛋白质组二维凝胶电泳的建立与优化被引量：1
- 2006年
- 目的:利用二维凝胶电泳法分离人肾组织磷酸化蛋白质组。方法:利用金属磷酸盐亲和层析树脂富集人肾组织磷酸化蛋白。样品浓缩除盐后,进行一维等电聚焦分离和二维SDS电泳分离提取人肾组织磷酸化蛋白。结果:成功提取了人肾组织磷酸化蛋白,并得到了磷酸化蛋白的双向凝胶电泳图谱。结论:磷酸化蛋白富集技术与二维凝胶电泳技术的结合是研究磷酸化蛋白质组的有效方法,为进一步研究人肾组织磷酸化蛋白奠定基础。
- 刘亚伟戴兵梅长林沙伟张岩熊锡山
- 关键词：蛋白质组学磷酸化蛋白质组二维凝胶电泳
- 膜联蛋白Ⅱ基因短发夹RNA表达载体的构建和鉴定
- 2006年
- 目的:构建针对膜联蛋白(annexin)Ⅱ的短发夹RNA(shRNA)的表达载体,观察其对目的基因表达的影响。方法:根据GenBank中annexinⅡ基因已知序列设计了2条序列,即annexinⅡshRNA1、annexinⅡshRNA2,同时设计1条非特异性序列作为阴性对照。据此设计合成各自的寡核苷酸链,退火后连接人pGenesil1载体,转化扩增后进行序列测定。3种重组表达载体均转染HEK293细胞,通过实时荧光定量RT-PCR和Western印迹法分别在基因和蛋白水平上检测各自annexinⅡ的表达,以未转染细胞作为空白对照。结果:3种重组表达载体(pGenesil1-annexinⅡshRNA1、pGenesil1-annexinⅡshRNA2和pGenesil1-negative shRNA)经限制性酶切及测序分析证明基因插入正确。转染HEK293细胞后,转染pGenesil1-annexinⅡshRNA2组细胞annexinⅡ基因和蛋白表达明显低于转染pGenesil1-annexinⅡshRNA1、pGenesil1-negative shRNA以及空转染细胞(P<0.05),而后三者间没有明显差异。结论:成功构建了针对annexinⅡ的shRNA表达载体(pGenesil1-annexinⅡshR-NA2),转染细胞后可抑制annexinⅡ基因表达。
- 刘亚伟戴兵梅长林付莉莉蔡厚安
- 关键词：RNA干扰短发夹RNA
