国家自然科学基金(30370901)
- 作品数：19 被引量：171H指数：9
- 相关作者：张木清张积森陈如凯郭春芳阙友雄更多>>
- 相关机构：福建农林大学中华人民共和国农业部福建师范大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 甘蔗脯氨酸代谢两个关键酶基因的克隆及表达分析
- 甘蔗(Saccharum officinarum L.)是我国最重要的糖料作物,蔗糖已占全国食糖总产的 90%以上。由于蔗糖产业结构的调整和蔗区的西移,目前早植蔗面积已占全国植蔗总面积的 85%以上,研究甘蔗抗旱机制具有...
- 张积森张木清郭春芳陈由强叶冰莹陈如凯
- 文献传递
- 外源ABA和乙烯利胁迫下斑茅ACO基因表达的实时PCR分析被引量：6
- 2008年
- 研究了外源ABA和乙烯利胁迫处理对斑茅1-氨基环丙烷-1-羧酸氧化酶基因(ACO基因)表达情况的影响。在项目组克隆斑茅ACO基因的基础上,应用实时荧光PCR技术分析斑茅ACO基因在A-BA、乙烯利胁迫下的表达。结果表明,斑茅ACO基因在ABA的胁迫下,在3h有微弱上调表达,而6h时明显抑制,其后表达趋向平缓;在乙烯利的胁迫下,ACO基因在前期受抑制,其后呈明显上调表达,在24h后ACO基因的表达趋向平缓。斑茅ACO基因的表达受乙烯利诱导,而不受外源ABA诱导。
- 郭春芳张积森张木清陈如凯
- 关键词：斑茅乙烯利
- 水分胁迫下斑茅3个逆境代谢相关基因表达的实时PCR分析被引量：5
- 2007年
- 【研究目的】初步探讨斑茅3个关键逆境适应相关基因在水分胁迫下的表达机制。【方法】已克隆S-腺苷蛋氨酸脱羧酶、鸟氨酸氨基转移酶、甜菜碱脱氢酶3个基因和内参基因的基础上,应用定量PCR技术,对这3个基因在不同胁迫时间下的表达水平进行分析。【结果】斑茅的S-腺苷蛋氨酸脱羧酶、鸟氨酸氨基转移酶基因、甜菜碱脱氢酶基因表达在初期均受抑制,后期表达持续上调,但甜菜碱脱氢酶基因受水分诱导表达较前两个基因明显。【结论】这可能暗示着在斑茅中,脯胺酸和甜菜碱的合成受水分胁迫诱导,而甜菜碱的合成相对脯胺酸和多胺受水分胁迫诱导影响更大。这些研究为斑茅抗旱的分子机制提供初步的理论基础。
- 张积森阙友雄李伟阮妙鸿张木清陈如凯
- 关键词：斑茅定量PCR
- 干旱胁迫下斑茅消减文库的构建及分析被引量：17
- 2007年
- 以干旱胁迫下斑茅（Saccharum arundinaceumRetz.）叶片组织的cDNA为Tester,正常生长条件下斑茅叶片组织cDNA为Driver,利用抑制性消减杂交技术（Suppression Subtractive Hybridization,SSH）构建斑茅干旱胁迫消减文库。文库克隆总量约为30 000个,克隆重组率为99.2%;随机从文库中挑取3500个克隆分析表明,插入片段长度主要集中在200-1 000 bp之间,500 bp以上的有463个克隆,500 bp以下的有3 037个克隆,平均长度约450 bp;通过随机对16个文库阳性克隆的测序及分析,3个克隆与ATP-NAD kinase、Aldo/keto reductase和锌指蛋白高度同源,3个克隆没有同源性,10个与逆境相关,是功能未知的EST。选择编号为EL0149和EL0145两个克隆进行Northern杂交验证,结果表明EL0149克隆为干旱胁迫上调表达的EST序列,而EL0145在正常供水和干旱条件下均无明显的的杂交信号。说明本研究克隆的SSH文库质量较高,可以进一步利用SSH文库结合芯片表达谱分析作物水分胁迫下的相关抗旱基因网络。
- 刘文荣张积森饶进蔡秋华翁笑艳阮妙鸿阙友雄陈如凯张木清
- 关键词：斑茅干旱胁迫抑制性消减杂交表达序列标签
- 斑茅两个看家基因片段的克隆及其在基因芯片中的应用被引量：15
- 2007年
- 根据已发表的同源基因序列,利用RT-PCR技术分离了斑茅(Erianthus arundinaceus)的GAPDH和APRT两个看家基因片段,用它们作为cDNA芯片阳性参照,以未经聚乙二醇(PEG)胁迫处理的斑茅叶片为对照,和PEG胁迫的4组材料同cDNA芯片进行杂交分析。杂交结果显示,GAPDH杂交的Cy5与Cy3平均信噪比(Signal/Noise,S/N)分别为56.12和60.8,APRT杂交的Cy5与Cy3平均信噪比分别为51.06和47.25,信噪比均很高;同时两个看家基因的杂交都显示出极强的信号,其中GAPDH的杂交信号值大于10000,APRT也在8000以上,杂交结果可靠。分析了PEG胁迫4个时段BADH与两个看家基因的表达,BADH的表达有明显变化,而看家基因表达均较稳定。上述结果表明所克隆的两个看家基因在斑茅中表达量高,且PEG胁迫下表达较为稳定,是基因芯片理想的阳性参照。
- 张积森李伟阙友雄阮妙鸿张木清陈如凯
- 关键词：斑茅基因芯片PEG
- 斑茅抗旱全长cDNA文库的构建被引量：5
- 2008年
- 以干旱处理后的甘蔗近缘属植物斑茅为材料,采用SMARTTM方法,合成并富集ds cDNAs,然后通过电泳时分段切胶以分离不同大小片段并分别与载体连接和转化,构建了斑茅的抗旱全长cDNA文库,为进一步研究和利用斑茅中的抗旱基因奠定了基础。
- 刘孝开张木清
- 关键词：全长CDNASMART干旱胁迫
- 甘蔗斑茅属间远缘杂种后代对NaCl胁迫的响应被引量：4
- 2005年
- 以甘蔗(拔地拉)与斑茅的杂种F1(崖城96-66)、崖城96-66与商业栽培种(CP84-1198)的回交一代(崖城01-3和崖城01-6)为供试材料,从活性氧代谢角度探讨甘蔗与斑茅及其杂交后代对NaCl胁迫的响应。结果表明,在正常生长时,斑茅的POD活性及MDA含量显著高于甘蔗(拔地拉与CP84-1198),SOD,CAT活性和可溶性蛋白质含量比甘蔗(拔地拉与CP84-1198)低得多,叶绿素含量则介于拔地拉与CP84-1198之间;拔地拉与斑茅的杂种F1(崖城96-66)的SOD,CAT,POD活性均高于斑茅和拔地拉,叶绿素含量、可溶性蛋白质含量、MDA含量介于斑茅与拔地拉之间;崖城96-66与商业栽培种(CP84-1198)的回交一代(崖城01-3和崖城01-6)的SOD、CAT活性及MDA、叶绿素含量与其亲本相差无几,但POD活性则显著低于崖城96-66,而与CP84-1198保持在相同的水平。200mmol/LNaCl胁迫下斑茅的SOD活性上升,拔地拉、CP84-1198、崖城96-66、崖城01-3、崖城01-6的SOD活性下降,其中拔地拉与崖城96-66的SOD活性降幅最小,同时,NaCl胁迫下斑茅的CAT活性下降,在所有参试材料中降幅最小,POD活性上升,在所有参试材料中增幅最小,表明斑茅具有很强的抗盐性,维持活性氧代谢动态平衡的能力强。
- 陈义强郭莺郭春芳张木清
- 关键词：斑茅活性氧代谢盐胁迫
- 水分胁迫下Ca^(2+)与甘蔗内源ABA的关系
- 2007年
- 本文选取甘蔗(Saccharum officinarumL.)福农95-1702为材料,结合钙离子螯合剂EGTA预处理,对水分胁迫下Ca2+与内源激素ABA的关系进行研究。结果表明,30%PEG处理下,甘蔗幼苗叶片中的内源ABA含量升高。1-3mmol/L的EGTA预处理显著抑制了水分胁迫下内源ABA的累积。这些结果表明Ca2+可能参与了水分胁迫下ABA的合成和释放,第二信使Ca2+与ABA所介导的信号转导之间可能存在交流与互作,协同调节甘蔗的抗旱性。
- 翁笑艳阮妙鸿张积森郭春芳郭莺张木清
- 关键词：甘蔗CA^2+
- 抑制性消减杂交技术在植物基因克隆中的应用被引量：5
- 2006年
- 抑制性消减杂交(SSH)技术是近十年来才发展起来的一种克隆差异新基因的快速、高效的技术。本文通过与其他几种目前主要的差异基因分离技术的比较,介绍了SSH技术基本原理、基本过程及优缺点,并对SSH技术在植物基因研究应用上的最新进展进行评述。
- 刘文荣张木清
- 关键词：基因克隆
- 甘蔗常用亲本及其衍生品种的抗旱性评价被引量：39
- 2007年
- 【目的】为获得抗旱性强的甘蔗亲本及其衍生品种提供依据。【方法】利用已建立的甘蔗抗旱生理鉴定技术对38个中国常用甘蔗亲本及其衍生品种进行盆栽人工水分胁迫抗旱性评价。【结果】通过聚类和判别分析将其抗旱性分为3类。【结论】抗旱亲本桂糖11及其衍生的品种云蔗89-351、桂糖89-5表现较强的抗旱性;中高抗亲本CP72-1210和新台糖1号衍生品种的抗旱性取决于另一亲本的抗旱性,与抗旱性强的亲本粤农73-204、湛74-141衍生的品种粤糖93-159、福农95-1702和福农91-4621表现为较强抗旱性,选择不抗旱亲本科5和闽糖69-243组配组合选育的福农91-4710和福农94-0403的抗旱性为中低抗;不抗旱亲本选15衍生的品种闽糖92-505等基本不抗旱。其它亲本种质如斑茅、福农81-745、崖90-33和崖73-512等经鉴定为抗旱种质或亲本。
- 陈义强邓祖湖郭春芳陈如凯张木清
- 关键词：甘蔗抗旱常用亲本
