国家自然科学基金(31360532)
- 作品数：9 被引量：23H指数：2
- 相关作者：信吉阁张宏燕陶果查星琴成文敏更多>>
- 相关机构：云南农业大学昆明海关技术中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金云南省应用基础研究基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 甲基睾酮在动物源性食品中残留危害及检测方法的研究进展被引量：2
- 2017年
- 甲基睾酮(MT)属于性激素类药物中的人工合成类固醇激素,为我国禁止使用兽药,但在鱼类和家畜养殖中有违规使用的报道。甲基睾酮在动物源性食品中的残留对食品安全和人类健康有潜在的危害。文章概述了甲基睾酮对动物组织器官、生殖、内分泌和神经等多方面的危害作用,以及甲基睾酮与人类生殖系统疾病存在的可能相关性;同时介绍了现阶段甲基睾酮残留检测的主要方法。
- 沈诚徐昆龙代佳和王丽屏张宏燕信吉阁
- 关键词：动物源性食品药物残留安全性评价
- 高通量RNAi及其在细胞生物学特性研究中的应用
- 2015年
- 高通量RNAi(high-throughput screens HTSs)技术是近年来基因功能研究的高效工具。现已在多个物种的细胞内进行了大量基因组范围RNAi高通量筛选,用于研究多种不同的生物学过程,为生物医学研究提供了技术基础。就高通量RNAi技术原理、实验操作及其在研究与细胞生物特性相关基因中的主要应用进展进行了综述。
- 信吉阁曾养志
- 关键词：RNAI高通量细胞学
- 靶向基因修饰技术在免疫缺陷动物模型研究中的应用进展被引量：1
- 2016年
- 免疫缺陷动物模型在人类相关疾病机理研究、药物研发、器官移植研究和干细胞研究中有重要的应用。但由于传统基因修饰动物构建技术难度大、效率低等限制,在中型、大型动物中获得的免疫缺陷动物模型还很少。近年来新兴的靶向基因修饰技术,包括ZFNs、TALENs、CRISPR/Cas9等,为高效率免疫缺陷动物模型构建提供了技术基础。本文就ZFNs、TALENs、CRISPR/Cas9的技术原理及研究进展进行概况介绍,并详细地阐述这些技术在中型和大型动物中免疫缺陷动物模型构建方面取得的进展,包括KO Rag1/Rag2兔、KO Rag1/Rag2猪、KO IL2rg猪、KO Ppar-!/Rag1猴等。这些免疫缺陷动物模型不仅能用于人类SCID相关疾病研究,评价干细胞移植的效率和安全性,且可进行临床前手术治疗研究,生产人源化动物模型等,进而架起实验动物与医学应用的桥梁,促进临床前细胞再生策略的综合评价体系的发展。
- 信吉阁曾养志
- 关键词：免疫缺陷动物模型
- 牛病毒性腹泻病毒检测方法研究进展被引量：1
- 2023年
- 牛病毒性腹泻病(bovine viral diarrhea,BVD)是由牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)感染导致的传染病。该病会导致牛生产性能下降,给全球养牛业带来严重的经济损失。BVD的临床表现和病理变化与其他牛源腹泻病毒病相似,因此有必要根据不同的条件选择快速高效的BVDV诊断方法,及时采取措施阻断BVDV在牛群间、BVDV持续感染牛(persistently infected,PI)与健康牛之间传播,减少BVDV对养牛业造成的经济损失。用于BVDV检测的方法很多,主要有病毒分离鉴定、荧光定量RT-PCR、RT-PCR、环介导等温扩增技术(LAMP)、重组酶聚合酶扩增技术(RPA)、胶体金免疫检测技术(GICT)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、抗原捕获ELISA(AC-ELISA)、间接免疫荧光法(IFA)等。近年一些新兴技术和优化的方法被应用于BVDV的检测,如抗体液相芯片技术、CRISPR-LwCas13a系统、双重纳米RT-PCR法等,均具有特异性强和灵敏度高等优点。作者从抗原、抗体两个方面总结了BVDV检测方法的研究进展,并比较各检测方法的优缺点,便于各级兽医研究机构和生产单位根据实际情况选择合适高效的BVDV检测方法,以期为BVD的流行病学调查和防治提供参考依据。
- 和琳韩佃刚李静杜萱张家翔信吉阁
- 关键词：牛病毒性腹泻抗原检测抗体检测
- 基因敲除技术最新研究进展及其应用被引量：15
- 2013年
- 基因敲除技术是基因功能研究的最直接和有效的方法之一。近年来发展起来多种基因组功能性研究的高效工具,包括ZFNs、TALENs和Cas9等,为高效率基因打靶开辟了一条全新的思路。这些基因编辑的革命性技术,能大力推动生物学、医学研究的发展。但对这些新技术还没有进行系统研究。文中对基因敲除发展历程、技术原理以及新技术的应用等进行概述,为基因敲除技术的进一步发展应用提供依据。
- 陶果信吉阁肖晶刘海京成文敏查星琴曾养志
- 关键词：基因敲除RNA干扰
- CRISPR/Cas9技术及其应用于基因敲除研究进展被引量：1
- 2022年
- CRISPR/Cas9是一种高效率、简单操作、低成本的基因编辑工具,近年来广泛应用于动物、植物和微生物基因敲除研究,为深层次地应用于医学研究奠定了基础。概述CRISPR/Cas9技术在动物、植物和微生物的基因敲除中的研究进展,并对其深入研究进行展望。
- 张家翔韩佃刚杨云庆周思佳杨妮信吉阁
- 关键词：基因敲除
- 血清胆红素异常升高原因及检测方法的研究进展
- 2019年
- 胆红素(BIL)是内源性化合物,是胆色素中的一种,其代谢器官为肝脏。BIL是血红蛋白的最终分解产物,是肝脏和血液疾病的诊断标志。在正常的人体内,每天能产生达250-350mg。绝大部分的BIL是衰老红细胞破裂和降解来的,少数来自于组织。如血红素的辅基分解产生,极少部分是无效造血产生[1]。其本身具有毒性,但其BIL的本身具有抗氧化剂的功能,可以抑制亚油酸及磷脂的氧化。BIL包括间接BIL、直接BIL和共价结合与白蛋白的δBIL:间接BIL又称为非结合BIL,是不和葡萄糖醛酸相结合;直接BIL又称为结合BIL,是由间接BIL进入肝脏,通过肝脏作用,生成直接BIL;共价结合与白蛋白的δBIL,即结合BIL和白蛋白以共价键结合者。
- 杨宏清(综述)徐昆龙刘增萌杨斌王庆杰信吉阁(审校)
- 关键词：总胆红素直接胆红素间接胆红素
- 利用CRISPR/Cas9技术构建PPARγ基因敲除的IPEC-J2细胞系被引量：1
- 2023年
- 【目的】利用CRISPR/Cas9技术敲除猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)的过氧化物酶体增殖激活受体γ(PPARγ)基因,进而在细胞水平上研究PPARγ基因与肠道炎症反应相关的生物学机制。【方法】根据猪PPARγ基因序列(GenBank登录号:NM_214379),在第2外显子区域设计2对sgRNA序列,经退火形成DNA双链后连接至真核表达载体gRNA_GFP-T1;将构建成功的PPARγ正向打靶载体、反向打靶载体、Cas9-nickase质粒共转染至IPEC-J2细胞,经G418药物筛选获得单克隆细胞株,提取单克隆细胞株DNA后进行PCR扩增,经凝胶电泳鉴定后送测序;挑选基因敲除效果最佳的细胞株,利用免疫荧光法检测PPARγ蛋白表达情况。【结果】打靶载体测序结果显示,打靶序列正确连接;经转染、筛选后共获得48株单克隆细胞;测序结果显示,6株单克隆细胞出现双峰,分别为KO-15、KO-17、KO-21、KO-25、KO-32和KO-35;选择底峰较高的KO-25进行免疫荧光检测,结果显示PPARγ蛋白表达降低。【结论】本研究利用CRISPR/Cas9技术成功获得了PPARγ基因敲除的IPEC-J2细胞,为后续进一步研究PPARγ基因在炎症反应中的功能奠定了基础。
- 张家翔韩佃刚师亚玲毛晓月赵凯薇杜萱信吉阁
- 关键词：基因敲除
- 猪体细胞核移植技术研究进展被引量：2
- 2016年
- 猪体细胞核移植技术已发展十年多,技术日趋完善,许多实验室已可获得克隆猪和基因修饰猪。近年来新兴了多种基因高效靶向修饰和调控技术,为基因修饰猪研究奠定了技术基础,推进了基因修饰猪的研究从基础研究转向应用研究。介绍了猪体细胞核移植技术的发展历程,主要技术环节的优化,并对猪体细胞核移植的技术优势,在农业、生物医药上的应用及意义,存在问题与前景等进行了概述。
- 张宏燕信吉阁
- 关键词：体细胞核移植技术基因修饰转基因
