国家海洋公益性行业科研专项(200705007)
- 作品数：10 被引量：71H指数：4
- 相关作者：周遵春杨爱馥姜北陈仲关晓燕更多>>
- 相关机构：辽宁省海洋水产科学研究院辽宁师范大学中国海洋大学更多>>
- 发文基金：国家海洋公益性行业科研专项辽宁省科学技术计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 仿刺参养殖池塘浮游病毒丰度与环境因子的相关性分析被引量：3
- 2010年
- 为了揭示仿刺参养殖池塘生态系统中浮游病毒与环境因子的关系,于2008年3—11月对大连市谢屯地区的仿刺参养殖池塘中的浮游病毒丰度进行了定期检测,同时对水温、pH、溶解氧、盐度、叶绿素a含量、化学需氧量、无机氮、活性磷酸盐、异养细菌等因子进行了监测,对浮游病毒丰度与这些环境因子之间的相关性进行了分析。结果表明:仿刺参养殖池塘中浮游病毒的平均丰度为8.32×1010VLPs.L-1(最高值为4月的18.2×1010VLPs.L-1,最低值为11月的1.31×1010VLPs.L-1),外海水中浮游病毒平均丰度为6.45×1010VLPs.L-1(最高值为4月的12.6×1010VLPs.L-1,最低值为6月的2.02×1010VLPs.L-1),仿刺参养殖池塘中营养盐、水温、pH及盐度对浮游病毒丰度的影响较大,而外海水中叶绿素a和异养细菌对浮游病毒丰度的影响较大。
- 姜北周遵春董颖邓欢杨爱馥陈仲汪笑宇关晓燕
- 关键词：环境因子
- 16SrRNA检测技术及其在水产增养殖中的应用被引量：2
- 2009年
- 仲禾刘星高祥刚李云峰赫崇波
- 关键词：水产
- 仿刺参甘露聚糖结合凝集素基因对脂多糖刺激的免疫应答
- 2012年
- 甘露聚糖结合凝集素是天然免疫系统中重要的模式识别分子。分析了仿刺参甘露聚糖结合凝集素在仿刺参不同组织及脂多糖刺激前后的表达规律,结果显示仿刺参甘露聚糖结合凝集素mRNA在仿刺参的肠道、呼吸树、体腔细胞和体壁均有组成型表达,且体壁的表达量最高;细菌脂多糖刺激后,4个组织的仿刺参甘露聚糖结合凝集素表达量均得到上调,且以肠道和体腔细胞表达量的变化最为显著;另外,肠道、体腔细胞、体壁中仿刺参甘露聚糖结合凝集素表达量峰值的出现具有明显的时序性,而呼吸树自刺激后6h直至取样结束,其表达量呈稳步上升趋势。
- 杨爱馥周遵春于喆董颖陈仲王摆关晓燕姜北
- 关键词：仿刺参甘露糖结合凝集素基因表达脂多糖刺激
- 仿刺参cytb和β-actin基因表达稳定性比较被引量：31
- 2010年
- 基因表达分析需要采用内参基因来校正目的基因的表达量。采用半定量RT-PCR的方法分析了cytb和β-actin基因在仿刺参(Apostichopus japonicus)未受精卵、受精卵、多细胞期、囊胚期、原肠期、小耳状幼体、中耳状幼体、大耳状幼体、樽型幼体、五触手幼体、稚参11个发育阶段和幼参的体壁、体腔细胞、肠道和呼吸树中的表达情况。结果表明:cytb在不同发育阶段和不同组织中稳定表达;β-actin基因在稚参之前不同发育阶段中表达水平有显著差异,在幼参的体壁、肠道和呼吸树中稳定表达。此外,cytb在lipopolysaccgarides(LPS)刺激前后的原肠胚、小耳状幼体、中耳状幼体、大耳状幼体、樽型幼体、稚参和幼参四种组织中表达量无显著差异;β-actin基因在LPS刺激前后的幼参体腔细胞、肠道和呼吸树中表达量无显著差异。本研究为仿刺参功能基因表达分析中,cytb与β-actin基因作为内参基因的可行性提供了依据。
- 杨爱馥周遵春董颖姜北汪笑宇陈仲关晓燕王摆孙大鹏
- 关键词：仿刺参CYTB基因Β-ACTIN基因LPS刺激
- 仿刺参及养殖环境中溶藻弧菌和灿烂弧菌的PCR快速检测被引量：12
- 2010年
- 溶藻弧菌和灿烂弧菌是水产养殖中常见的致病菌,给水产动物的养殖带来巨大的损失,建立一种简便、快速、有效的检测方法十分必要。根据溶藻弧菌和灿烂弧菌gyrB基因序列的保守区序列分别设计引物,对9株溶藻弧菌和6株灿烂弧菌进行了PCR扩增。结果表明两对引物能特异地检测溶藻弧菌和灿烂弧菌,而与其他细菌没有交叉反应;检测溶藻弧菌的每个PCR反应的敏感度为0.13pg的DNA和103cfu/mL细菌,检测灿烂弧菌的每个PCR反应的敏感度为0.34pg的DNA和103cfu/mL细菌。该PCR检测方法具有特异性好、灵敏度高的特点,可用于对感染溶藻弧菌和灿烂弧菌的仿刺参及其养殖水体中的细菌性病原进行快速检测。
- 汪笑宇周遵春关晓燕姜北陈仲董颖杨爱馥
- 关键词：溶藻弧菌灿烂弧菌PCR
- 仿刺参体壁、肠和呼吸树全长cDNA文库的构建及部分ESTs初步分析被引量：4
- 2009年
- 利用SMART cDNA文库构建试剂盒构建了健康仿刺参的体壁、肠和呼吸树的cDNA文库。检测结果表明,3个文库库容量分别为1.7×106、1.5×106和1.8×106;重组率均超过98%;插入片段平均长度均大于1kb。证明所建cDNA文库的质量符合要求。对随机选取的6240个克隆进行5’端测序,得到5913条有效序列(体壁:2031,肠:1966,呼吸树:1916),去除低质量序列和小于100bp的序列后,共得到5728条高质量的ESTs序列(体壁:1791,肠:1906,呼吸树:1851),序列平均长度为589bp。经过软件拼接,共得到2613条单基因簇,包含495个序列重叠群和2118条单一序列。通过BLASTX搜索比对,获得基因注释序列853个(体壁:274个;肠:358个;呼吸树:221个),占总数32.6%,并进行了初步的功能分类。为进一步开展相关基因的克隆和分子标记的筛选奠定了基础。
- 周遵春赫崇波杨爱馥陈仲高祥刚姜北胡景杰
- 关键词：仿刺参CDNA文库ESTS
- 涅斯捷连科氏菌对仿刺参的致病性初步研究被引量：1
- 2013年
- 2005-2007年在大连、营口地区室内养殖仿刺参幼参阶段发生附着基和池壁变红现象,同时伴随池内幼参体壁溃疡、死亡。对变红的附片和患病幼参进行病原菌分离,结果均分离出一株在TCBS和2216E培养基上显示绝对优势的桔红色菌株。人工回接感染试验表明,该菌株对仿刺参具有一定致病性。通过菌株培养特征观察、生理生化特性试验和16SrRNA分析,鉴定该优势菌为耐盐捏斯连科菌。该菌最适生长温度25～37℃、最适合生长pH 7.6～8.0、食盐质量分数超过6%生长最旺盛。药敏试验结果表明,对先锋V、先锋必、先锋Ⅵ、先锋孟多、头胞氯氨苄、新霉素、万古霉素、乙酰螺旋霉素、强力霉素、二甲胺四环素、呋南妥因、萘啶酸、氟嗪酸、氟罗沙星显示高度敏感,对头胞噻肟和复方新诺明不敏感。
- 徐晓红高祥刚鹿志创
- 关键词：仿刺参
- 一种海绵动物对室内养殖海参危害的初步研究被引量：3
- 2008年
- 2006-2007年8月在辽宁省营口市老边区多家育苗场室内人工养殖海参池中发生大量海绵繁殖现象。该生物能在海参室内养殖池中迅速繁殖,成片地附着生长在海参附着基上,不仅影响海参附着环境,而且其分支状的锋利边缘会划伤幼参体表,引起病原菌的继发感染,对海参养殖业有相当的危害,经过初步鉴定认为该物种为软节蜂海绵。
- 单红云赫崇波李晓冬胡玉晶徐晓红高祥刚谭克非刘星邓欢
- 关键词：海参
- 仿刺参铁蛋白ferritin基因的序列分析及表达被引量：13
- 2010年
- 通过构建仿刺参cDNA文库,获得铁蛋白全长cDNA序列。该基因序列全长792bp,5′-非翻译区长133bp,开放阅读框长522bp,编码173个氨基酸,3′-UTR长137bp;预测蛋白分子量为20ku。5′-UTR具有一个高度保守的铁离子应答元件。仿刺参ferritin氨基酸序列具备脊椎动物ferritin的亚铁氧化酶活性中心所特有的保守结构。该序列与海参的同源性最高,达84%,与其它无脊椎动物如:海星、鲍、牡蛎、海葵、线虫、小龙虾和果蝇的同源性为74%～34%;与脊椎动物ferritin重链亚基同源性高于轻链亚基。系统进化分析表明,仿刺参的ferritin与大部分无脊椎动物聚为一支。利用半定量RT-PCR检测,ferritin mRNA在仿刺参未受精卵、受精卵、多细胞期、囊胚期、原肠期、小耳状幼体、中耳状幼体、大耳状幼体、樽型幼体、五触手幼体、稚参11个发育阶段和幼参的体壁、体腔细胞、肠道和呼吸树中均表达。Quantitative real-time PCR结果显示,ferritin mRNA在未受精卵至原肠期表达量低,从小耳状幼体至稚参表达量显著增高;在幼参的不同组织中,ferritin mRNA在呼吸树中的表达量显著低于其他3种组织;幼参注射LPS后,4种组织中ferritin mRNA表达量与注射前无显著差异。
- 杨爱馥周遵春孙大鹏董颖姜北汪笑宇陈仲关晓燕王摆
- 关键词：仿刺参基因表达LPS刺激
- 仿刺参线粒体全基因组序列结构及比较研究被引量：6
- 2012年
- 利用已构建的仿刺参cDNA文库得到的线粒体DNA(mtDNA)相关基因序列设计扩增引物,测定了大连仿刺参线粒体基因组全序列,并对其进行了基因构成和进化分析。仿刺参线粒体基因组序列长16 109bp,其基因构成与其他后口动物基本一致,包括37个基因(2个rRNA基因、22个tRNA基因和13个蛋白质编码基因)和3个主要的非编码区。在其37个基因中,ND6、tRNASer(AGN)、tRNAGln、tRNAAla、tRNAVal、TrnaAsp位于L链上,其余均位于H链上。在13个蛋白质编码基因中,除ND1的起始密码子为GTG外,其余均以ATG作为起始密码子;除Cytb以"T"作为终止密码子外,其他蛋白质基因均具有完全的终止密码子,且在已知的棘皮动物线粒体蛋白质基因中,部分基因的起始和终止密码子表现出一定的纲内特异性。比较分析了大连、青岛、威海仿刺参线粒体基因组,三者的基因组成和排列相同,碱基组成相近,蛋白质编码基因的起始和终止密码子完全一致,但存在核苷酸和氨基酸序列的差异。三者的控制区序列存在多个插入/缺失和SNP位点。根据COI、Cytb和ND4计算了三者之间的遗传距离为0.006～0.018,遗传距离分析和系统进化关系分析都显示青岛仿刺参和威海仿刺参的关系较大连仿刺参更近。
- 李云峰李梦遥王健高祥刚赫崇波周遵春杨爱馥
- 关键词：仿刺参线粒体DNA线粒体基因组单核苷酸多态性系统进化
